簡(jiǎn)介：目的探討經(jīng)表面修飾的左旋聚乳酸（PLLA）多孔材料作為骨組織工程支架的可行性。方法采用酶消化法和組織塊法相結(jié)合的方法進(jìn)行兔成骨細(xì)胞的體外分離和培養(yǎng)，將成骨細(xì)胞與PLLA材料共培養(yǎng)，通過(guò)倒置顯微鏡觀察成骨細(xì)胞在材料表面的增殖能力，并將材料植入成年新西蘭兔體內(nèi)，術(shù)后30、60天觀察大體形態(tài)、攝X線片、行放射學(xué)評(píng)分及骨生物力學(xué)檢測(cè)。結(jié)果①成功從新生兔顱骨組織塊中分離培養(yǎng)出成骨細(xì)胞；②與材料共培養(yǎng)后，材料表面可見(jiàn)成骨細(xì)胞附著；③各組兔術(shù)后恢復(fù)及進(jìn)食均正常，傷口無(wú)炎癥反應(yīng)，愈合良好；④大體觀察、X線檢查、放射學(xué)評(píng)分及生物力學(xué)檢測(cè)顯示術(shù)后30、60天實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組評(píng)價(jià)骨生成差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P結(jié)論經(jīng)表面修飾的PLLA多孔材料具備修復(fù)骨缺損的能力。

簡(jiǎn)介：目的骨質(zhì)疏松癥OSTEOPOSIS是一種由于骨形成和骨吸收的負(fù)相平衡導(dǎo)致骨骼脆弱并增加了骨折風(fēng)險(xiǎn)為特征的疾病。骨質(zhì)疏松癥與破骨細(xì)胞OSTEOCLAST數(shù)量和骨吸收活性的增強(qiáng)有密切聯(lián)系。破骨細(xì)胞來(lái)源于骨髓單核巨噬細(xì)胞系由破骨細(xì)胞前體的融合而來(lái)形成多核巨細(xì)胞是人體生理性骨重建和病理性骨破壞過(guò)程中高度特異性的唯一具有骨質(zhì)吸收功能的多核巨細(xì)胞。骨吸收作用是通過(guò)破骨細(xì)胞的活動(dòng)完成的因此破骨細(xì)胞在骨骼的形成和骨量的調(diào)節(jié)方面起著關(guān)鍵作用。病理?xiàng)l件下許多骨代謝性疾病如骨質(zhì)疏松癥都是由于骨吸收亢進(jìn)引起的。因此對(duì)破骨細(xì)胞的形成和骨吸收作用的研究在治療骨質(zhì)疏松等骨吸收疾病中具有重要的指導(dǎo)意義。體外沖擊波療法EXTRACPEALSHOCKWAVETHERAPYESWT是近20年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種由體外震波碎石術(shù)衍生來(lái)的物理治療方法二十世紀(jì)90年代初發(fā)現(xiàn)沖擊波可以治療骨科的很多疾病實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)適宜能量的沖擊波可以增加成骨細(xì)胞的成骨活性進(jìn)而促進(jìn)骨折愈合。但沖擊波作為一種能量刺激形式對(duì)破骨細(xì)胞的形成及骨吸收活性的影響目前未見(jiàn)國(guó)內(nèi)外有相關(guān)研究。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)將體外沖擊波作用于體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的破骨細(xì)胞探討沖擊波對(duì)破骨細(xì)胞形成及骨吸收作用的影響。方法1骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離及誘導(dǎo)培養(yǎng)密度梯度離心法體外分離骨質(zhì)疏松癥患者骨髓基質(zhì)干細(xì)胞接種在放有蓋玻片和骨片的24孔板中以125OH2D3體外誘導(dǎo)培養(yǎng)隨機(jī)分為2組沖擊波干預(yù)組和空白對(duì)照組。2沖擊波對(duì)體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的破骨細(xì)胞形成的影響沖擊波干預(yù)組在體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的第4天給予008MJMM2100次的沖擊波作用。