簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多病毒抗原蛋白的B細(xì)胞表位生物學(xué)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼10023學(xué)號(hào)S2010035005人冠狀病毒0C43分子流行病學(xué)與種系進(jìn)化動(dòng)力學(xué)特征研究所院姓名導(dǎo)師師業(yè)向病原生物學(xué)研究所張?jiān)酵踅パ芯繂T任麗麗副研究員病原生物學(xué)呼吸道病毒病原學(xué)完成日期2014年05月31日目錄摘要1ABSTRACT，3引言7第一章HCOVOC43分子流行特點(diǎn)的研究171材料與方法172結(jié)果203討論294小結(jié)32第二章HCOVOC43種系進(jìn)化特征的研究331方法332結(jié)果353討滄484小結(jié)51在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文一81致謝一82

簡(jiǎn)介：中南大學(xué)碩士學(xué)位論文EB病毒潛伏膜蛋白1轉(zhuǎn)化鼻咽上皮細(xì)胞的磷酸化蛋白質(zhì)組學(xué)研究姓名劉潔瓊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師賀智敏20080501碩士學(xué)位論文中文摘要PLNSX為對(duì)照分別導(dǎo)入PA317包裝細(xì)胞，G418篩選2周后擴(kuò)大培養(yǎng)，自細(xì)胞培養(yǎng)上清獲得后續(xù)實(shí)驗(yàn)所需的感染性逆病毒RVPLNSX、RVLMPLWR、RVLⅧ1TRADD與RVLMPL△232。51。然后，用濃縮的病毒分別感染人鼻咽上皮細(xì)胞NP69，匯合克隆培養(yǎng)，獲得NP69PLNSX、NP69LMP1WR、NP69L腳1吼∞D(zhuǎn)與NP69L腳1必2。514種轉(zhuǎn)化細(xì)胞系。觀察和檢測(cè)以上轉(zhuǎn)化細(xì)胞的形態(tài)、生長(zhǎng)曲線、平板克隆、細(xì)胞周期等。同時(shí)，采用固相PH梯度雙向凝膠電泳技術(shù)結(jié)合WESTEMBLOT方法分析NP69PLNSX、NP69LMPLWR、NP69L御1TRADD與NP69LMPL△232。351細(xì)胞系磷酸化蛋白質(zhì)表達(dá)的差異，即在感染24小時(shí)后抽提細(xì)胞總蛋白，2DE分別分離NP69PLNSX、NP69LMP1WR、NP69LⅧ1吼心D與NP69LMP1△232351細(xì)胞的總蛋白質(zhì)，每組平行進(jìn)行兩塊膠電泳，其中一塊作為制備膠，另一塊作為分析膠。制備膠考染顯色，得到了分辨率較高、重復(fù)性較好的NP69PLNSX、NP69LMP1WR、NP69LMP1T啪D與NP69LMPL△232。351細(xì)胞總蛋白質(zhì)2D膠電泳圖譜；分析膠中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜后，與抗酪氨酸磷酸化抗體孵育，進(jìn)行WESTEMBLOT分析，獲得差異表達(dá)酪氨酸磷酸化蛋白質(zhì)的反應(yīng)圖譜；將制備膠的電泳圖譜和WESTEMBLOT的反應(yīng)圖譜進(jìn)行比對(duì)分析，在制備膠上找到相應(yīng)的差異酪氨酸磷酸化蛋白質(zhì)點(diǎn)。利用MALDITOFMS對(duì)差異酪氨酸磷酸化蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定，部分差異蛋白質(zhì)應(yīng)用免疫沉淀方法進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果1NP69LMPLWT細(xì)胞在培養(yǎng)過程中，逐漸由多角形、II

簡(jiǎn)介：目的研制早期快速檢測(cè)抗腸道病毒71型（EV71）抗體的ELISA血清學(xué)診斷性試劑盒，評(píng)價(jià)其臨床應(yīng)用價(jià)值。方法將表達(dá)純化的EV71重組蛋白VP1作為包被抗原，建立EV71型手足口病間接ELISA法的血清學(xué)檢測(cè)方法。通過與逆轉(zhuǎn)錄（RT）PCR方法、EV71病毒分離試驗(yàn)和微量血清中和試驗(yàn)比較，評(píng)價(jià)抗EV71IGM和抗EV71IGG血清學(xué)診斷方法在EV71型手足口病的診斷價(jià)值，并進(jìn)行臨床考評(píng)。結(jié)果與RTPCR比較，抗EV71IGM敏感度、特異度、陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為83％，85，81和87；抗EV71IGG敏感度、特異度、陽性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為72，74，68和77。與EV71病毒分離方法比較，抗EV71IGM敏感度、特異度分別為85和97；抗EV71IGG敏感度、特異度分別為75和77。通過直線相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，抗EV71IGG抗體滴度和中和抗體滴度呈顯著正相關(guān)（R072，P結(jié)論利用VP1重組蛋白作為包被抗原，成功開發(fā)ELISA檢測(cè)人血清抗EV71IGM和抗EV71IGG抗體的診斷試劑盒。