簡介：背景MIRNA（MICRNA）是由約22個核苷酸組成的單鏈小RNA，并在真核生物細(xì)胞中廣泛存在，MIRNA基因約占整個基因組的1％。近些年來的各項(xiàng)研究表明MIRNA一個非常龐大的家族，存在于是在植物、線蟲、果蠅、小鼠、大鼠和人等多個物種中。MIRNA對各種進(jìn)行基因表達(dá)調(diào)控是通過在轉(zhuǎn)錄后水平與其靶MRNA的互補(bǔ)配對，導(dǎo)致MRNA的翻譯、翻譯抑制以及降解。一個異常復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)由MIRNA與靶MRNA分子組成，參與包括細(xì)胞繁殖與凋亡，細(xì)胞分化與發(fā)育，以及逆境應(yīng)答等多種生物學(xué)過程。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCS）可具有多向分化潛能，能分化成多種類型的結(jié)締組織，如骨組織、軟骨組織、骨骼肌組織、肌腱組織、韌帶組織、真皮組織、脂肪組織，也可分化成神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)元細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞等。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCS）易于在體外擴(kuò)增，來源又比較廣泛，是目前組織工程中一種重要的種子細(xì)胞。各種生物體的生長發(fā)育、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、組織分化以及疾病發(fā)生等MIRNA均參與調(diào)控，其同時它眾多生物體發(fā)育和行為等的變化MIRNA同樣起著決定作用。在干細(xì)胞增殖以及分化中MIRNA的作用及意義這些年來開始受到關(guān)注。在許多種干細(xì)胞中MIRNA都有表達(dá)，并且通過調(diào)節(jié)干細(xì)胞中某些關(guān)鍵基因的表達(dá)，對干細(xì)胞的保持自我更新以及多向分化等功能發(fā)揮作用。目的通過檢測骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及其誘導(dǎo)分化的成骨細(xì)胞中MIRNA210基因的表達(dá)高低，推測MIRNA210的功能，證明MIRNA210調(diào)控人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨分化。從而，進(jìn)一步驗(yàn)證了在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化中MIRNA的重要作用及意義。方法1對收集的標(biāo)本中的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞采用全骨髓貼壁法（貼壁篩選法）、密度梯度離心法進(jìn)行分離培養(yǎng)。人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的鑒定是通過觀察細(xì)胞形態(tài)特點(diǎn)并對細(xì)胞表面標(biāo)志物（CD29、CD44、CD34、CD45）采用流式細(xì)胞儀檢測來完成。2采用文獻(xiàn)報(bào)道的經(jīng)典的方法Β甘油磷酸鈉、地塞米松和維生素C聯(lián)合誘導(dǎo)人MSCS向成骨細(xì)胞方向分化。誘導(dǎo)分化的成骨細(xì)胞的鑒定是堿性磷酸酶（ALP）染色、茜素紅S法染色來對比完成。3利用REALTIMEPCR觀察對比MIRNA210在人MSCS與其誘導(dǎo)成的成骨細(xì)胞的差異。4采用將MIRNA210模擬物及阻遏物轉(zhuǎn)染至人MSCS中14天后，通過堿性磷酸酶（ALP）染色、茜素紅S法染色對轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果1經(jīng)全骨髓貼壁法（貼壁篩選法）及密度梯度離心法分離貼壁培養(yǎng)所得到的細(xì)胞，采用流式細(xì)胞儀檢測的結(jié)果為細(xì)胞表面標(biāo)志物CD34、CD45為陰性，細(xì)胞表面標(biāo)志物CD29、CD44為陽性，符合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞基本特征。2采用文獻(xiàn)報(bào)道的經(jīng)典的方法Β甘油磷酸鈉、地塞米松和維生素C聯(lián)合誘導(dǎo)14天后得到的細(xì)胞堿性磷酸酶染色（ALP）染色及茜素紅S法染色均為陽性，符合成骨細(xì)胞的特征。3利用REALTIMEPCR觀察與對比MIRNA210在人MSCS與其誘導(dǎo)成的成骨細(xì)胞的差異。表明MIRNA210在人MSCS中高表達(dá)，在誘導(dǎo)成的成骨細(xì)胞低表達(dá)。4將MIRNA210模擬物（MIRNA210MIMICS）及阻遏物（MIRNA210INHIBITS）轉(zhuǎn)染至人MSCS中14天后，通過堿性磷酸酶（ALP）染色、茜素紅S法染色對轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞進(jìn)行鑒定。轉(zhuǎn)染MIRNA210模擬物的細(xì)胞能夠保持骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞基本特征；而轉(zhuǎn)染MIRNA210阻遏物的細(xì)胞堿性磷酸酶（ALP）染色、茜素紅S法染色均陽性。結(jié)論1用全骨髓貼壁法（貼壁篩選法）及密度梯度離心法可以從骨髓中分離得到人MSCS，人MSCS可在體外培養(yǎng)被誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞。2通過REALTIMEPCR的結(jié)果可以推測MIRNA210具有保持骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞特性的功能。3通過轉(zhuǎn)染MIRNA210模擬物及阻遏物進(jìn)一步證明MIRNA210具有保持骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞特性的功能。