兩組分別在體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的第36912天提取破骨細(xì)胞進(jìn)行TRAP染色進(jìn)行破骨細(xì)胞形態(tài)觀察進(jìn)行破骨樣細(xì)胞和破骨細(xì)胞計(jì)數(shù)RTPCR技術(shù)結(jié)合光密度相對(duì)值半定量分析不同時(shí)間點(diǎn)兩組NFATCL和CFOS的基因表達(dá)的差異分析沖擊波對(duì)體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的破骨細(xì)胞形成的影響。3體外沖擊波對(duì)成熟破骨細(xì)胞骨吸收作用的影響在體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的第12天給予沖擊波干預(yù)組008MJMM2100次的沖擊波作用。在體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的第15天取出骨片1％甲苯胺藍(lán)染色后光鏡下進(jìn)行骨陷窩計(jì)數(shù)掃描電鏡觀察破骨細(xì)胞形成的骨吸收陷窩用IMAGEPROPLUS50計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)分析吸收陷窩的面積反映破骨細(xì)胞的骨吸收活性。4各實(shí)驗(yàn)分別重復(fù)35次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用X±S表示所有參數(shù)采用SPSS110統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。不同時(shí)間點(diǎn)沖擊波干預(yù)組和空白對(duì)照組均數(shù)比較采用重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)資料的方差分析；2組間破骨細(xì)胞骨吸收陷窩的數(shù)量和面積之間均數(shù)比較采用兩獨(dú)立樣本比較的T檢驗(yàn)P結(jié)果1兩組培養(yǎng)板中TRAP細(xì)胞在誘導(dǎo)培養(yǎng)的第3天開(kāi)始出現(xiàn)破骨樣細(xì)胞和破骨細(xì)胞計(jì)數(shù)顯示兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。沖擊波干預(yù)組在細(xì)胞培養(yǎng)的第4天給予沖擊波干預(yù)008MJMM2100次后分別于細(xì)胞培養(yǎng)的第6、9、12天進(jìn)行破骨樣細(xì)胞和破骨細(xì)胞計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn)第6天開(kāi)始空白對(duì)照組有大量TRAP細(xì)胞大量出現(xiàn)并出現(xiàn)較多雙核破骨樣細(xì)胞和散在三核破骨細(xì)胞；沖擊波干預(yù)組中也出現(xiàn)少量雙核破骨細(xì)胞與空白對(duì)照組相比其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005其余時(shí)間點(diǎn)沖擊波干預(yù)組和空白對(duì)照組均有顯著性差異P2通過(guò)對(duì)比沖擊波干預(yù)組和對(duì)照組骨磨片吸收陷窩的數(shù)量和面積結(jié)果發(fā)現(xiàn)沖擊波干預(yù)組的吸收陷窩數(shù)量和面積均小于空白對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P結(jié)論1適當(dāng)能量的體外沖擊波能夠抑制體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的破骨細(xì)胞形成。破骨細(xì)胞分化過(guò)程中NFATCL和CFOS的基因表達(dá)逐漸增強(qiáng)適當(dāng)強(qiáng)度的沖擊波可以通過(guò)抑制NFATCL和CFOS基因表達(dá)抑制體外培養(yǎng)的破骨細(xì)胞的分化。2沖擊波能夠明顯抑制成熟破骨細(xì)胞的骨吸收作用。3沖擊波很有希望成為臨床上治療骨質(zhì)疏松癥的一種積極有效的物理治療方法