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多NF-κB RNA適體重組腺病毒的制備及其體外生物學(xué)活性研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：第一部分常見呼吸道病毒快速細(xì)胞培養(yǎng)與鑒定體系的建立背景病毒的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法有病毒分離培養(yǎng)、病毒核酸分子生物學(xué)檢測(cè)、病毒直接檢查、血清學(xué)試驗(yàn)檢測(cè)病毒特異性抗體等。在國(guó)外發(fā)達(dá)國(guó)家的臨床實(shí)驗(yàn)室，病毒檢測(cè)技術(shù)均比較成熟，但國(guó)內(nèi)病毒檢測(cè)技術(shù)普及程度低，全國(guó)的大型綜合醫(yī)院大多沒有常規(guī)進(jìn)行臨床呼吸道病毒檢測(cè)。少數(shù)開展病毒檢測(cè)的醫(yī)院，病毒檢測(cè)手段相對(duì)單一，較少應(yīng)用病毒診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”病毒分離，多數(shù)僅應(yīng)用一至兩種病毒學(xué)檢測(cè)方法，如免疫熒光（IF）檢測(cè)呼吸道分泌物中的病毒抗原、分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)病毒核酸或血清學(xué)試驗(yàn)檢測(cè)病毒特異性IGM抗體等。建立多種病毒診斷方法，包括病毒分離，對(duì)呼吸道病毒感染的監(jiān)測(cè)和診斷具有重要的臨床意義。目的改進(jìn)細(xì)胞分離培養(yǎng)技術(shù)，聯(lián)合直接IF檢測(cè)，建立常見呼吸道病毒快速細(xì)胞培養(yǎng)與鑒定體系，并驗(yàn)證該體系的檢測(cè)敏感性、檢測(cè)時(shí)間和檢測(cè)通量。方法采集廣東省中醫(yī)院急診科成人急性呼吸道感染（ARI）患者和深圳市兒童醫(yī)院兒童ARI患者的鼻咽拭子標(biāo)本，接種到狗腎細(xì)胞（MDCK）、恒河猴腎細(xì)胞（LLCMK2）、人鼻咽癌細(xì)胞（HEP2）三種細(xì)胞上，同時(shí)設(shè)置陰性對(duì)照。室溫3000RPM，離心60MIN后補(bǔ)加等體積的細(xì)胞維持培養(yǎng)液，置34℃、含5％CO2的飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每周觀察細(xì)胞病變（CPE）3～4次，于標(biāo)本接種后36～48H及第5～7天，各吸取50ΜLMDCK及LLCMK2培養(yǎng)上清做血凝試驗(yàn)（HAT）。CPE和或HAT陽性者，以病毒特異性單克隆熒光抗體甲型流感病毒FLUA、乙型流感病毒FLUB、呼吸道合胞病毒RSV、腺病毒ADV、副流感病毒1、2、3型PIV1、2、3做IF鑒定。所有標(biāo)本接種后7天，對(duì)陰性細(xì)胞再做IF篩查，陰性者判為陰性，陽性者根據(jù)陽性細(xì)胞類型選擇對(duì)應(yīng)的病毒特異性抗體做IF鑒定。將ATCC標(biāo)準(zhǔn)病毒株，分別接種到對(duì)應(yīng)宿主細(xì)胞上，3～7天后刮取細(xì)胞作涂片固定后低溫保存，在IF時(shí)作為陽性對(duì)照。結(jié)果①2009年1月至4月期間，共檢測(cè)拭子標(biāo)本641份，病毒陽性87份，陽性率136％。檢出病毒88株（1份標(biāo)本為FLUAB雙重感染），其中FLUA20株，F(xiàn)LUB39株，PIV12株，PIV21株，PIV315株，ADV8株，RSV2株。②每塊96孔板可接種11份標(biāo)本，每批接種4塊96孔板較為合適，即接種44份標(biāo)本。③標(biāo)本接種后，出現(xiàn)陽性結(jié)果的平均時(shí)間分別為FLU2D、ADV3D、PIV34D，RSV5D。結(jié)論本次實(shí)驗(yàn)建立了一個(gè)穩(wěn)定的呼吸道病毒快速細(xì)胞培養(yǎng)與鑒定體系，敏感性好，特異性佳，每批可檢測(cè)44份標(biāo)本，得到陽性結(jié)果的平均時(shí)間約為2～5天，可應(yīng)用于常見呼吸道病毒分離檢測(cè)。第二部分成人社區(qū)獲得性肺炎的病毒病原學(xué)及臨床特征分析背景社區(qū)獲得性肺炎CAP是威脅人類健康的最常見感染性疾病之一。在我國(guó)，肺炎在所有死因中排第五位。然而，目前對(duì)CAP的病原學(xué)仍知之不足，大約有17％48％的CAP患者病原學(xué)不明。20世紀(jì)以來的幾次全球流行性急性呼吸道病毒感染性疾病，如20世紀(jì)的4次流感大流行、1997年最先報(bào)道于香港的人感染高致病性禽流感、2003年的嚴(yán)重急性呼吸綜合征（SARS）等均嚴(yán)重威脅著人類的健康。2009年爆發(fā)的全球甲型H1N1流感大流行，截止至2010年3月7日，已導(dǎo)致全球死亡16713例，其中中國(guó)有796例，而未來的流行趨勢(shì)尚不明朗。我國(guó)華南地區(qū)因特殊的地理位置、海洋季風(fēng)氣候和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方式，被國(guó)際學(xué)術(shù)界普遍認(rèn)為是“世界流感中心”。2003年的SARS亦被認(rèn)為起源于廣東。而廣州市是我國(guó)華南地區(qū)的中心大城市，與國(guó)際及內(nèi)地其他城市接觸交流頻繁。近年來流行病學(xué)調(diào)查顯示病毒性肺炎的發(fā)病率高達(dá)56％，病毒已被公認(rèn)為是CAP的重要病原學(xué)之一，但是CAP診治指南并沒有提供詳細(xì)的有關(guān)病毒性肺炎的評(píng)估和治療建議。