簡介：RANKLRANKOPG系統(tǒng)的失衡已被大量文獻(xiàn)證實(shí)與THA術(shù)后無菌性松動引起的假體周圍骨溶解密切相關(guān)，但感染松動引起的假體周圍骨溶解其發(fā)病機(jī)制則鮮見報(bào)道。本研究擬通過檢測RANKLRANKOPG信號通路在體外細(xì)胞和界膜組織中的表達(dá)情況，探討RANKLRANKOPG系統(tǒng)是否與感染松動引起假體周圍骨溶解的發(fā)病相關(guān)。第一章RANK在巨噬細(xì)胞中的表達(dá)目的探討凝血酶和UHMWPE顆粒處理后巨噬細(xì)胞中RANKMRNA的表達(dá)差異。方法用佛波酯將U937單核細(xì)胞誘導(dǎo)為巨噬細(xì)胞，通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、免疫學(xué)標(biāo)志檢查及體外吞噬功能檢測等方法鑒定是否成功。將UHMWPE顆粒用球磨機(jī)研磨后進(jìn)行其直徑、性質(zhì)和內(nèi)毒素含量檢測。將誘導(dǎo)成功的巨噬細(xì)胞分別與凝血酶和制備好的UHMWPE顆粒共同培養(yǎng)，MTT法檢測凝血酶和UHMWPE顆粒對巨噬細(xì)胞的最佳濃度。將巨噬細(xì)胞分為細(xì)胞凝血酶組、細(xì)胞UHMWPE顆粒組和單純細(xì)胞組（對照組），實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)檢測RANKMRNA在三種巨噬細(xì)胞中的表達(dá)差異。結(jié)果U937單核細(xì)胞經(jīng)佛波酯處理后能成功被誘導(dǎo)為巨噬細(xì)胞，具備巨噬細(xì)胞的形態(tài)特征、表達(dá)特異的分化抗原CD14和較好吞噬能力。研磨后UHMWPE顆粒平均直徑約為846ΜM±630ΜM，內(nèi)毒素含量為0053EUML，符合實(shí)驗(yàn)要求。MTT法檢測凝血酶和UHMWPE顆粒對巨噬細(xì)胞的最佳濃度分別為50UML和01MGML。經(jīng)顆粒處理后的巨噬細(xì)胞，其RANKMRNA的表達(dá)水平明顯高于其他兩組，P＜001，而凝血酶處理組RANKMRNA的表達(dá)水平也明顯高于對照組，P＜001。結(jié)論U937單核細(xì)胞能被佛波酯成功誘導(dǎo)為成熟的巨噬細(xì)胞。凝血酶處理后巨噬細(xì)胞中RANKMRNA的表達(dá)水平明顯升高，但RANKMRNA的升高水平不如UHMWPE顆粒處理后明顯。第二章RANKL、OPG在HFOB119成骨細(xì)胞中的表達(dá)目的探討凝血酶和UHMWPE顆粒處理后HFOB119成骨細(xì)胞中RANKL和OPGMRNA的表達(dá)差異。方法將HFOB119成骨細(xì)胞分別與凝血酶和UHMWPE顆粒共同培養(yǎng)，MTT法檢測凝血酶和UHMWPE顆粒對巨噬細(xì)胞的最佳濃度。將HFOB119細(xì)胞分為細(xì)胞凝血酶組、細(xì)胞UHMWPE顆粒組和對照組，用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)檢測經(jīng)三組HFOB119細(xì)胞中RANKL、OPGMRNA的表達(dá)差異及RANKLOPG的表達(dá)比率。結(jié)果MTT法檢測凝血酶和UHMWPE顆粒對HFOB119細(xì)胞的最佳濃度分別為50UML和01MGML。經(jīng)顆粒處理后的HFOB119細(xì)胞，其RANKL和OPGMRNA的表達(dá)水平均明顯高于其他兩組，P＜001，而凝血酶處理組RANKL和OPGMRNA的表達(dá)水平也明顯高于對照組，P＜001。RANKLOPG比率，顆粒處理組同樣高于其他兩組，但凝血酶處理組與對照組之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＞005。結(jié)論UHMWPE顆粒處理HFOB119細(xì)胞后，RANKL、OPGMRNA表達(dá)明顯升高，RANKLOPG比率增加。凝血酶處理HFOB119細(xì)胞后能促進(jìn)細(xì)胞RANKL、OPGMRNA的表達(dá)，但作用不如UHMWPE顆粒明顯。第三章RANKLRANKOPG系統(tǒng)在感染界膜中的表達(dá)目的探討RANKLRANKOPG系統(tǒng)在感染界膜、無菌性松動界膜和正?；ぶ械谋磉_(dá)差異。方法收集17例感染界膜組織、26例無菌性松動界膜組織及12例正?；そM織，用掃描電鏡及透射電鏡對三種組織進(jìn)行微觀形態(tài)的觀察。用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)檢測三種組織中RANKL、RANK和OPGMRNA的表達(dá)差異，用免疫組化法和WESTERNBLOT法檢測三種組織中RANKL、RANK和OPG蛋白的表達(dá)差異。結(jié)果三種組織的微觀形態(tài)有明顯差異，掃描電鏡可見無菌性松動界膜表面廣泛分布磨損顆粒，感染界膜在透射電鏡下中可見到桿菌的存在。無菌性松動界膜組織中RANKL、RANK及OPGMRNA的表達(dá)均明顯高于其他兩組，P＜001。感染界膜中RANKLMRNA的表達(dá)較其在正?；ぶ猩险{(diào)，P＜005但RANK、OPGMRNA在這兩種組織中的表達(dá)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＞005。RANKLOPG比率，無菌性松動界膜組P＜001與感染界膜組P＜005的RANKLOPG比率均高于正?；そM。無菌性松動界膜組織中RANKL、RANK蛋白的表達(dá)均明顯高于其他兩組，P＜001。感染界膜中RANKL蛋白的表達(dá)較其在正常滑膜中上調(diào)，P＜005，OPG蛋白在這兩種組織中的表達(dá)無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＞005。結(jié)論感染界膜中RANKL的表達(dá)上調(diào)，RANKLOPG比率的上升，感染松動引起的假體周圍骨溶解機(jī)制與RANKLRANKOPG系統(tǒng)失衡相關(guān)，但RANKLRANKOPG系統(tǒng)失衡并不是其唯一的發(fā)病機(jī)制。

簡介：本研究利用CHO表達(dá)系統(tǒng)得到了BMP7高表達(dá)細(xì)胞株，實(shí)驗(yàn)證明CHO細(xì)胞能夠分泌有體外誘骨活性的BMP7蛋白。而實(shí)現(xiàn)基因治療的關(guān)鍵在于目的基因的高效轉(zhuǎn)移并適度表達(dá)。腺病毒載體是近年來用于基因治療最多的病毒載體之一，它可感染多種細(xì)胞，而且不整合到宿主基因組中，表達(dá)持續(xù)的時間短，這正是局部成骨所需要的。本研究利用了腺病毒的這一特性，嘗試用基因治療的方法使BMP7在骨缺損局部持續(xù)分泌表達(dá)，驗(yàn)證其加快骨愈合過程的能力。第一部分BMP7全長序列的獲得和相關(guān)表達(dá)載體的構(gòu)建結(jié)論成功得到了與GENEBANK報(bào)道序列完全一致的BMP7CDNA，構(gòu)建了正確的真核表達(dá)載體及重組腺病毒載體，為深入研究BMP7的生物特性提供了重要的研究基礎(chǔ)。第二部分篩選穩(wěn)定表達(dá)HBMP7的CHO細(xì)胞克隆結(jié)論篩選出穩(wěn)定表達(dá)BMP7的CHO細(xì)胞株，所分泌的BMP7蛋白分子量為3236KDA；利用特異敏感的ELISA方法精確定量出BMP7的單細(xì)胞分泌量，根據(jù)ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線，CHO細(xì)胞分泌BMP7的水平最高可達(dá)15MGL；建立了靈敏的體外測活方法，結(jié)果顯示在BMP7的作用下，ALP的合成呈劑量依賴性和時間依賴性。第三部分兔骨缺損模型的建立及ADCMVBMP7修復(fù)骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究結(jié)論本研究成功分離、純化了兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞，作為具有分化能力的前體細(xì)胞，MSCS在外源BMP7作用下，胞內(nèi)ALP合成增多，提示其向成骨方向分化，并且在接受BMP7刺激信號后可分泌BMP7蛋白至胞外，形成一個自分泌的循環(huán)過程；驗(yàn)證了基于細(xì)胞的基因治療應(yīng)用于骨缺損修復(fù)的有效性，結(jié)果顯示，植入材料，骨髓基質(zhì)細(xì)胞和BMP7在體內(nèi)共同模擬了自然的成骨過程，加快了新骨生成的速度，這是單一成分或二者結(jié)合所不能達(dá)到的。