簡(jiǎn)介：目的強(qiáng)直性脊柱炎ANKYLOSINGSPONDYLITISAS是一種慢性炎癥性疾病主要侵犯脊柱和骶髂關(guān)節(jié)也可不同程度累及外周關(guān)節(jié)。近來(lái)研究顯示骨質(zhì)疏松OSTEOPOSISOP或骨量減少在強(qiáng)直性脊柱炎中普遍存在嚴(yán)重影響本病的預(yù)后。目前AS骨量丟失的機(jī)制尚未完全闡明多數(shù)學(xué)者認(rèn)為破骨細(xì)胞OSTEOCLASTOC在其中起了重要作用而核因子ΚB受體活化因子配體RECEPTACTIVATOFNUCLEARFACTSΚBLIGRANKL、核因子ΚB受體活化因子RECEPTACTIVATOFNUCLEARFACTSΚBRANK、骨保護(hù)素OSTEOPROTEGERINOPG是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的調(diào)控破骨細(xì)胞分化成熟的關(guān)鍵因子在骨破壞性疾病中發(fā)揮重要作用。本文的研究目的是通過(guò)測(cè)定AS患者骨密度BONEMINERALDENSITYBMD、血清OPG、可溶性RANKLSOLUBLERANKLSRANKL等骨代謝指標(biāo)的水平以及外周血T淋巴細(xì)胞RANKL的表達(dá)情況研究RANKLRANKOPG系統(tǒng)在AS骨代謝中的作用探討AS并發(fā)OP的機(jī)制。方法選取住院AS男性患者30例均符合1984年修訂的紐約強(qiáng)直性脊柱炎分類標(biāo)準(zhǔn)均無(wú)其他代謝性骨病均未曾長(zhǎng)期應(yīng)用糖皮質(zhì)激素、二磷酸鹽以及改變病情抗風(fēng)濕藥物。選取20例年齡匹配的健康男性作為正常對(duì)照組。記錄AS患者的年齡、病程、體重指數(shù)BODYMASSINDEXBMI、血沉ESR、C反應(yīng)蛋白CRP、免疫五項(xiàng)IGA、IGM、IGG、C3、C4、血清鈣CA、磷P、堿性磷酸酶ALKP、PTH、HLAB27。采用雙能X線吸收法DUALENERGYXRAYABSPTIOMETRYDEXA測(cè)定AS患者BMD采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法AVIDINBIOTINPEROXIDASECOMPLEXENZYMELINKEDIMMUNOSBENTASSAYABCELISA測(cè)定血清骨代謝指標(biāo)SRANKL、OPG、抗酒石酸鹽酸性磷酸酶異構(gòu)體5BTARTRATERESISTANTACIDPHOSPHATASE5BTRACP5B、骨特異性堿性磷酸酶BONEALKALINEPHOSPHATASEBALP；采用流式細(xì)胞術(shù)FLOWCYTOMETRYFCM檢測(cè)外周血T淋巴細(xì)胞表面RANKL的表達(dá)情況并與ESR、CRP、血清CA、P、ALKP等臨床相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析。采用SPSS130FWINDOWS統(tǒng)計(jì)軟件包分析。計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差X±S表示兩組間比較采用兩樣本均數(shù)比較的T或T’檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料組間比較采用X2檢驗(yàn)相關(guān)性采用直線相關(guān)分析以P結(jié)果1一般資料的描述AS組男性30例；平均年齡2830±765歲；平均體重指數(shù)2298±366KGM2；平均病程678±685年；正常對(duì)照組男性20例平均年齡3020±520歲。兩組在年齡、性別構(gòu)成方面均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P005。AS組ESR4253±2625MMH；CRP3535±4653MGL；PTH2429±1089PGML。2BMD的測(cè)定結(jié)果30例AS男性患者中骨量正常、骨量減少及OP的發(fā)生率分別為1667％、4667％、3667％。