國(guó)內(nèi)目前尚缺乏成人病毒性CAP病原及臨床特征的詳細(xì)資料。目的檢測(cè)成人CAP的病毒病原學(xué)，分析臨床特征。方法收集2009年4月至2009年12月期間，就診于廣州醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院的CAP患者的鼻咽拭子、急性期與恢復(fù)期（24周后）血清，記錄病史資料。應(yīng)用常見呼吸道病毒快速細(xì)胞培養(yǎng)與鑒定體系、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RTPCR）法檢測(cè)鼻咽拭子標(biāo)本，應(yīng)用血凝抑制試驗(yàn)（HI）、間接IF試驗(yàn)檢測(cè)急性期與恢復(fù)期血清中呼吸道病毒特異性IGG抗體滴度（4倍或以上升高為陽性）。呼吸道病毒快速細(xì)胞培養(yǎng)與鑒定、RTPCR或血清學(xué)試驗(yàn)任一項(xiàng)陽性則判斷為病毒感染。結(jié)果①最終入選CAP病例149例，男性84例，女性65例，年齡中位數(shù)M（四分衛(wèi)間距IQR）為6035～77歲，鼻咽拭子149份，70例有雙份血清。89例患者伴有慢性阻塞性肺疾病等慢性基礎(chǔ)疾病。②病毒檢測(cè)陽性48例，陽性率322％。不同年齡段人群，陽性率不同，以16～19歲的青少年（545％）及79歲以上的老年人（573％）最高，各年齡組的陽性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0023）。單一病毒感染44例（FLUA24例，F(xiàn)LUB5例，ADV及PIV1各2例，PIV311例），雙重病毒感染4例。其中有1例FLUA和1例FLUAADV感染患者痰培養(yǎng)檢出大腸埃希菌，1例PIV3感染患者痰培養(yǎng)檢出副流感嗜血桿菌。52株病毒中，快速細(xì)胞培養(yǎng)與鑒定體系檢出18株病毒，RTPCR檢出41株病毒，血清學(xué)試驗(yàn)檢出21株病毒。有雙份血清的70例患者中，與“金標(biāo)準(zhǔn)”病毒培養(yǎng)比較，RTPCR法的檢測(cè)敏感性較高（P0003），特異性為807％，血清學(xué)試驗(yàn)的檢測(cè)敏感性類似（P0118），特異性為754％，③48例病毒性肺炎患者，年齡M（IQR）為58（30～79）歲，男性27例，26例伴有基礎(chǔ)疾病。188％的病毒性肺炎患者發(fā)病前有發(fā)熱患者接觸史，與病毒檢測(cè)陰性的肺炎患者（99％）相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P013）。④病毒性肺炎病例中，高熱≥39℃（667％）、乏力（646％）、咳膿痰（521％）、咽痛（458％）、呼吸困難（417％）、鼻部癥狀（417％）為最常見的癥狀。FLUA及PIV3感染患者可伴有咯血、胸悶胸痛。FLU及PIV3感染患者呼吸困難及消化道癥狀亦多見。⑤48例病毒性肺炎患者，兩個(gè)或以上肺葉病變的比例達(dá)563％，有6例（125％）出現(xiàn)胸腔積液，與病毒檢測(cè)陰性肺炎患者相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P0384和0371）。⑥病毒性肺炎患者中，CURB65評(píng)分為中高危及有并發(fā)癥的比例（208％、667％），均有高于病毒檢測(cè)陰性患者的趨勢(shì)（139％、495％），但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P0177和0063）。542％的病毒性肺炎患者需要吸氧，375％出現(xiàn)電解質(zhì)紊亂，明顯高于病毒檢測(cè)陰性組（P0008和0002）。病毒性肺炎患者中，有基礎(chǔ)疾病者的呼吸衰竭及腎功能損害等的發(fā)生率高于無基礎(chǔ)疾病者。結(jié)論1病毒是CAP的常見病原體之一，在本檢測(cè)范圍內(nèi)，最常見的病毒病原體是FLUA和PIV3。2不同病毒診斷方法的敏感性及適用范圍不同。3根據(jù)臨床特征不能區(qū)分病毒性肺炎和非病毒性肺炎，不能鑒別各種病毒性肺炎。4病毒性肺炎患者有細(xì)菌合并感染的可能。5有必要對(duì)需要住院的社區(qū)獲得性肺炎病例進(jìn)行病毒檢測(cè)，尤其重癥患者。

簡(jiǎn)介：復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文利用生物信息學(xué)研究細(xì)菌水平基因轉(zhuǎn)移及桿狀病毒載體的改進(jìn)姓名單梁申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)微生物學(xué)指導(dǎo)教師任雙喜趙國(guó)屏20070527復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文第一章利用生物信息學(xué)研究細(xì)菌水平基因轉(zhuǎn)移摘要水平基因轉(zhuǎn)移，即不同物種問遺傳物質(zhì)的交換，是微生物進(jìn)化和微生物多樣性的一個(gè)重要因素。細(xì)菌水平基因轉(zhuǎn)移的主要途徑包括轉(zhuǎn)化、接合和轉(zhuǎn)導(dǎo)。水平基因轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象普遍存在于微生物界，但依靠常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法并不容易找到它們?cè)诨蚪M上的位置和長(zhǎng)度。在近十年中，大量微生物基因組測(cè)序工作的完成為水平基因轉(zhuǎn)移的研究提供了很好的生物信息學(xué)平臺(tái)，利用微生物基因組的序列分析研究水平基因轉(zhuǎn)移成為一個(gè)有力的手段。常見的研究方法將堿基組成和密碼子偏好性定義為細(xì)菌的基因組標(biāo)簽。微生物基因組中堿基組成和密碼子偏好性，即基因組標(biāo)簽因物種而異，因此，供體物種水平轉(zhuǎn)移而來的基因和受體物種的基因組標(biāo)簽差異顯著。本研究基于該原理，采用生物信息學(xué)的手段，運(yùn)用一種新的方法，計(jì)算和比較細(xì)菌基因組和基因組上DNA片段之間四堿基的出現(xiàn)頻率，并計(jì)算兩者之間距離，分析和確定細(xì)菌水平基因轉(zhuǎn)移區(qū)域。關(guān)鍵詞細(xì)菌基因組水平基因轉(zhuǎn)移寡核苷酸2