簡介：目的促進(jìn)骨折愈合、減少并發(fā)癥一直是骨科研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)問題。本實(shí)驗(yàn)旨在從骨形態(tài)計(jì)量學(xué)等方面闡述骨折擴(kuò)髓后對髓內(nèi)成骨過程的影響，評估骨折治療過程中的再損傷，為臨床治療提供實(shí)驗(yàn)參考。材料與方法1健康新西蘭大白兔30只，制備雙側(cè)橈骨中段3MM骨缺損的骨折模型，為避免骨外膜對觀察髓內(nèi)成骨的影響，去除骨折端兩側(cè)各10MM骨外膜。實(shí)驗(yàn)按左右側(cè)分為2組，每組30側(cè)前肢。選擇右側(cè)作為實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行擴(kuò)髓處理；左側(cè)為對照組，不擴(kuò)髓。2擴(kuò)髓組，選用直徑1015MM微型磨鉆自骨折端進(jìn)入分別向橈骨近、遠(yuǎn)端擴(kuò)髓；非擴(kuò)髓組，保留原模型不做其他干預(yù)處理。3分別于骨折后第2、4及8周，取標(biāo)本進(jìn)行大體組織觀察、影像學(xué)觀察、骨密度測定、骨痂病理組織學(xué)觀察。結(jié)果1X線攝片實(shí)驗(yàn)側(cè)術(shù)后2周骨折端血腫邊緣有少許骨痂包繞，骨折間隙清晰；術(shù)后4周骨折界面模糊，有部分連接骨痂、封閉骨痂生成，髓腔未通；術(shù)后8周骨缺損明顯，髓腔未通。對照側(cè)術(shù)后2周骨折間隙模糊，有明顯骨痂生長；術(shù)后4周連續(xù)性骨痂通過骨折線，骨痂已經(jīng)開始塑形改造，髓腔部分開通；術(shù)后8周骨折線消失，骨干外形連續(xù)，骨髓腔已經(jīng)基本恢復(fù)較規(guī)則。X線攝片評分分析表明，實(shí)驗(yàn)側(cè)成骨速度明顯慢于對照側(cè)（P001）。2組織學(xué)實(shí)驗(yàn)側(cè)術(shù)后2周可見少量軟骨細(xì)胞，成骨細(xì)胞數(shù)量少，有較多纖維肉芽組織；術(shù)后4周尚有軟骨組織殘留，夾存纖維骨痂，新生骨小梁排列紊亂，破骨細(xì)胞偶見，內(nèi)骨痂少量；術(shù)后8周骨小梁排列方向不規(guī)則，髓腔未通，骨缺損明顯。對照側(cè)術(shù)后2周可見大量軟骨細(xì)胞和纖維細(xì)胞，骨表面出現(xiàn)數(shù)目較多的成骨細(xì)胞，編織骨痂連接；術(shù)后4周骨改建已基本完成，并見到骨髓腔部分開通。骨性骨痂連接，大部分編織骨已被改建；術(shù)后8周骨髓腔完全開通，髓腔中可見大量髓細(xì)胞。3骨密度實(shí)驗(yàn)側(cè)骨密度（（BMD）在術(shù)后2，4，8周低于對照側(cè)（P001）。結(jié)論研究顯示擴(kuò)髓后內(nèi)骨痂形成減少，髓內(nèi)成骨過程延遲。擴(kuò)髓對于長骨骨折髓內(nèi)成骨過程破壞較大，產(chǎn)生的再損傷在臨床治療中應(yīng)引起重視。

簡介：點(diǎn)擊查看更多法尼酯X受體基因敲除(FXR---)鼠骨代謝的改變及其機(jī)制的初步探討.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：研究背景及目的感染性骨缺損是創(chuàng)傷性慢性骨髓炎是一種嚴(yán)重的骨組織感染性疾病通?？蓪?dǎo)致骨的進(jìn)行性、炎性破壞無法控制的炎癥破壞是其主要特點(diǎn)后期還存在對抗生素治療反應(yīng)不明感、反復(fù)復(fù)發(fā)等特征。革蘭氏陽性金黃色葡萄球菌是導(dǎo)致骨髓炎的最常見致病菌占全部骨髓炎病例的80％左右骨感染造成的死亡率達(dá)2730萬古霉素是目前臨床上用于治療由MRSA耐甲氧西林金黃色葡萄球菌引起的嚴(yán)重感染疾病的重要藥物是目前國內(nèi)治療MRSA感染的首選用藥。但是由于其全身用藥量較大對耳腎均有毒性局部用藥半衰期短反復(fù)用藥又增加了感染率無法達(dá)到有效的長期控制感染的效果給臨床治療帶來了困難。早在1906年EHRLICH就提出了靶向給藥的設(shè)想隨著生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展這一設(shè)想逐漸成為現(xiàn)實(shí)。1980年KLEMM首次局部應(yīng)用慶大霉素聚甲基丙烯酸酯防治骨及軟組織感染獲得成功引起了人們的重視。本實(shí)驗(yàn)旨在通過復(fù)乳固化法制作萬古霉素緩釋微球復(fù)合微小顆粒骨一期植骨治療感染性骨缺損的效果探討新的治療感染性骨缺損的方法為其應(yīng)用臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)方法1、載萬古霉素PLGA微球的制備取2MGPLGA溶解于20ML二氯甲烷中攪拌制備成初乳相取2ML吐溫80加入40ML蒸餾水中以700RM1轉(zhuǎn)速攪拌制得第二初乳相取1ML濃度為200MGML1的萬古霉素溶液加入PLGA溶液中4000RM1轉(zhuǎn)速下分散、攪拌再將該混合液加入初乳相吐溫80混合液中用高速分散器XHFD寧波新芝生物科技股份有限公司4000RM1轉(zhuǎn)速下分散制成PLGA微球的初始液室溫下持續(xù)攪拌4小時靜置待有白色沉淀附著燒杯底后6000RM1318KSIGMA公司德國速度離心清洗3遍后20℃冷凍干燥SCIENT210N寧波新芝生物科技股份有限公司制得載萬古霉素的PLGA微球。分別對其進(jìn)行形態(tài)特征及粒徑分布測定微球中萬古霉素的含量測定含量測定中還包括載藥率和包封率抗生素溶液穩(wěn)定性體外釋放微球中萬古霉素活性和MIC測定。2、動物實(shí)驗(yàn)取48只家兔按沈霖造模法造成雙側(cè)橈骨中上段慢性骨髓炎模型將動物隨機(jī)分為3組每組16只。1個月后按常規(guī)方法將骨髓炎局部作徹底清創(chuàng)并造成橈骨中上段1CM節(jié)段性骨缺損的條件下A組一期行自體小顆粒骨植入B組一期行自體微小顆粒骨和萬古霉素植入C組一期行自體微小顆粒骨和萬古霉素緩釋微球混合植入。分別于術(shù)前、術(shù)后1天、3天、1周、2周、4周測定各組動物血清C反應(yīng)蛋白及血沉并于術(shù)后2周、4周、8周、12周每組處死4只兔子行植骨區(qū)大體形態(tài)X線及組織學(xué)觀察并進(jìn)行評分。結(jié)果1、微球測定結(jié)果微球表面光滑、無孔隙載藥率達(dá)到440±02635包封率達(dá)到4851±14827HVPLGAMSS溶解7天的累積釋放率達(dá)到4336有相對比較長的釋放周期在體外抑菌試驗(yàn)中HVPLGAMSS釋放的萬古霉素作用效果明顯。2、動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果①大體形態(tài)觀察其中A組1只家兔術(shù)后2周植骨部位出現(xiàn)竇道流出膿性分泌物術(shù)后4周A組局部可見植入之顆粒骨被纖維組織覆蓋B、C組局部可見骨痂形成針刺感較硬術(shù)后8周A組可見骨痂形成填滿骨缺損區(qū)B、C組骨痂形成致密骨缺損區(qū)完全愈合骨折端連接良好術(shù)后12周各組骨缺損區(qū)完全愈合骨折端連接良好。②血清C反應(yīng)蛋白在術(shù)后第1周時B組顯著低于A組水平P③血沉在術(shù)后第2周時B組顯著低于A組水平P④植骨區(qū)X線觀察及評分4周時A組可見有骨痂形成仍可見植入之顆粒骨骨折線清晰B、C組可見有骨痂形成基本連接骨段端8周時A組骨痂量增加骨折線已基本消失髓腔尚未通B、C組新生皮質(zhì)骨結(jié)構(gòu)出現(xiàn)與宿主皮質(zhì)骨連接髓腔已基本再通12周時三組均可見骨缺損區(qū)已達(dá)骨性愈合髓腔再通。