骨量減少在腰椎、股骨頸、大轉(zhuǎn)子及轉(zhuǎn)子間的發(fā)生率分別為5333％、1667％、4333％、2667％。OP在腰椎、股骨頸、大轉(zhuǎn)子及轉(zhuǎn)子間的發(fā)生率分別為1333％、000％、2667％、667％。不同測(cè)量部位骨量減少和骨質(zhì)疏松總的發(fā)生率不同X224375P0000大轉(zhuǎn)子處最高7000％。3血清骨代謝指標(biāo)水平血清SRANKL、OPG、TRACP5B、BALP的水平及SRANKLOPG比值在AS組分別為30419±58044PGML、9376±15527PGML、187±140UL、2844±1456UL、283±360在正常對(duì)照組分別為6421±2386PGML、5505±1667PGML、096±017UL、2777±599UL、126±051。與正常對(duì)照組比較AS患者血清SRANKL、TRACP5B水平及SRANKLOPGLL值顯著升高P005。4AS組骨代謝指標(biāo)之間及其與臨床指標(biāo)間的相關(guān)性經(jīng)直線相關(guān)分析AS患者血清SRANKL水平與OPG之間呈顯著的正相關(guān)關(guān)系R0844P0000；血清SRANKL、OPG水平與TRACP5B均呈顯著正相關(guān)關(guān)系R0828P0000；R0986P0000。除SRANKL與C4呈顯著負(fù)相關(guān)R0493P0027OPG與C3呈顯著負(fù)相關(guān)R0339P0144BALP與ALKP呈顯著正相關(guān)R0393P0032BALP與BMI呈顯著正相關(guān)R0464P0011外本研究所測(cè)定的5個(gè)骨代謝指標(biāo)與臨床數(shù)據(jù)如ESR、CRP、PLT、CA、P、ALKP、IGG、IGA、IGM、C3、C4、PTH、BMI、年齡、病程均無(wú)明顯相關(guān)關(guān)系P005。5AS組骨密度與骨代謝及臨床指標(biāo)間的相關(guān)性經(jīng)直線相關(guān)分析股骨頸、大轉(zhuǎn)子、轉(zhuǎn)子間骨密度與體重指數(shù)均呈顯著正相關(guān)關(guān)系R0389P0034R0545P0002；R0493P0006；各部位骨密度與SRANKLOPG比值、血清SRANKL、TRACP5B、BALP、ALKP、CA、P、PTH水平、ESR、CRP、年齡、病程均無(wú)顯著相關(guān)關(guān)系P005。6外周血CD4RANKL及CD8RANKL細(xì)胞的表達(dá)AS組外周血CD4RANKL細(xì)胞表達(dá)率為284±196％較正常對(duì)照組124±086％顯著升高P0020AS組外周血CD8RANKL細(xì)胞表達(dá)率091±094％稍高于正常對(duì)照組062±050％差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。7AS患者外周血CD4RANKL及CD8RANKL細(xì)胞表達(dá)率與疾病實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)指標(biāo)ESR、CRP的相關(guān)性AS患者外周血CD4RANKL細(xì)胞表達(dá)率、CD8RANKL細(xì)胞表達(dá)率與ESR、CRP均無(wú)明顯相關(guān)關(guān)系P005。結(jié)論1AS患者存在不同程度的骨量丟失多數(shù)患者都合并骨量減少或OP；不同部位的骨量丟失情況不同需多部位測(cè)量BMD綜合分析才能更全面的評(píng)價(jià)BMD情況；BMI對(duì)于維持和增加BMD有重要意義。2AS存在骨代謝異常骨吸收增強(qiáng)可能為AS骨量丟失的因?yàn)?。RANKLRANKOPG系統(tǒng)失衡可能是AS發(fā)生骨質(zhì)疏松機(jī)制之一。3AS患者可能通過(guò)CD4T淋巴細(xì)胞RANKL表達(dá)上調(diào)參與破骨細(xì)胞分化和骨質(zhì)疏松形成。