簡(jiǎn)介：研究目的1研究江門兒童、成人病毒性腹瀉患者中星狀病毒HASTV的感染狀況及流行病學(xué)特征。2研究江門兒童、成人病毒性腹瀉中HASTV的基因型別，探討流行優(yōu)勢(shì)病毒株。3探討江門兒童和成人HASTV感染腹瀉的臨床特征及主要危險(xiǎn)因素。方法1兒童腹瀉患者選擇江門市婦幼保健醫(yī)院兒科門診部，全年收集5歲以下腹瀉患兒發(fā)病三日內(nèi)經(jīng)臨床診斷為病毒性腹瀉的糞便標(biāo)本，每個(gè)月的前15天為標(biāo)本收集日，收集時(shí)間為2005年9月～2006年8月。標(biāo)本采集當(dāng)日檢測(cè)輪狀病毒RV后電話通知檢測(cè)結(jié)果，并調(diào)查有關(guān)問題。成人腹瀉患者選擇江門市人民醫(yī)院急診科和腹瀉門診部，于病毒性腹瀉流行期2006年9月～2007年1月連續(xù)收集成人急性散發(fā)腹瀉糞便標(biāo)本。2經(jīng)膠體金法、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)RTPCR法分別檢測(cè)RV和諾如病毒NV后，運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光PCRREALTIMEPCR進(jìn)行HASTV檢測(cè)，并對(duì)陽性標(biāo)本進(jìn)行RTNESTEDPCR測(cè)序證實(shí)，同時(shí)結(jié)合GENEBANK中相應(yīng)的參考株核苷酸序列進(jìn)行進(jìn)化比對(duì)工作，鑒定型別，判斷HASTV的流行優(yōu)勢(shì)株。3HASTV感染腹瀉臨床特征的探討采用與RV感染腹瀉進(jìn)行頻數(shù)匹配的兩樣本比較研究；HASTV危險(xiǎn)因素的研究采用11配對(duì)的病例對(duì)照研究。數(shù)據(jù)管理采用EPIDATA21A進(jìn)行雙份錄入，SPSS130進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，定性資料采用X2檢驗(yàn)，定量資料采用T檢驗(yàn)，偏態(tài)資料采用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)，HASTV感染腹瀉發(fā)病的危險(xiǎn)因素采用進(jìn)行因素二分類LOGISTIC回歸分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)Α取005。結(jié)果1江門腹瀉患兒中2005年9月～2006年8月HASTY全年總檢出率為85％40／470，檢出高峰期為9、11、12月，單獨(dú)感染率為275％11／40，混合感染率為725％29／40，其中675％并RV，5％并NV。5歲以下的嬰幼兒病毒性腹瀉患者中，HASTV感染無年齡、性別上的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；按系統(tǒng)間隔1份法抽樣選取其中的18份HASTV毒株進(jìn)行了測(cè)序分析，顯示18株全部屬于HASTV1型；核苷酸序列同源性比對(duì)顯示與選取的參比毒株的同源性為92～98％，內(nèi)部同源性為92～100％。22006年病毒性腹瀉流行期9H～次年1月采集的散發(fā)成人腹瀉標(biāo)本中檢出3株HASTV，檢出率為54％3／56，經(jīng)RTNESTEDPCR檢測(cè)和序列分析鑒定為HATSV4型。3本組兒童HASTV感染腹瀉患者中主要臨床癥狀為腹瀉850％，發(fā)熱550％，嘔吐375％，HASTY主要臨床癥狀與RV感染腹瀉比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。結(jié)論1HASTY是江門地區(qū)5歲以下嬰幼兒病毒性腹瀉的重要病原體之一，但無年齡、性別上統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；流行季節(jié)與RV相似從9月到次年1月，尤以9、11、12月為流行季節(jié)的高峰期，與國(guó)內(nèi)外其他地區(qū)已有研究資料報(bào)道基本一致合并其他致腹瀉病毒感染的比例遠(yuǎn)高于單獨(dú)感染比例，主要是合并RV感染HASTV1型為江門地區(qū)嬰幼兒病毒性HASTV感染的流行優(yōu)勢(shì)毒株，內(nèi)部核苷酸變異不大。2本組兒童HASTV感染腹瀉患者中主要臨床癥狀為腹瀉、發(fā)熱、嘔吐，與RV感染腹瀉相似。3現(xiàn)有資料表明江門成人散發(fā)病毒性腹瀉者中存在HASTV感染，病毒型別為HASTV4，未發(fā)現(xiàn)多致瀉病毒混合感染；臨床癥狀輕于兒童。4HASTV感染腹瀉的危險(xiǎn)因素是吃生冷食品，而嬰幼兒用母乳輔食或其他進(jìn)食方式則可能是保護(hù)因素。