術(shù)后第2、4、8周B組X線和組織學(xué)評分均優(yōu)于A組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。第12周A、B、C三組X線評分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。⑤植骨區(qū)組織學(xué)觀察及評分2周時A組可見植入之大塊顆粒骨組織有纖維組織填充B、C組見有大量軟骨島形成C組亦可見有部分微球未被吸收附著于軟骨島附近。4周時A組骨小梁稀疏走行不規(guī)則B、C組骨小梁較為致密走行較為一致C組新生骨組織周圍未發(fā)現(xiàn)有微球存在。8周時A組骨小梁走行一致原始髓腔將要形成B、C組骨小梁形成的編織骨已逐漸向板層骨過渡骨板周圍見大量成骨細(xì)胞髓腔基本貫通。12周三組骨缺損區(qū)編織骨被板層骨替代骨質(zhì)較厚為片狀骨陷窩大量分布其中髓腔再通。術(shù)后2、4、8、12周組織學(xué)評分A、B組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。結(jié)論1、利用WOW方法制作的萬古霉素緩釋微球?qū)θf古霉素藥物本身無影響。2、萬古霉素PLGA緩釋微球在作用于金黃色葡萄球菌時其抑菌效果與單純?nèi)f古霉素相同且抑菌時間長。3、手術(shù)徹底清創(chuàng)后自體微小顆粒骨復(fù)合萬古霉素緩釋微球植入法對于治療感染性骨缺損是可行的。4、對于治療感染性骨缺損時萬古霉素緩釋微球?qū)Τ晒亲饔脽o影響。5、對于感染性骨缺損家兔的治療局部應(yīng)用萬古霉素緩釋微球其療效與單純?nèi)f古霉素相同。

簡介：由于創(chuàng)傷或先天性原因?qū)е碌牟豢苫謴?fù)的骨組織損傷及結(jié)構(gòu)改變，每年有大量的患者需要通過骨移植方式進(jìn)行骨組織再生重建。當(dāng)前，很多種方法被應(yīng)用于骨組織修復(fù)重建，主要是通過使用自體骨移植（從患者），異體骨移植（從供體）和各種生物材料三種方式進(jìn)行。自體骨移植一直以來被認(rèn)為是治療骨缺損的金標(biāo)準(zhǔn)，雖然有成功的案例，但這種技術(shù)受到材料可用性的限制。同種異體植骨技術(shù)，則可能會引入免疫排斥反應(yīng)或病原體侵入等副作用。因此尋找可替代的人工骨修復(fù)材料成為骨組織修復(fù)重建的發(fā)展方向。成功實(shí)現(xiàn)組織工程化骨損傷修復(fù)包含三個主要因素具有成骨分化潛能的種子細(xì)胞、具有誘導(dǎo)種子細(xì)胞向成骨方向分化的生長因子以及支持種子細(xì)胞生長的三維立體支架。因此，本課題的目的在于利用同軸靜電紡絲技術(shù)，構(gòu)建能夠緩慢釋放促成骨誘導(dǎo)因子的納米纖維復(fù)合支架。為種子細(xì)胞提供理想的體外增殖、粘附、分化微環(huán)境，促進(jìn)體外組織工程化骨損傷修復(fù)。為組織工程化骨損傷修復(fù)的研究提供新的思路。方法1不同RFNCDH11蛋白濃度的仿生納米骨支架的制備基于課題組的前期工作，課題組成員張瑗博士合成的RFNCDH11蛋白的融合基因，利用PET22B作為基因載體，以ROSETTAGAMITMIDE3為感受態(tài)細(xì)胞，表達(dá)和純化得到的RFNCDH11蛋白質(zhì)。采用同軸靜電紡絲技術(shù)，構(gòu)建含有聚乙烯醇PVA、聚乳酸羥基乙酸共聚物PLGA、Ⅰ型膠原蛋白，以及不同濃度的重組纖維連接蛋白鈣粘附蛋白0ΜGML、10ΜGML、100ΜGML、500ΜGML、1000ΜGML的仿生納米骨支架。2不同RFNCDH11蛋白濃度的仿生納米骨支架的表征評價利用傅立葉紅外光譜儀FTIR、X線光電子能譜XPS、掃描電鏡SEM、透射電鏡TEM以及高效液相色譜分析HPLC等方法，了解骨支架的化學(xué)元素的組成、表面微觀結(jié)構(gòu)，納米纖維的微觀結(jié)構(gòu)以及RFNCDH11蛋白的釋放效率接觸角分析CONTACTANGLE與生物力學(xué)分析法用于測定納米骨支架的親疏水性與抗拉強(qiáng)度、彈性模量。通過評價仿生骨納米支架的生物理化性質(zhì)，判斷能否與組織相容。3不同RFNCDH11蛋白濃度的仿生納米骨支架的體外功能學(xué)研究以入骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞HMSCS為種子細(xì)胞，通過掃描電鏡法觀察HMSCS在骨支架表面增殖、粘附、形態(tài)的情況MTT法檢測細(xì)胞增殖與支架的對細(xì)胞的毒性作用實(shí)時定量PCRQRTPCR法檢測ALPL基因、OCN基因、RUNX2基因的表達(dá)情況。結(jié)果1不同RFNCDH11蛋白濃度的仿生納米骨支架的制備按照最適宜的同軸電紡參數(shù)條件（V1618KV，V內(nèi)V外0407MLH，D15CM），成功制備不同RFNCDH11蛋白濃度的仿生納米骨支架若干張。2不同RFNCDH11蛋白濃度的仿生納米骨支架的表征評價1SEM觀察骨支架表面形態(tài)均勻，納米纖維連續(xù)性較好，無串珠樣纖維存在，直徑分布均勻。IMAGEJ軟件測量結(jié)果顯示骨支架的纖維直徑與加入的RFNCDH11蛋白成反比。2TEM觀察了單根同軸納米纖維的內(nèi)部微觀結(jié)構(gòu)，為具有相同軸心的殼核結(jié)構(gòu)。3XPS數(shù)據(jù)顯示1330EV、1640EV、1900EV以及4010EV峰譜，即硫S、磷P、氮元素N，說明Ⅰ型膠原蛋白與RFNCDH11蛋白已經(jīng)被紡入同軸纖維內(nèi)。4FTIR結(jié)果表明，同軸電紡過程中沒有產(chǎn)生新的化學(xué)基團(tuán)產(chǎn)生，同軸纖維具各材料的優(yōu)勢性能。5孔隙率測定表明骨支架中的孔隙率介于6776％之間，其大小與RFNCDH11蛋白濃度成正比。6接觸角測試說明骨支架中含RFNCDH11蛋白濃度越大，支架的親水性越好。7力學(xué)測試結(jié)果顯示骨支架的承受的抗拉強(qiáng)度及彈性模量與支架中的RFNCDH11蛋白濃度成正比。8蛋白釋放檢測顯示出蛋白質(zhì)早期的“爆發(fā)性釋放”及后續(xù)的緩釋效果，實(shí)現(xiàn)了蛋白的可控緩慢釋放。通過以上表征評價，50ΜGML及100ΜGML濃度的RFNCDH11蛋白骨支架具有較好的理化性質(zhì)。3不同RFNCDH11蛋白濃度的仿生納米骨支架的體外功能學(xué)研究1SEM觀察HMSCS在接種到支架上培養(yǎng)3天、7天后的細(xì)胞形態(tài)3天組中50ΜGML蛋白濃度組的細(xì)胞生長狀態(tài)最好，成嵌入式生長在支架表面，粘稠物質(zhì)可能是分泌型成骨細(xì)胞分泌的細(xì)胞外基質(zhì)。7天組，各個蛋白濃度組之間未見明顯差異2MTT法檢測支架的促細(xì)胞粘附作用HMSCS細(xì)胞接種05H，1H，2H三個時間點(diǎn)內(nèi)，50ΜGML蛋白濃度組的OD值均最大且明顯高于陰性對照組P＜005。3MTT法檢測骨支架促細(xì)胞增殖作用HMSCS細(xì)胞接種2、4、6、8天四個時間點(diǎn)內(nèi)，50ΜGML蛋白濃度組的OD值均最大且明顯高于陰性對照組P＜005。