簡(jiǎn)介：目的觀察狗髁狀突骨折雙板內(nèi)固定和單極內(nèi)固定骨折愈合過(guò)程中骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（BONEMPHOGEICPROTEIN2BMP2）及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子Β1（TRANSFMINGGROWTHFACTΒ，TGFΒ1）的表達(dá)，探討B(tài)MP2、TGFΒ1與髁狀突骨折愈合固定方式的關(guān)系。方法本實(shí)驗(yàn)選用18只雜種犬用打擊裝置造成髁頸下骨折后行內(nèi)固定，一組8只行雙板內(nèi)固定、另一組8只行單板內(nèi)固定，另取2只狗的骨組織做對(duì)照。在第3D、7D、14D、28D各組分別處死2只動(dòng)物，取骨折部骨組織做組織學(xué)和免疫組化檢測(cè)。結(jié)果兩組骨折部分均愈合良好；雙板組BMP2、TGFΒ1表達(dá)強(qiáng)于單板固定組；BMP2組7D高表達(dá)，7D兩組表達(dá)有顯著性差（P結(jié)論BMP2和TGFΒ1在髁狀突骨折內(nèi)固定愈合過(guò)程中表達(dá)有時(shí)序性，兩者在雙板組骨愈合過(guò)程中表達(dá)均較單板組強(qiáng)；兩組BMP2的表達(dá)峰值同步；TGFΒ1的表達(dá)峰值同步；BMP2和TGFΒ1在髁狀突骨折兩種內(nèi)固定中的表達(dá)時(shí)相相同，強(qiáng)度不同，應(yīng)力拮抗作用強(qiáng)的內(nèi)固定方式更有利于這兩種生長(zhǎng)因子的表達(dá)。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)密級(jí)國(guó)際十進(jìn)分類號(hào)（UDC）第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文漸進(jìn)性咬合紊亂大鼠咬肌損傷及其機(jī)制的初步研究（題名和副題名）張婧（作者姓名）指導(dǎo)教師姓名王美青教授（主任醫(yī)師）指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院解剖生理教研室申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)名稱口腔基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)（解生）論文提交日期201004答辯日期201005論文起止時(shí)間2008年05月至2010年04月學(xué)位授予單位第四軍醫(yī)大學(xué)漸進(jìn)性咬合紊亂大鼠咬肌損傷及其漸進(jìn)性咬合紊亂大鼠咬肌損傷及其機(jī)制的初步研究機(jī)制的初步研究研究生張婧學(xué)科專業(yè)口腔基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)（解生）所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院解剖生理教研室導(dǎo)師王美青教授（主任醫(yī)師）輔導(dǎo)教師劉曉東博士資助基金項(xiàng)目國(guó)家自然科學(xué)基金國(guó)際合作資助項(xiàng)目NO30540130469關(guān)鍵詞咬合，咬肌，CA2，TMD，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中國(guó)人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)2010年4月

簡(jiǎn)介：目的嚴(yán)重?zé)齻髾C(jī)體處于物質(zhì)能量高分解代謝狀態(tài)作為人體最大氮庫(kù)的骨骼肌是受分解代謝影響最大的器官致傷后極長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)骨骼肌會(huì)陷入嚴(yán)重的消耗狀態(tài)。骨骼肌嚴(yán)重消耗將導(dǎo)致機(jī)體免疫力下降感染率增加等嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量和預(yù)后。我們實(shí)驗(yàn)室既往研究表明嚴(yán)重?zé)齻蠊趋兰∠闹饕从诜核氐鞍酌阁w活化引發(fā)的肌原纖維蛋白降解增加。