簡(jiǎn)介：背景和目的人類杯狀病毒HUMANCALICIVIRUSES，HUCVS包括諾如病毒NOVIRUS，NV和札如病毒SAPOVIRUS，SAV，是引起全世界人類非細(xì)菌性急性胃腸炎暴發(fā)的主要病原，也是僅次于輪狀病毒引起嬰幼兒急性腹瀉散發(fā)的常見病原之一。諾如病毒又稱諾瓦克樣病毒NWALKLIKEVIRUS，最初由KAPIKIAN等在1972年通過免疫電鏡的方法從美國(guó)俄亥俄州諾瓦克鎮(zhèn)一起非細(xì)菌性胃腸炎暴發(fā)的患者糞便中分離得到；札如病毒SAPOVIRUS，SAV以前稱札幌樣病毒SAPPOLIKEVIRUS，因最初于1977年在日本札幌市被發(fā)現(xiàn)而命名，是人和豬非細(xì)菌性急性胃腸炎的主要病原體之一。長(zhǎng)期以來，由于對(duì)杯狀病毒缺乏簡(jiǎn)易、敏感的檢測(cè)手段，使其導(dǎo)致人類患病的危害被嚴(yán)重低估。近年來，隨著對(duì)杯狀病毒分子流行病學(xué)研究的深入，其重要性和危害性正逐漸被全面、系統(tǒng)的認(rèn)識(shí)。2005年1月，加拿大和美國(guó)相繼宣布暴發(fā)NV感染，引起了人們的廣泛關(guān)注。2006年11月，日本、新加坡、意大利等地相繼發(fā)生了NV集體感染事件，特別是日本暴發(fā)了25年來最嚴(yán)重的傳染性胃腸炎疫情，不到兩個(gè)月累計(jì)發(fā)生3576萬人感染NV，引起了全球的廣泛關(guān)注。同期我國(guó)包括北京、廣東佛山、福建等省市均出現(xiàn)NV疫情，據(jù)全國(guó)病毒性腹瀉監(jiān)測(cè)網(wǎng)對(duì)11個(gè)省份5歲以下腹瀉兒童的監(jiān)測(cè)，NV檢出率為15％左右。由于該病毒傳染性很強(qiáng)，常可導(dǎo)致突發(fā)性公共衛(wèi)生事件，美國(guó)已將其列為乙類生物恐怖因子。美國(guó)疾病控制中心CDC最新估計(jì)，96％的非細(xì)菌胃腸炎暴發(fā)與NV有關(guān)，而SAV則是嬰兒和小齡兒童病毒性腹瀉的主要病原體。我國(guó)對(duì)諾如病毒的研究起步較晚，1995年方肇寅等首次在我國(guó)嬰幼兒腹瀉糞便標(biāo)本中檢測(cè)到諾如病毒。此后，北京、長(zhǎng)春、河北、蘭州、廣州、福州等地均在兒童腹瀉糞便標(biāo)本中檢出NV。最近方肇寅等人在對(duì)1999年至2005年來自我國(guó)13個(gè)地區(qū)的嬰幼兒腹瀉糞便HUCVS研究中其陽性率為83％～386％，主要以NV為主，檢出率僅次于RV，表明我國(guó)AGE病例中NV感染也相當(dāng)普遍。札如病毒在世界各地都有報(bào)道，2005年2月，日本某幼兒園中23人包括6名成人感染SAV病毒。我國(guó)上海交大華修國(guó)等于2008年在國(guó)內(nèi)不明原因腹瀉人群與腹瀉仔豬體內(nèi)分離到一種新的杯狀病毒，經(jīng)過鑒定和動(dòng)物回歸實(shí)驗(yàn)證明該病毒為SAV。目前，國(guó)際上SAV的總體研究水平還處于起步階段。雖然杯狀病毒感染在我國(guó)普遍存在，但是浙江地區(qū)杯狀病毒感染的分子流行特征尚缺乏系統(tǒng)研究，因此，研究杯狀病毒在浙江地區(qū)的分子流行病學(xué)規(guī)律、流行毒株特征及進(jìn)化情況，可以為本地區(qū)杯狀病毒引起的急性腹瀉的防治提供科學(xué)依據(jù)，對(duì)我國(guó)急性腹瀉的預(yù)防控制工作也具有重要意義。對(duì)象和方法1研究對(duì)象2009年1月至2011年1月來自浙江地區(qū)5個(gè)哨點(diǎn)醫(yī)院腸道門診包括杭州、寧波、紹興、湖州、衢州就診的急性腹瀉患者3153例，包括5歲以下嬰幼兒和成人。每日腹瀉次數(shù)超過3次或大便性狀出現(xiàn)明顯異常水瀉樣、蛋花湯樣、粘液樣或粘糊樣定義為腹瀉病例。2實(shí)驗(yàn)方法20092011年監(jiān)測(cè)期間連續(xù)收集以上3153例急性腹瀉患者的糞便標(biāo)本，并同時(shí)進(jìn)行調(diào)查，填寫調(diào)查表，電話隨訪完善調(diào)查表。對(duì)收集的標(biāo)本采用多重PCR方法進(jìn)行輪狀病毒RV、杯狀病毒NV和SAV等病毒檢測(cè)，并選取部分?jǐn)U增后的杯狀病毒陽性產(chǎn)物進(jìn)行序列測(cè)定，應(yīng)用DNAMAN5100和MEGA40軟件對(duì)杯狀病毒和相關(guān)參考株進(jìn)行序列的多重比對(duì)和系統(tǒng)進(jìn)化分析。結(jié)果12009年1月至2011年1月，本研究共檢測(cè)浙江地區(qū)3153份急性腹瀉標(biāo)本，杯狀病毒檢出率較高，為1842％，僅次于輪狀病毒的檢出率2010％。2諾如病毒共檢出265份1236％，2652144；52份為NVGⅠ基因型，213份為NVGⅡ基因型；札如病毒檢出率為606％1302144。3隨機(jī)抽取15株諾如病毒和10株SAV進(jìn)行測(cè)序分析，NV基因型別包括GⅠ13株、GⅠ21株、GⅡ42006B變異株7株、GⅡ21株、GⅡ71株和GⅡ42008變異株2株；SAV基因型別包括GⅠ25株、GⅠ14株和GⅡ11株。結(jié)論1杯狀病毒是浙江地區(qū)引起急性腹瀉的一個(gè)重要病原，僅次于輪狀病毒的檢出率，且諾如病毒檢出率高于札如病毒。該病毒主要感染五歲以下嬰幼兒，冬春季節(jié)為感染高發(fā)季節(jié)。2浙江地區(qū)急性腹瀉患者杯狀病毒感染呈現(xiàn)遺傳多樣性特征，諾如病毒在浙江地區(qū)包括GⅠ1、GⅠ2、GⅡ2、GⅡ7、GⅡ4五個(gè)基因型，GⅡ42006B可能是本地區(qū)的流行優(yōu)勢(shì)株；札如病毒包括GⅠ2、GⅠ1和GⅡ1三個(gè)基因型，GⅠ2基因型是流行優(yōu)勢(shì)株。