4實(shí)時定量PCR法測試誘導(dǎo)成骨標(biāo)志基因的結(jié)果顯示HMSCS細(xì)胞接種1、2、3周內(nèi)，50ΜGML蛋白濃度組與陰性對照組的RQ值倍數(shù)均最大且明顯高于陰性對照組P＜0051周時，RUNX2基因表達(dá)最高，ALPL基因次之2周時，OCN基因及ALPL基因表達(dá)升高，RUNX2基因表達(dá)相對下降3周時RUNX2基因表達(dá)再次升高。通過以上細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)研究，50ΜGML蛋白濃度的RFNCDH11蛋白骨支架具有最佳的促HMSCS粘附、增殖、分化的作用。結(jié)論1本課題組前期工作中發(fā)現(xiàn)RFNCDH11融合蛋白具有良好的促HMSCS細(xì)胞粘附、增殖及向成骨細(xì)胞方向分化的能力，結(jié)合同軸靜電紡絲特有的殼核結(jié)構(gòu)，較好的實(shí)現(xiàn)了RFNCDH11蛋白的緩釋作用，持續(xù)而緩慢的作用于種子細(xì)胞。2同軸靜電紡絲法構(gòu)建的含有RFNCDH11蛋白的納米纖維骨支架是由獨(dú)特的殼核結(jié)構(gòu)，直徑分布為400800NM的纖維通過無序的排列形成，微觀結(jié)構(gòu)類似于細(xì)胞外基質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)。3同軸靜電紡絲法構(gòu)建的含有RFNCDH11蛋白的納米纖維骨支架具有良好的親水性、抗拉強(qiáng)度、化學(xué)組成以及優(yōu)良的可降解性，是一種能與細(xì)胞相容的仿生骨組織工程支架。4不同RFNCDH11蛋白濃度的同軸靜電紡絲法構(gòu)建的納米纖維骨支架均促進(jìn)了HMSCS體外增殖、粘附作用，HMSCS經(jīng)成骨誘導(dǎo)分化后，成骨標(biāo)志物基因如ALPL基因、OCN基因、RUNX2基因的表達(dá)上調(diào)。其中50ΜGMLRFNCDH11蛋白濃度的骨支架較其他4個濃度的納米纖維骨支架而言，成骨標(biāo)志基因表達(dá)顯著上調(diào)。550ΜGMLRFNCDH11蛋白濃度的同軸靜電紡絲納米纖維骨支架具有優(yōu)良的骨誘導(dǎo)與傳導(dǎo)性質(zhì)，可作為未來應(yīng)用與骨組織工程損傷修復(fù)的新型人工骨替代材料，但能否在體內(nèi)發(fā)揮良好的成骨作用，仍需進(jìn)一步研究。

簡介：本文分兩部分論述了膝關(guān)節(jié)翻修脛骨側(cè)骨缺損打壓植骨術(shù)后初始穩(wěn)定性的研究和打壓植骨翻修術(shù)后脛骨應(yīng)力的有限元研究。第一部分研究了膝關(guān)節(jié)翻修脛骨側(cè)骨缺損采用打壓植骨IMPACTINGBONEGRAFT技術(shù)治療，相關(guān)因素包括術(shù)前骨質(zhì)量、顆粒骨打壓程度、假體類型對假體初始穩(wěn)定性的影響，為臨床應(yīng)用此技術(shù)提供理論依據(jù)。方法取5具尸體的脛骨10根，制造T3型AI分型的包容性骨缺損，隨機(jī)選擇同一尸體的左右側(cè)脛骨進(jìn)行長短柄兩種假體的打壓植骨翻修，術(shù)前及術(shù)后觀察松質(zhì)骨骨密度的變化DEXA，進(jìn)行生物力學(xué)測試，靜載荷為20N，手動控制加壓至1000N，循環(huán)100次。結(jié)果手術(shù)前后骨密度測定有明顯的變化，平均BMD由術(shù)前0551GCM增加到術(shù)后的0993GCM，同一病人的雙側(cè)脛骨測量數(shù)值相近，短柄微動為13280±5669ΜM，長柄微動為11940±3838ΜM，長短柄假體在1000N循環(huán)載荷下的微動沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別P0673005，假體的微動與假體下方移植骨密度呈負(fù)線性相關(guān)。結(jié)論打壓植骨技術(shù)可以用于脛骨側(cè)嚴(yán)重骨缺損的治療，在完整皮質(zhì)骨支撐、骨水泥固定的前提下，長短柄兩種假體都能夠達(dá)到足夠的初始穩(wěn)定。第二部分研究了膝關(guān)節(jié)翻修脛骨側(cè)骨缺損打壓植骨術(shù)后脛骨總體應(yīng)力以及假體周圍骨質(zhì)應(yīng)力分布的變化。方法根據(jù)脛骨標(biāo)本的螺旋CT掃描數(shù)據(jù)及長短柄假體形態(tài)建立三維有限元模型，加載垂直方向3倍體重合力2250N，分析假體植入前后脛骨總體應(yīng)力模式并對脛骨近端假體周圍區(qū)域骨質(zhì)應(yīng)力分布進(jìn)行分區(qū)量化研究，分析和觀察手術(shù)后生物力學(xué)環(huán)境的變化。結(jié)果兩種假體植入后沒有改變脛骨總體的應(yīng)力模式，應(yīng)力峰值區(qū)域仍位于脛骨中下13交界前內(nèi)側(cè)，脛骨近端的應(yīng)力水平有所減小，應(yīng)力下降程度長柄假體要高于短柄假體；長柄假體應(yīng)力遮擋較大的區(qū)域位于距基座4CM以內(nèi)，最大達(dá)944％；而短柄假體應(yīng)力遮擋較大的區(qū)域位于距基座2CM以內(nèi)，最大達(dá)75％。假體與打壓的松質(zhì)骨之間界面的應(yīng)力值明顯高于皮質(zhì)骨的應(yīng)力，長柄假體周圍比短柄承受更大的壓應(yīng)力。結(jié)論兩種假體植入后均在脛骨骨近端形成顯著的應(yīng)力遮擋，以長柄假體更為明顯；假體周圍骨質(zhì)應(yīng)力大小和分布的改變是引起術(shù)后骨量丟失和假體松動的原因之一，也是術(shù)后假體周圍骨折發(fā)生的類型以及術(shù)后肢體疼痛發(fā)生的力學(xué)基礎(chǔ)。

簡介：目的①膠原酶消化法結(jié)合貼壁培養(yǎng)法分離、純化、培養(yǎng)兔臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（RABBITUMBILICALCDMESENCHYMALSTEMCELLS，RUCMSCS），為組織工程骨的構(gòu)建提供種子細(xì)胞。②鑒定所獲種子細(xì)胞為RUCMSCS。③評價納米羥基磷灰石殼聚糖（NANOHYDROXYAPATITECHITOSAN，NHACS）支架和殼聚糖CHITOSAN，CS支架與RUCMSCS的生物相容性，并通過PCRPOLYMEMSECHAINREACTION法評價RUCMSCS成骨誘導(dǎo)后的成骨潛能變化。④評價RUCMSCSNHACS支架復(fù)合體簡稱RUCMSCSNHACS和RUCMSCSCS支架復(fù)合體（簡稱RUCMSCSCS）構(gòu)建人工椎板的可行性。方法①無菌條件下收集孕約21天孕兔臍帶，剪成大約1MM3大小組織塊后，采用膠原酶消化法結(jié)合貼壁培養(yǎng)法獲得形態(tài)較為單一的貼壁細(xì)胞。②通過形態(tài)學(xué)觀察法、細(xì)胞表面標(biāo)志物流式細(xì)胞術(shù)FLOWCYTOMETRY，F(xiàn)CM和PCR檢測法、三系分化誘導(dǎo)后細(xì)胞染色和PCR檢測法對所獲細(xì)胞進(jìn)行鑒定。③將P3代RUCMSCS種植在NHACS、CS支架上，比較24H細(xì)胞粘附率，并設(shè)置單純細(xì)胞對照組，細(xì)胞粘附率（接種細(xì)胞數(shù)一未粘附細(xì)胞數(shù)）接種細(xì)胞數(shù)倒置顯微鏡觀察細(xì)胞在兩種支架周圍的生長狀態(tài)采用CCK8CELLCOUNTINGKIT8法測定NHACS組、CS組以及單純細(xì)胞組的RUCMSCS生長曲線PI染色和掃描電鏡觀察細(xì)胞在支架上的粘附狀況。