然而泛素蛋白酶體途徑不能直接降解肌原纖維蛋白而有賴于鈣蛋白酶CALCIUMACTIVATEDNEUTRALPROTEASECALPAIN等其它途徑作用產(chǎn)生可被泛素蛋白酶體降解的蛋白。鈣蛋白酶是細(xì)胞內(nèi)依賴鈣的中性半胱氨酸酶通過(guò)CA2激活進(jìn)而表現(xiàn)出蛋白水解酶活性。新近研究表明鈣蛋白酶在許多高代謝病理狀態(tài)引發(fā)的骨骼肌消耗中起著重要作用。為進(jìn)一步闡明嚴(yán)重?zé)齻蠊趋兰∠牡臋C(jī)制為臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)本研究擬通過(guò)嚴(yán)重?zé)齻麆?dòng)物模型和體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)探討1嚴(yán)重?zé)齻笫蠊趋兰∠?、骨骼肌超微結(jié)構(gòu)及鈣蛋白酶活性變化規(guī)律2鈣蛋白酶活化導(dǎo)致嚴(yán)重?zé)齻笫蠊趋兰∠牡淖饔脵C(jī)制3嚴(yán)重?zé)齻蟠笫蠊趋兰♀}蛋白酶活化的原因4鈣離子泵抑制劑丹曲林對(duì)嚴(yán)重?zé)齻蠊趋兰∠牡挠绊懠俺醪綑C(jī)制。方法第一部分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)雄性WISTAR大鼠80只180210G隨機(jī)分為假燙組N40和燙傷組N40背部浸入94℃熱水12S、腹部6S制備50％體表面積TOTALBODYAREASURFACETBSAIII度燙傷動(dòng)物模型。于傷后0D、1D、4D、7D、14DN8五個(gè)觀察點(diǎn)采集腹主動(dòng)脈血和骨骼肌標(biāo)本。采用大鼠體重、大鼠肌肉重量體重比評(píng)估燙傷大鼠骨骼肌消耗情況透射電鏡觀察骨骼肌超微結(jié)構(gòu)變化實(shí)時(shí)定量熒光PCR檢測(cè)CALPAIN1及CALPAIN2表達(dá)水平WESTERNBLOT免疫印跡檢測(cè)脛骨前肌中CALPAIN1、CALPAIN2蛋白表達(dá)水平熒光定量檢測(cè)鈣蛋白酶活性。第二部分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)雄性WISTAR大鼠72只隨機(jī)分為3組假燙組N24、燙傷組N24和抑制劑組N24。燙傷組和抑制劑組制備50TBSAIII度燙傷。傷后抑制劑組采用腹腔注射MDL28170鈣蛋白酶抑制劑24MGKG給藥124H。假燙組和燙傷組大鼠給予等量溶液2DMSO的林格氏液。傷后1D、7D、14DN8三個(gè)觀察點(diǎn)采集脛骨前肌標(biāo)本。采用大鼠體重、大鼠肌肉重量體重比評(píng)估燙傷大鼠骨骼肌消耗情況定量檢測(cè)脛骨前肌中游離肌絲含量SDSPAGE分析游離肌絲中肌動(dòng)蛋白、肌球蛋白和肌聯(lián)蛋白的含量熒光定量檢測(cè)骨骼肌中鈣蛋白酶、26S蛋白酶體及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶CASPASE3活性原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記TUNEL染色檢測(cè)肌組織細(xì)胞凋亡WESTERNBLOT免疫印跡分析脛骨前肌中CALPAIN1、CALPAIN2、肌動(dòng)蛋白、肌球蛋白以及蛋白酶體C2亞基蛋白表達(dá)水平胞漿和線粒體中活化BIDDBIDTBID、細(xì)胞色素CCYTOCHROMECCYTC、CALPAIN2蛋白含量以及蛋白激酶BPROTEINKINASEBAKT、哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白MAMMALIANTARGETOFRAPAMYCINMT、糖原合成酶3ΒGLYCOGENSYNTHESISKINASEGSK3Β和叉形頭轉(zhuǎn)錄因子3AFKHEADBOXO3AFOXO3A總蛋白和磷酸化蛋白水平。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)體外培養(yǎng)的大鼠骨骼肌L6細(xì)胞分為對(duì)照組、CALPAIN2過(guò)表達(dá)組、CALPAIN2過(guò)表達(dá)抑制劑組。