簡(jiǎn)介：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我校或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名叢垂盤魚日期型￡中國(guó)醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解中國(guó)醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬中國(guó)醫(yī)科大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名指導(dǎo)教師簽名中文論著摘要酵母雙雜交篩選與人巨細(xì)胞病毒ULL28兩種不同結(jié)構(gòu)相互作用蛋白目的人巨細(xì)胞病毒HUMANCYTOMEGALOVIRUS，HCMV是一種普遍存在的皰疹病毒，在人群中感染率為50％80％。正常人感染HCMV后表現(xiàn)為無癥狀的隱性或潛伏感染。而一旦人體的免疫機(jī)能發(fā)生重大變化時(shí)如妊娠、腫瘤、HIV感染、器官移植和新生兒等，HCMV即從潛伏感染活化為繼發(fā)性的增殖感染，引起嚴(yán)重的臨床癥狀甚至致死。同時(shí)HCMV感染還可引起間質(zhì)性肺炎、肝炎、腦炎、視網(wǎng)膜、腎、神經(jīng)系統(tǒng)、腸胃系統(tǒng)的疾病。隨著免疫低下人群患者的增多，HCIVIV感染及其引發(fā)的嚴(yán)重疾病致盲、致死日益受到關(guān)注。HCMV廣泛的致病性是由其病毒感染多種類型細(xì)胞的能力決定的。在免疫功能低下人群中HCMV感染的首要目標(biāo)為內(nèi)皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞。研究證明HCMVULL31A128編碼蛋白是病毒在內(nèi)皮細(xì)胞中的復(fù)制及白細(xì)胞的播散過程中的重要決定因子。而我們?cè)谘芯恐邪l(fā)現(xiàn)ULL28ORFOPENINGREADINGFLAME具有兩個(gè)大小不同的片段，分別為519BP和642BP，我們將其命名為HCMVULL28519BP和HCMVULL28642BP，為了觀察兩個(gè)ORF片段所編碼蛋白的功能是否相同及其是否在HCMVULL31A128編碼蛋白感染內(nèi)皮及上皮細(xì)胞過程中發(fā)揮著各自不同的作用，故而利用酵母雙雜交系統(tǒng)從人胎腦CDNA文庫中篩選與HCMVULL28519BP和HCMVULL28642BP編碼蛋白相互作用的蛋白，這將為研究HCMVULL28基因在內(nèi)皮細(xì)胞感染嗜性中所發(fā)揮的作用及揭示HCMV先天感染致病機(jī)理、解決人巨細(xì)胞病毒先天感染的防治、減少先天畸形兒出生等醫(yī)學(xué)問題奠定基礎(chǔ)。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多蚊蟲抗菌肽defensin的分子生物學(xué)研究及其與登革Ⅱ型病毒感染關(guān)系的探討.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的運(yùn)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法尋找慢性乙肝中醫(yī)肝腎陰虛證、脾腎陽虛證患者外周血漿中差異表達(dá)的蛋白質(zhì)分析其與慢性乙肝中醫(yī)虛證證侯的對(duì)應(yīng)關(guān)系初步探索出慢性乙肝中醫(yī)虛證的蛋白質(zhì)組學(xué)規(guī)律為中醫(yī)臨床辨識(shí)慢性乙肝虛證提供可供參考的客觀化指標(biāo)最終為進(jìn)一步探討慢性乙肝中醫(yī)虛證的分子基礎(chǔ)提供線索。方法通過雙向凝膠電泳獲得正常對(duì)照組、肝腎陰虛證組、脾腎陽虛證組的血漿蛋白質(zhì)TWODIMENSIONALELECTROPHESIS2DE圖譜經(jīng)質(zhì)譜分析鑒定出差異表達(dá)的蛋白質(zhì)。具體方法依據(jù)病毒性肝炎中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)在瀘州醫(yī)學(xué)院附屬中醫(yī)醫(yī)院2008年5月～2009年8月期間的住院和門診慢性乙肝患者中收集典型的肝腎陰虛證、脾腎陽虛證及健康正常人各三例作為研究對(duì)象對(duì)其血漿蛋白進(jìn)行雙向凝膠電泳。第一向采用PH47的固相PH梯度膠條IMMOBILIZEDPHGRADIENTSIPG等電聚焦ISOELECTROFOCUSINGIEF第二向采用濃度為12％的十二烷基磺酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳SODIUMDODECYLSULPHATEPOLYACRYLAEGELELECTROPHESISSDSPAGE。硝酸銀染色后并經(jīng)凝膠圖像采集系統(tǒng)獲得血漿蛋白質(zhì)2DE圖譜采用IMAGEMASTER2DPLATINUMV50軟件對(duì)組內(nèi)及組間的圖譜對(duì)比分析依據(jù)IPG膠條的固相PH梯度中等電點(diǎn)PI線性梯度和標(biāo)準(zhǔn)分子量MARKER確定各蛋白點(diǎn)的相對(duì)分子量DA、相對(duì)等電點(diǎn)PI將實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的雙向電泳結(jié)果出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化總灰度值％VOL相差達(dá)2倍以上的蛋白點(diǎn)視為差異表達(dá)蛋白質(zhì)切取相應(yīng)的差異表達(dá)蛋白點(diǎn)作質(zhì)譜分析搜索SWISSPROT數(shù)據(jù)庫鑒定出各差異表達(dá)的蛋白質(zhì)初步建立起差異表達(dá)的蛋白質(zhì)與慢性乙肝虛證的對(duì)應(yīng)關(guān)系。