將RUCMSCS成骨誘導(dǎo)4周，用熒光定量PCR法QUANTITATIVEPOLYMERASECHAINREACTION，QPCR檢測每周細(xì)胞中RUNX2表達(dá)變化。④將體重為20KG23KG，平均（213±011）KG，共150只健康雄性新西蘭大耳白兔隨機(jī)分為五組Ⅰ組為RUCMSCSNHACS組，Ⅱ組為RUCMSCSCS組，Ⅲ組為NHACS組，Ⅳ組為CS組，Ⅴ組為空白對照組，制備L5椎板缺損實(shí)驗(yàn)動物模型，缺損長寬約為10MM8MM大小，將相應(yīng)材料置入缺損椎板處，分別于術(shù)后2、4、8、12、16周對各組行CT、MRI掃描，并處死動物后解剖出相應(yīng)椎體行MICROCT掃描、蘇木精伊紅染色HEMATOXYLINEOSINSTAINING，HESTAINING、骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（BONEMPHOGEICPROTEIN2，BMP2）染色、骨鈣素OSTEOCALCIN，OCN等組織學(xué)檢測，以多種方法評估各組的成骨情況和椎板重建情況。結(jié)果①采用膠原酶消化法結(jié)合貼壁培養(yǎng)法獲得人量形態(tài)較為均一，呈梭形和成纖維狀，具備方向性排列的貼壁細(xì)胞。②流式細(xì)胞術(shù)和PCR法檢測純化后的貼壁細(xì)胞均表達(dá)CD105、CD73和CD90，不表達(dá)CD45、CD34，細(xì)胞經(jīng)三向誘導(dǎo)分化后茜素紅染色、油紅O染色陽性，RUNX2、PPARΓ和SOX9基因表達(dá)增高，表明細(xì)胞能分化為成骨、成脂和成軟骨細(xì)胞，鑒定所獲細(xì)胞為RUCMSCS。③NHACS組、CS組以及單純細(xì)胞組，接種24后的細(xì)胞平均粘附率分別為8948±154％、8858±212％、8952±101％，統(tǒng)計(jì)分析顯示在各個時間點(diǎn)細(xì)胞粘附率無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。細(xì)胞支架復(fù)合培養(yǎng)24H后，CS支架和NHACS支架周圍均可見細(xì)胞圍繞支架邊緣貼壁生長，細(xì)胞呈梭形，鏡下透亮度高，細(xì)胞狀態(tài)良好。RUCMSCSNHACS組、RUCMSCSCS組以及RUCMSCS組細(xì)胞接種后12天為增殖緩慢，第35天細(xì)胞增殖速度明顯升高，至68天三組細(xì)胞增殖速度減緩。三組曲線整體趨勢相同，略顯“S”形，無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。PI染色和電鏡掃描示細(xì)胞接種48H后大量細(xì)胞粘附于NHACS支架和CS支架孔壁之上。成骨誘導(dǎo)第1周RUNX表達(dá)明顯增高，并一直維持至誘導(dǎo)第4周，表明RUCMSCS具有較快的成骨能力，且成骨能力較強(qiáng)。④各組無硬脊膜壓迫，手術(shù)及相鄰節(jié)段椎體無滑脫、脊柱側(cè)彎、椎間盤突出等病變。RUCMSCSNHACS組、NHACS組、RUCMSCSCS組骨組織影子術(shù)后第2周即可見，而CS組則在第4周以后才形成骨組織影，隨著時間增長，各組骨組織影密度逐漸增加，即骨小梁數(shù)量和厚度逐漸增多，間隔逐漸變小，16周后各組（除空白對照組外）均形成了質(zhì)量不一、完整且光滑的椎板，形成的椎板弧度與硬脊膜背面相一致，但細(xì)胞支架組重建能力優(yōu)于單純支架組，含HA組優(yōu)于不含HA組。術(shù)后2周HE染色示，RUCMSCSNHACS組支架孔隙內(nèi)骨樣組織沉積多于RUCMSCSCS組，至術(shù)后16周RUCMSCSNHACS組和RUCMSCSCS組均形成大量編織狀骨。免疫組化示RUCMSCSNHACS組術(shù)后16周時BMP2、OCN陽性表達(dá)。結(jié)論①膠原酶消化法結(jié)合貼壁培養(yǎng)法是一種理想的分離RUCMSCS的方法。②從形態(tài)學(xué)、細(xì)胞表面標(biāo)志物、多向分化潛能等方面鑒定所獲得的細(xì)胞為RUCMSCS。③NHACS支架和CS支架與RUCMSCS之間均有良好的體外生物相容性，且兩種支架在細(xì)胞相容性方面無明顯差異。RUCMSC經(jīng)成骨誘導(dǎo)后成骨細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子RUNX2表達(dá)明顯升高，證明誘導(dǎo)后的RUCMSC具備成骨能力，并逐漸變?yōu)檩^成熟的成骨細(xì)胞。④各組（除空白對照組外）形成了質(zhì)量不一、與正常椎板弧度相似的人工椎板，但細(xì)胞支架組重建能力優(yōu)于單純支架組，含HA組優(yōu)于不含HA組，其中RUCMSCSNHACS組成骨能力最強(qiáng)，其次為RUCMSCSCS組，再者依次為NHACS組和CS組，這是由于成骨誘導(dǎo)后的RUCMSCS和羥基磷灰石具有誘導(dǎo)骨生成的作用。

簡介：南方醫(yī)科大學(xué)2011級碩士學(xué)位論文下頷骨體部缺損腓骨重建小鈦板固定的生物力學(xué)分析BIOMECHANICALANALYSISOFMANDIBULARBODYDEFECTRECONSTRUCTIONWITHFIBULAFIXEDWITHMINIPLATES課題來源廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目NO7421165457455南方醫(yī)院新技術(shù)、新項(xiàng)目NO201118學(xué)位申請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院劉雄殷學(xué)民口腔醫(yī)學(xué)專業(yè)型碩士研究生第一臨床醫(yī)學(xué)院2014年3月2O廣州摘要擬和精密分析。本研究通過CT數(shù)據(jù)精確重建下頜骨和腓骨三維模型，結(jié)合三維實(shí)體重建軟件重建臨床常用鈦板鈦釘模型，然后完成腓骨截取和內(nèi)固定系統(tǒng)的裝配，并通過咬合力加載分析重建術(shù)后模型的生物力學(xué)特征。本實(shí)驗(yàn)真實(shí)、精確地重現(xiàn)了下頜骨缺損腓骨重建內(nèi)固定的過程，模擬了口腔的應(yīng)力環(huán)境，完成了在體內(nèi)和體外都無法完成的力學(xué)評估。研究目的本實(shí)驗(yàn)基于下頜骨和腓骨的CT數(shù)據(jù)以及用游標(biāo)卡尺測量出的臨床上常用鈦板鈦釘?shù)膶?shí)際尺寸數(shù)據(jù)，利用有限元計(jì)算軟件MIMICS、ANSYS及逆向重建軟件GEOMAGIC、SOLIDWORKS建立接近實(shí)際情況的由小鈦板固定的下頜骨體部缺損腓骨重建的模型，為后續(xù)的生物力學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步對正常下頜骨及重建下頜骨有限元模型進(jìn)行咬合加載來模擬前牙及健側(cè)后牙的咬合，分析重建前后模型的整體應(yīng)力與位移情況，分析鈦板鈦釘應(yīng)力位移特點(diǎn)及腓骨前后端的矢量位移情況，為臨床上減少下頜骨體部缺損腓骨重建內(nèi)固定的術(shù)后并發(fā)癥提供生物力學(xué)參考。材料與方法第一部分下頜骨體部缺損腓骨重建小鈦板固定的三維有限元模型1、研究對象南方醫(yī)科大學(xué)1名健康成年女性志愿者，無牙列缺損，無顳下頜關(guān)節(jié)疾患，個別正常牙合，經(jīng)X線檢查排除下頜骨及腓骨疾患。知悉此次實(shí)驗(yàn)?zāi)康募跋嚓P(guān)風(fēng)險，接受后行CT掃描。2、掃描方式采用南方醫(yī)院影像科64排螺旋CT采集下頜骨及腓骨數(shù)據(jù)。掃描層厚LMM。采集對象取仰臥位于掃描儀臺上，利用十字光束定位，保持眶耳平面與地平面垂直，掃描基線與眶耳平面平行。掃描范圍下頜骨下緣至髁突平面，小腿從膝關(guān)節(jié)至踝關(guān)節(jié)，所得圖像以DICOM格式數(shù)據(jù)保存。3、下頜骨及腓骨三維實(shí)體模型建立利用DICOM格式的CT掃描數(shù)據(jù)輸入三維重建軟件MIMICSL001中，建立含有骨皮質(zhì)、骨松質(zhì)和牙的下頜骨STL格式三維模型，再輸入到逆向工程軟件GEOMAGICLL0軟件中，對其進(jìn)行一系列圖像精細(xì)化處理，生成三維圖形IGES文件格式。經(jīng)過相似的處理過程建立腓骨三II