對(duì)照組采用含有終濃度為5MMCACL2的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)CALPAIN2過(guò)表達(dá)組細(xì)胞轉(zhuǎn)染PGMLVCALPAIN2PA1慢病毒3D后用含有終濃度為5MMCACL2的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)CALPAIN2過(guò)表達(dá)抑制劑組細(xì)胞轉(zhuǎn)染慢病毒3D后用含有5MMCACL2和10NMMDL28170的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。培養(yǎng)0H、6H和24H后收集細(xì)胞ANNEXINVPI染色流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況熒光定量檢測(cè)L6細(xì)胞中CASPASE3活性WESTERNBLOT免疫印跡分析胞漿和線粒體中TBID、細(xì)胞色素C、CALPAIN2蛋白含量。第三部分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)雄性WISTAR大鼠80只隨機(jī)分為假燙組N40和燙傷組50TBSAⅢ°燙傷N40。傷后0D、1D、4D、7D、14D五個(gè)觀察點(diǎn)N8采集脛骨前肌標(biāo)本。電子探針X射線顯微分析法檢測(cè)骨骼肌細(xì)胞胞漿、線粒體、肌漿網(wǎng)三微區(qū)內(nèi)CA2含量實(shí)時(shí)定量熒光PCR檢測(cè)脛骨前肌中鈣蛋白酶激活蛋白和鈣蛋白酶抑制蛋白CALPASTINMRNA水平WESTERNBLOT免疫印跡分析CALPASTIN蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)骨骼肌中鈣蛋白酶活性。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)L6細(xì)胞分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組兩組對(duì)照組細(xì)胞用含有10假傷大鼠血清的DMEM培養(yǎng)基孵育、實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞用含10燙傷大鼠血清的DMEM培養(yǎng)基孵育。孵育0H、6H、24H、48H后FLUO4AM檢測(cè)細(xì)胞胞漿中CA2濃度熒光定量檢測(cè)L6細(xì)胞中鈣蛋白酶活性。第四部分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)雄性WISTAR大鼠56只隨機(jī)分為假燙組N8、燙傷組50TBSAⅢ°燙傷N24和丹曲林組50TBSAⅢ°燙傷N24。傷后假燙組、燙傷組尾靜脈注射5甘露醇丹曲林組尾靜脈注射丹曲林鈉2MGKG溶于5甘露醇傷后1D、4D、7D三個(gè)觀察點(diǎn)采集脛骨前肌標(biāo)本稱量體重及骨骼肌重量。透射電鏡觀察骨骼肌超微結(jié)構(gòu)變化電子探針X射線顯微分析法檢測(cè)骨骼肌細(xì)胞三微區(qū)內(nèi)CA2含量WESTERNBLOT免疫印跡分析脛骨前肌中CALPAIN1、CALPAIN2蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)骨骼肌中鈣蛋白酶活性。結(jié)果第一部分150TBSAIII度燙傷后大鼠體重以及脛骨前肌快肌重量明顯降低燙傷組脛骨前肌體重比明顯低于假燙組P2傷后燙傷組骨骼肌肌原纖維出現(xiàn)溶解、斷裂、Z線局部消失并伴有線粒體腫脹和空泡化現(xiàn)象與肌組織損傷動(dòng)態(tài)變化基本一致3傷后燙傷組大鼠脛骨前肌CALPAIN1和CALPAIN2蛋白及MRNA表達(dá)水平均升高其中蛋白水平于傷后4D達(dá)到峰值4傷后鈣蛋白酶的活性持續(xù)上升于傷后7D達(dá)到峰值。第二部分1燙傷后大鼠脛骨前肌游離肌絲明顯增加肌動(dòng)蛋白、肌球蛋白和肌聯(lián)蛋白含量顯著增加鈣蛋白酶活性升高傷后7D達(dá)到極值。