結(jié)果1各組血漿蛋白2DE圖譜中大多數(shù)蛋白點(diǎn)分布在P14565分子量2590KD的范圍內(nèi)。經(jīng)IMAGEMASTER2DPLATINUMV50軟件分析各組均可獲得重復(fù)性穩(wěn)定的蛋白點(diǎn)約450±100個(gè)。2慢性乙肝中肝腎陰虛證組的2DE圖譜與正常組對(duì)比表現(xiàn)為蛋白點(diǎn)4、7表達(dá)量明顯升高蛋白點(diǎn)3、8、9表達(dá)量明顯下降。經(jīng)質(zhì)譜分析鑒定并結(jié)合SWISSPROT蛋白數(shù)據(jù)庫得出蛋白點(diǎn)4為C反應(yīng)蛋白CREACTIVEPROTEINCRP、蛋白點(diǎn)7為甲狀腺素結(jié)合蛋白THYROXINEBINDINGPROTEINTTR、蛋白點(diǎn)3為載脂蛋白A2APOA2、蛋白點(diǎn)8、9為同一蛋白結(jié)合珠蛋白HAPTOGLOBINHP。3慢性乙肝中脾腎陽虛證組的2DE圖譜與正常組對(duì)比表現(xiàn)為蛋白點(diǎn)1、2、3、7、8、9表達(dá)量明顯下降蛋白點(diǎn)5、6表達(dá)量明顯升高。經(jīng)質(zhì)譜分析鑒定并結(jié)合SWISSPROT蛋白數(shù)據(jù)庫得出蛋白點(diǎn)1為載脂蛋白C2APOC2、蛋白點(diǎn)2為血清淀粉蛋白PSERUMAMYLOIDSAP、蛋白點(diǎn)3為APOA2、蛋白點(diǎn)7為甲狀腺素結(jié)合蛋白TTR、蛋白點(diǎn)8、9為同一蛋白結(jié)合珠蛋白HP、蛋白點(diǎn)5、6為同一蛋白血漿視黃醇結(jié)合蛋白PLASMARETINOLBINDINGPROTEINRBP。4歸納總結(jié)慢性乙肝中醫(yī)二虛證與正常對(duì)照組2DE圖譜發(fā)現(xiàn)慢性乙肝中醫(yī)二虛證與正常人相比存在明顯的規(guī)律性差異表現(xiàn)為蛋白點(diǎn)3、8、9分別為APOA2、HP表達(dá)量均明顯下降。結(jié)論1成功建立起慢性乙肝肝腎陰虛證組、脾腎陽虛證及正常對(duì)照組血漿蛋白質(zhì)組2DE圖譜。2慢性乙肝中肝腎陰虛證組除了APOA2、HP明顯下降外還表現(xiàn)CRP、TTR表達(dá)量明顯升高而在正常人和脾腎陽虛證組中均未體現(xiàn)推測(cè)CRP、TTR表達(dá)量的升高參與了慢性乙肝中肝腎陰虛證侯的形成機(jī)制。進(jìn)一步深入研究可望為臨床該證型的診斷提供客觀化分子指標(biāo)。3慢性乙肝中脾腎陽虛證組除了APOA2、HP表達(dá)量明顯下降外還表現(xiàn)為APOC2、SAP、TTR表達(dá)量明顯下降RBP表達(dá)量明顯升高推測(cè)這些蛋白質(zhì)表達(dá)量的變化可能與慢性乙肝中脾腎陽虛證的病理機(jī)制相關(guān)。臨床通過對(duì)慢性乙肝患者血漿蛋白質(zhì)組的篩查可能為臨床該證型的診斷找到客觀化分子診斷指標(biāo)。4歸納總結(jié)慢性乙肝中醫(yī)二虛證與正常對(duì)照組之間2DE圖譜相比存在明顯的規(guī)律性差異表現(xiàn)為APOA2、HP表達(dá)量均明顯下降提示慢性乙肝中醫(yī)二虛證具有相同的蛋白質(zhì)變化規(guī)律推測(cè)這些相同的蛋白質(zhì)變化可能與慢性乙肝各中醫(yī)虛型證型的形成機(jī)制有關(guān)。通過進(jìn)一步深入研究可望為臨床慢性乙肝虛證的診斷提供客觀的分子指標(biāo)。

簡(jiǎn)介：目的比較慢性乙型病毒性肝炎（CHB）肝纖維化患者聲輻射力脈沖成像技術(shù)（ARFI）、瞬時(shí)超聲彈性成像（FIBROSCAN）及血清學(xué)診斷模型（FNS指數(shù)、FIB4、APRI）與肝臟肝纖維化病理分級(jí)的關(guān)系，初步探討無創(chuàng)診斷模型對(duì)CHB肝纖維化的診斷價(jià)值。方法161例確診為CHB患者，根據(jù)肝活檢病理分期結(jié)果分組無明顯肝纖維化組（S0、S1），明顯肝纖維化組（≥S2）、進(jìn)展期肝纖維化組（≥S3），早期肝硬化組（S4）。每例患者在肝活檢的同期進(jìn)行肝臟瞬時(shí)超聲彈性成像（FIBROSCAN）、脈沖聲輻射力成像（ARFI）檢查并且常規(guī)測(cè)量脾臟的厚度及門靜脈主干的內(nèi)徑大小，留取血液標(biāo)本采用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行血清總膽紅素（TB）、直接膽紅素（DB）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLO）、總膽固醇（CHOL）檢測(cè)，采用化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行肝纖四項(xiàng)（透明質(zhì)酸、III型前膠原、IV前膠原、層粘蛋白）測(cè)定，并根據(jù)血清學(xué)結(jié)果計(jì)算FNS指數(shù)、FIB4、APRI。比較無創(chuàng)診斷方法（ARFI、FIBROSCAN、FNS指數(shù)、FIB4、APRI）與肝臟病理的相關(guān)性，并根據(jù)受試者工作特征曲線分析無創(chuàng)診斷模型對(duì)肝纖維化的診斷價(jià)值。