簡介：點(diǎn)擊查看更多經(jīng)皮椎體成形后骨水泥分布與疼痛的關(guān)系.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文方德容中圖法分類號R71學(xué)校代碼10661學(xué)號2011384密級公開碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文（專業(yè)型學(xué)位）曼月樂治療子宮腺肌病及病灶閾值篩選的曼月樂治療子宮腺肌病及病灶閾值篩選的臨床研究臨床研究姓名名方德容方德容專業(yè)業(yè)婦科研究方向研究方向婦科腫瘤婦科腫瘤導(dǎo)師師肖雁冰肖雁冰培養(yǎng)單位培養(yǎng)單位遵義醫(yī)學(xué)院遵義醫(yī)學(xué)院2014年4月遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文方德容目錄1、論文曼月樂治療子宮腺肌病及病灶閾值篩選的臨床研究英漢縮略詞對照表1中文摘要2英文摘要3前言5材料與方法9結(jié)果12討論22結(jié)論25參考文獻(xiàn)262、綜述子宮腺肌病的治療及曼月樂臨床運(yùn)用研究進(jìn)展293、致謝404、作者簡介41

簡介：目的基于仿生觀念構(gòu)建的羥基磷灰石／I型膠原復(fù)合材料，和骨的結(jié)構(gòu)相似，具有組織相容性和骨傳導(dǎo)性，有學(xué)者報(bào)道有骨誘導(dǎo)作用，成為目前研究的熱點(diǎn)，但是目前對其骨誘導(dǎo)機(jī)理無系統(tǒng)的研究。HA／COLLAGENI仿生材料已成功地在長骨節(jié)段缺損中生成骨組織，但在脊柱的生物學(xué)和生物力學(xué)愈合環(huán)境中應(yīng)用，目前很少研究報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)檢測HA／COLLAGENI復(fù)合材料的組織相容性和肌內(nèi)植入后異位成骨的能力，對其誘導(dǎo)成骨的機(jī)理進(jìn)行探索。并觀察HA／COLLAGENI復(fù)合材料植入體內(nèi)后促進(jìn)脊柱融合情況，為進(jìn)一步臨床應(yīng)用研究提供理論依據(jù)。材料與方法在低溫條件下溫度為200℃采用水熱法形成的羥基磷灰石HA，為4060UM的小顆粒，孔徑約300UM，和I型膠原復(fù)合，組成HA／COLLAGENI復(fù)合材料，其中I型膠原占70％，羥基磷灰石占30％。制作成04083CM的塊狀。采用體內(nèi)試驗(yàn)的肌內(nèi)植入模型，在一般形態(tài)學(xué)評價的基礎(chǔ)上，利用酶組織化學(xué)法，觀察其組織相容性，觀察指標(biāo)有1大體觀察2組織形態(tài)學(xué)觀察石蠟切片，HE染色，光鏡觀察細(xì)胞和肌肉組織的形態(tài)學(xué)變化。3酶組織化學(xué)觀察冰凍切片，用于酶組織化學(xué)染色。選琥珀酸脫氫酶SDH、輔酶I脫氫酶NADH、乳酸脫氫酶LDH。將材料植入兔背部肌肉內(nèi)，觀察其異位成骨的能力，并檢測成骨過程中相關(guān)的細(xì)胞、細(xì)胞因子、和局部離子環(huán)境，探索其骨誘導(dǎo)機(jī)理，觀察指標(biāo)有1大體觀察2組織形態(tài)學(xué)觀察石蠟切片，行HE和MASSON染色，光鏡觀察材料及周圍組織的變化和成骨的情況。3誘導(dǎo)成骨因素的檢測方法A、間充質(zhì)干細(xì)胞的檢測石蠟切片，SH2單抗免疫組化染色，檢測MSC的特異性抗原。B、破骨細(xì)胞的檢測石蠟切片，23C6單抗免疫組化染色，檢測破骨細(xì)胞的特異性抗原。C、BMP2的檢測石蠟切片，BMP2單抗免疫組化染色，檢測相關(guān)細(xì)胞BMP2的表達(dá)。D、HA／COLLAGEN材料降解代謝過程材料與茜素紅和鈣黃綠素共染2H后植入，不同時間點(diǎn)取材、石蠟切片，在激光共聚焦顯微鏡下觀察染料的分布情況。采用新西蘭兔脊柱后外側(cè)融合模型，將HA／COLLAGENL材料復(fù)合自體骨髓植入兔L5、L6橫突間，進(jìn)行脊柱后外側(cè)融合，通過組織學(xué)、生物力學(xué)、影像學(xué)的檢測，觀察其促進(jìn)脊柱融合的能力。采用前瞻性隨機(jī)對照動物實(shí)驗(yàn)，45只成年新西蘭兔，雌雄不限分為5組，每組9只。A組9只單純HA／COLLAGENI材料。B組9只自體骨髓復(fù)合HA／COLLAGENI材料。C組9只自體髂骨移植。D組9只深低溫冷凍同種異體骨。E組9只空白對照組單純L5、L6橫突去皮質(zhì)化，不植入材料。術(shù)后4周、8周、12周分別取材作檢測。觀察指標(biāo)為1大體觀察2組織形態(tài)學(xué)觀察石蠟切片，行HE染色和MASSON染色，光鏡觀察材料及周圍組織的變化和成骨的情況。3X片、CT檢測判斷脊柱的融合率。4手觸動法判斷脊柱的融合率。5融合脊柱節(jié)段的生物力學(xué)檢測結(jié)果HA／COLLAGENI復(fù)合材料植入兔肌肉后，在手術(shù)創(chuàng)傷造成的組織損害消除后，材料周圍的炎癥細(xì)胞迅速消退，酶組織化學(xué)染色顯示酶活性過性下降，3到4周后酶活性恢復(fù)正常，材料具有良好的組織相容性。在HA／COLLAGENI復(fù)合材料肌肉內(nèi)植入的異位成骨實(shí)驗(yàn)中，手術(shù)后12周，HA／COLLAGENI復(fù)合材料的孔隙中有新生骨組織形成，材料逐漸降解。通過一般組織學(xué)方法、免疫組織學(xué)方法、和一些特殊染色方法結(jié)合，發(fā)現(xiàn)新骨形成前，長入材料內(nèi)部的問充質(zhì)組織中有一些細(xì)胞，SH2免疫組織化學(xué)染色陽性，證明是間充質(zhì)干細(xì)胞，并且隨著時間延長，向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化，表達(dá)BMP2。，材料內(nèi)出現(xiàn)多核、體積大的細(xì)胞，23C6免疫組織化學(xué)染色鑒定為破骨細(xì)胞，提示破骨細(xì)胞參與了材料的降解。材料復(fù)合自體骨髓作為骨移植替代材料，植入兔腰椎后外側(cè)橫突間進(jìn)行脊柱融合。手術(shù)后12周時，肉眼觀察可見骨髓復(fù)合HA／COLLAGENI材料組和單純復(fù)合材料組的人工骨材料已基本降解。骨髓復(fù)合HA／COLLAGENI復(fù)合材料組和自體骨組的動物橫突間均存在連接物，與橫突間交界處明顯融合為整體。