結(jié)果1、肝活檢標(biāo)本平均長(zhǎng)度為160MM，肝纖維化病理分期S0，N1610％；S1，N36（224）；S2，N23（142）；S3，N36（224）；S4，N50（31）。2、門靜脈主干（PV）內(nèi)徑，在明顯肝纖維化組、進(jìn)展期肝纖維化組、早期肝硬化組明顯大于無明顯肝纖維化組（P3、ARFI、FIBROSCAN、FNS指數(shù)、FIB4、APRI與肝活檢病理分期均顯示了良好的相關(guān)性（P4、顯著性肝纖維化組中，F(xiàn)IBROSCANAUC0922與ARFIAUC0916、FNS指數(shù)AUC0868，三者的診斷性能最好，兩兩之間無顯著差別P005，其次依次為FIB4（AUC0814）、APRI（AUC0757）。5、進(jìn)展期肝纖維化組中，F(xiàn)IBROSCANAUC0980與ARFIAUC0942的診斷性能最好，二者無顯著差別（P005），其次為FNS指數(shù)AUC0856與FIB4AUC0828，再次為APRIAUC0772。6、早期肝硬化組中，F(xiàn)IBROSCANAUC0947與ARFIAUC0974的診斷性能最好，二者差別不大（P005），均優(yōu)于FNS指數(shù)AUC0828、FIB4AUC0813、APRIAUC0802；FNS指數(shù)與FIB4、APRI的診斷性能差別不明顯（P005）。結(jié)論1、無創(chuàng)診斷影像學(xué)方法ARFI及FIBROSCAN對(duì)CHB各期肝纖維化分級(jí)具有較高的診斷價(jià)值，優(yōu)于血清學(xué)無創(chuàng)診斷模型。2、FNS指數(shù)、FIB4、APRI三種評(píng)估CHB肝纖維化的血清學(xué)無創(chuàng)診斷模型中，F(xiàn)NS指數(shù)的整體診斷價(jià)值最高。

簡(jiǎn)介：本文主要探討瀘州地區(qū)嬰幼兒社區(qū)獲得性病毒性肺炎的病原學(xué)、各病毒性肺炎的臨床特征、發(fā)病年齡與病毒分布關(guān)系、檢出月份與病毒分布關(guān)系、X線特點(diǎn)以及免疫功能變化，包括免疫球蛋白IGG、IGA、IGM，T淋巴細(xì)胞亞群CD3、CD4、CD8及CD4CD8等。經(jīng)實(shí)驗(yàn)得出1病毒感染是瀘州地區(qū)嬰幼兒肺炎的主要病原，以單一病毒感染為主，依次為RSV、IFV、ADV、PIV、CMV；混和病毒感染依次為IFVPIV、IFVRSV、ADVPIV、ADVIFV、PIVRSV。病毒病原譜不同于其他地區(qū)，表現(xiàn)出地區(qū)差異性。2病毒性肺炎各有其臨床特點(diǎn)①RSV肺炎以6月以下小兒常見，發(fā)熱輕，喘憋重，肺部易聞干、濕羅音，X線以片狀影為主，多并有肺氣腫。②IFV肺炎以6月～3歲小兒多見，發(fā)熱、咳嗽重，喘息易見，常伴腹瀉，肺部易聞細(xì)濕羅音，X線以片狀影、斑點(diǎn)狀影為主。③ADV肺炎以6月～3歲小兒多發(fā)，發(fā)熱、中毒癥狀重，常有腹瀉，肺部體征出現(xiàn)晚，早期以粗濕羅音為主，細(xì)濕羅音后出現(xiàn)，X線表現(xiàn)為肺紋增粗、模糊，斑點(diǎn)狀影為主。④PIV肺炎以1歲～3歲多見，發(fā)熱輕，咳嗽不劇，肺部可聞干、濕羅音，X線以小片狀影為主。⑤CMV肺炎以1歲～3歲為多，除一般肺炎癥狀外，常伴肝功異常，X線肺紋增粗、模糊，片狀影為主。3病毒性肺炎患兒細(xì)胞免疫變化主要表現(xiàn)為T淋巴細(xì)胞亞群紊亂，CD3↓、CD4↓、CD4CD8↓、CD8↑，而體液免疫無明顯改變。

簡(jiǎn)介：目的采用分子流行病學(xué)的方法，通過漢坦病毒核酸RTPCR分型及部分?jǐn)U增片段的序列分析，研究河南省不同地區(qū)嚙齒類動(dòng)物攜帶腎綜合征出血熱病毒狀況和病毒型別，了解其基因型的分布、變異、新型別存在與否，并對(duì)其系統(tǒng)發(fā)生及進(jìn)化關(guān)系加以分系，為腎綜合征出血熱防治研究提供科學(xué)依據(jù)。方法籠捕法捕鼠，計(jì)算鼠密度，確定鼠種構(gòu)成。用直接免疫熒光法檢測(cè)動(dòng)物肺組織切片，應(yīng)用漢坦病毒型特異性引物以RTPCR方法對(duì)抗原檢測(cè)陽性的鼠肺標(biāo)本擴(kuò)增M和S基因片段上的特異核苷酸序列并測(cè)序，將擴(kuò)增片段的核苷酸序列與已知病毒序列進(jìn)行比較，用PHYLIP軟件對(duì)得到的序列繪制系統(tǒng)發(fā)生樹，了解其進(jìn)化關(guān)系，以明確基因亞型及其地理分布情況。結(jié)果在河南省不同生境的7個(gè)縣市區(qū)中共布鼠籠4720個(gè)，捕獲嚙齒類動(dòng)物695只，褐家鼠為優(yōu)勢(shì)鼠種，占3353％。其次為黃胸鼠，占1841％。應(yīng)用直接免疫熒光法檢測(cè)全部鼠肺，其中陽性肺組織切片95份，陽性率為1367％。陽性切片中，褐家鼠和倉(cāng)鼠分別占470％和2632％。陽性標(biāo)本并用RTPCR反應(yīng)擴(kuò)增并電泳檢測(cè)。對(duì)3份M片段、S片段均擴(kuò)增陽性標(biāo)本進(jìn)行序列測(cè)定，并對(duì)其核苷酸序列進(jìn)行分析顯示，均為漢城型SEO漢坦病毒，與漢坦病毒R22株、L99株、HB55株、HB86株、SR11株分別屬相同亞型。同一地區(qū)的漢坦病毒其核苷酸序列同源性較為接近，表明不同亞型間有著明顯的地理聚集現(xiàn)象。在研究中無新的型別出現(xiàn)。結(jié)論河南省不同地區(qū)出血熱病毒的主要宿主動(dòng)物是褐家鼠，不同宿主動(dòng)物攜帶的漢坦病毒之間的核苷酸序列同源性較高，但也存在一定的差異。這種差異形成的原因有待進(jìn)一步研究。