組織學(xué)觀察示材料中央大量類骨樣物質(zhì)形成，被纖維血管組織包繞，破骨細(xì)胞長入類骨樣物質(zhì)內(nèi)部，促使其降解，成骨細(xì)胞及新生血管長入，逐漸形成新生骨組織。X線片、CT和手觸動法表明骨髓復(fù)合HA／COLLAGENI復(fù)合材料組與自體骨移植組促進(jìn)脊柱融合的作用相似。生物力學(xué)檢測結(jié)果示自體骨髓復(fù)合HA／COLLAGENI材料組和自體骨移植組融合強(qiáng)度相當(dāng)，其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005結(jié)論HA／COLLAGENI復(fù)合材料對活體組織沒有毒性，具有良好的組織相容性，符合生物材料應(yīng)用的基本要求。在非骨環(huán)境中肌內(nèi)植入后可以誘導(dǎo)產(chǎn)生新生的骨組織，也就是說HA／COLLAGENI復(fù)合材料具有骨誘導(dǎo)作用。從組織學(xué)、生物力學(xué)和影像學(xué)綜合分析，HA／COLLAGENI復(fù)合材料復(fù)合骨髓植入新西蘭兔腰椎后外側(cè)，能夠獲得好的脊柱融合效果，其脊柱融合效果與自體移植骨相似。

簡介：目的通過現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查及實(shí)驗(yàn)室檢測，分析職業(yè)性氟暴露人群血清中SOSTDKK1與BMP2BMP7表達(dá)水平，并構(gòu)建氟性骨損傷通徑模型，初步探討SOSTDKK1與BMP2BMP7在氟性骨損傷中的作用機(jī)制。方法選擇某大型鋁廠電解車間氟作業(yè)工人156例為研究對象，對照組為無氟暴露的工作人員51例。采用問卷量表調(diào)查研究對象的人口學(xué)特征、既往史及現(xiàn)患疾病情況，留取其晨尿和空腹血，并進(jìn)行前臂X線檢測。ELISA法測定研究對象血清中SOSTDKK1與BMP2BMP7含量。將氟性骨損傷作為因變量，血氟、BMP2BMP7及SOSTDKK1作為自變量，結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)知識，描繪通徑圖，通過SPSS軟件計(jì)算各變量之間的通徑系數(shù)。采用ROC曲線來評價BMP2BMP7及SOSTDKK1預(yù)測氟性骨損傷發(fā)生的曲線下面積（AUC）。結(jié)果三個電解車間作業(yè)工人尿氟水平均高于對照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P005）。三個電解車間作業(yè)工人血氟水平均高于對照組（P結(jié)論機(jī)體內(nèi)高氟負(fù)荷可以抑制血清中SOSTDKK1的表達(dá)，對BMP2BMP7的表達(dá)則表現(xiàn)為促進(jìn)作用。構(gòu)建的氟性損傷通徑模型從一定程度上解釋氟性損傷的發(fā)生過程，在高氟暴露下，高氟負(fù)荷可引起B(yǎng)MP2BMP7的表達(dá)升高，而BMP2BMP7的高表達(dá)又抑制了SOST和DKK1的表達(dá)。從而使SOSTDKK1的表達(dá)下調(diào)，對WNT信號通路的抑制作用減弱，引起成骨活躍，最終導(dǎo)致了氟性骨損傷的發(fā)生發(fā)展。血清BMP2、BMP7、SOST及DKK1的檢測在確定氟性骨損傷高危人群以及將其運(yùn)用于常規(guī)職業(yè)體檢篩查早期氟性骨損傷人群上均有較好應(yīng)用價值。

簡介：目的分析比較鈦籠填充自體顆粒骨植骨與自體髂骨塊植骨在一期后路病灶清除植骨融合內(nèi)固定治療胸腰椎結(jié)核的臨床療效。方法回顧性分析2012年6月至2014年9月在福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院脊柱外科行一期后路病灶清除植骨融合內(nèi)固定治療的51例胸腰椎結(jié)核患者，其中鈦籠植骨融合組（A組）25例，髂骨植骨融合組（B組）26例。觀察兩組的手術(shù)時間、出血量、手術(shù)前后脊髓神經(jīng)功能FRANKEL分級，炎癥指標(biāo)ESR，手術(shù)前后局部后凸畸形COBB角矯正情況、植骨融合時間等，并進(jìn)行分析比較。結(jié)果所有患者術(shù)后病理檢查均證實(shí)為結(jié)核病變，隨訪時間630月，隨訪期內(nèi)所有患者均達(dá)到骨性融合。A組術(shù)后1例患者出現(xiàn)病灶復(fù)發(fā)，B組無出現(xiàn)結(jié)核病灶復(fù)發(fā)，但有2例出現(xiàn)髂骨取骨區(qū)血腫、傷口愈合欠佳。術(shù)后無內(nèi)固定物斷裂、假關(guān)節(jié)形成等并發(fā)癥，植骨達(dá)骨性融合時間A組612個月，平均800±214個月，B組512個月，平均692±185個月，二者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞005）。在矯正后凸畸形角度上A組平均矯正950±876°，B組平均矯正684±794°，末次隨訪丟失角度A組平均168±396°，B組平均195±302°，在改善神經(jīng)功能、矯正后凸角度及末次隨訪矯正丟失角度上二者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞005）。A組平均手術(shù)時間20216±5320MIN，B組28227±6526MIN，A組平均住院時間3044±930天，B組為4435±1353天，A組顯著低于B組，兩組在手術(shù)時間、住院時間上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005），術(shù)中出血量A組平均為71240±41934ML，B組95192±79969ML，二者比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞005）。A組術(shù)前血沉平均6076±2019MMH術(shù)后1周血沉平均4528±1768MMH，術(shù)后3個月血沉平均2972±1697MMH，B組術(shù)前血沉平均5369±3169MMH術(shù)后1周血沉平均3700±2552MMH，術(shù)后3個月血沉平均2454±1732MMH，兩組在術(shù)前、術(shù)后1周、術(shù)后3月的時間點(diǎn)上ESR差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞005），術(shù)后1周、術(shù)后3個月ESR較術(shù)前有明顯改善，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005）。結(jié)論⑴胸腰椎結(jié)核行一期后路病灶清除后置入填充自體顆粒骨的鈦籠進(jìn)行植骨融合內(nèi)固定是安全可行的，其臨床療效對比髂骨植骨無明顯差異。⑵與髂骨植骨融合相比，一期后路病灶清除鈦籠植骨融合內(nèi)固定術(shù)可有效減少手術(shù)時間，縮短患者住院時間，同時可避免術(shù)后出現(xiàn)髂骨區(qū)疼痛、血腫等并發(fā)癥，而遠(yuǎn)期隨訪矯正角度的丟失及融合時間無顯著差別。⑶一期后路結(jié)核病灶清除應(yīng)用鈦籠植骨融合內(nèi)固定治療脊柱結(jié)核，術(shù)后可有效矯正胸腰椎結(jié)核后凸畸形且可獲得即刻的穩(wěn)定性，臨床療效明顯，長期療效有待進(jìn)一步觀察。