應(yīng)用鈣蛋白酶抑制劑后脛骨前肌游離肌絲未見(jiàn)明顯增加肌動(dòng)蛋白、肌球蛋白和肌聯(lián)蛋白含量顯著低于燙傷組鈣蛋白酶活性一直處于較低水平2嚴(yán)重燙傷后脛骨前肌中26S蛋白酶體活性及C2亞基蛋白表達(dá)升高顯著高于假燙組。加入鈣蛋白酶抑制劑后26S蛋白酶體活性及C2亞基蛋白表達(dá)與同時(shí)間點(diǎn)燙傷組相比明顯下降3燙傷組骨骼肌TUNEL核凋亡指數(shù)、CASPASE3活性顯著高于假燙組傷后7D差異最為顯著給予鈣蛋白酶抑制劑后肌組織細(xì)胞凋亡指數(shù)、CASPASE3活性明顯低于燙傷組。燙傷組和抑制劑組脛骨前肌胞漿和線粒體中CALPAIN2蛋白表達(dá)均顯著升高但同時(shí)間點(diǎn)抑制劑組蛋白表達(dá)低于燙傷組傷后各組胞漿中BID蛋白表達(dá)差異不顯著但線粒體中TBID蛋白表達(dá)存在顯著差異傷后1D、7D燙傷組線粒體中TBID蛋白表達(dá)顯著升高抑制劑組TBID蛋白表達(dá)明顯低于燙傷組細(xì)胞色素C蛋白在假燙組和抑制劑組脛骨前肌胞漿中表達(dá)較少燙傷后隨時(shí)間延長(zhǎng)燙傷組胞漿中細(xì)胞色素C蛋白含量顯著升高傷后7D燙傷組胞漿中細(xì)胞色素C含量顯著高于假燙組和抑制劑組同時(shí)線粒體中細(xì)胞色素C含量明顯減少傷后7D燙傷組線粒體中細(xì)胞色素C含量顯著低于假燙組和抑制劑組。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中CALPAIN2過(guò)表達(dá)的L6細(xì)胞凋亡率和CASPASE3活性顯著升高與對(duì)照組差異顯著抑制劑組細(xì)胞凋亡率和CASPASE3活性略有升高但低于過(guò)表達(dá)組。過(guò)表達(dá)組和抑制劑組胞漿中CALPAIN2蛋白表達(dá)沒(méi)有顯著差異但過(guò)表達(dá)組細(xì)胞線粒體內(nèi)CALPAIN2隨著孵育時(shí)間的增加而升高顯著高于抑制劑組L6細(xì)胞線粒體及胞漿內(nèi)TBID含量與CALPAIN2蛋白的變化趨勢(shì)相似。過(guò)表達(dá)組L6細(xì)胞線粒體中細(xì)胞色素C蛋白含量逐漸降低胞漿中細(xì)胞色素C蛋白的逐漸升高24H后達(dá)到極值。抑制劑組中細(xì)胞胞漿及線粒體中細(xì)胞色素C蛋白變化趨勢(shì)同過(guò)表達(dá)組但兩組存在顯著差異4嚴(yán)重?zé)齻竺劰乔凹≈蠥KT、MT、GSK3Β和FOXO3A蛋白的磷酸化水平顯著降低給予鈣蛋白酶抑制劑后傷后1D和7D的AKT、MT、GSK3Β蛋白磷酸化水平顯著高于燙傷組。第三部分1燙傷組大鼠傷后脛骨前肌細(xì)胞漿、線粒體CA2升高肌漿網(wǎng)CA2含量降低傷后1DCA2變化達(dá)到極值。燙傷組CALPASTATINMRNA表達(dá)水平呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢(shì)傷后1D和4D的CALPASTATINMRNA水平明顯低于假燙組燙傷組CALPAINACTIVAT的MRNA傷后略有變化與假燙組沒(méi)有顯著差異。傷后脛骨前肌中CALAPASTATIN蛋白表達(dá)下降傷后4D顯著低于假燙組2燙傷血清孵育L6細(xì)胞引起胞漿內(nèi)CA2含量升高隨著孵育時(shí)間延長(zhǎng)CA2含量增加鈣蛋白酶活性升高。第四部分1鈣通道RYR受體阻滯劑丹曲林明顯抑制細(xì)胞胞漿及線粒體內(nèi)CA2超載丹曲林組傷后1D、4D細(xì)胞胞漿、線粒體內(nèi)CA2含量明顯低于燙傷組2丹曲林組傷后肌組織超微結(jié)構(gòu)與對(duì)照組相比未見(jiàn)明顯變化3CALPAIN1和CALPAIN2蛋白表達(dá)水平顯著低于燙傷組4丹曲林組鈣蛋白酶的活性雖有略有波動(dòng)但仍顯著低于燙傷組。丹曲林治療有效降低骨骼肌消耗緩解燒傷導(dǎo)致的體重及脛骨前肌體重比變化。結(jié)論1嚴(yán)重?zé)齻筲}蛋白酶活化是嚴(yán)重?zé)齻蠊趋兰∠牡闹匾??；罨拟}蛋白酶可通過(guò)裂解肌原纖維、釋放游離肌絲、上調(diào)下游泛素蛋白酶體途徑的活性啟動(dòng)和加速蛋白降解活化的鈣蛋白酶激活線粒體凋亡途徑促進(jìn)細(xì)胞凋亡同時(shí)鈣蛋白酶還通過(guò)抑制AKT活性及其信號(hào)通路下游分子磷酸化抑制蛋白合成、促進(jìn)骨骼肌消耗。2細(xì)胞內(nèi)持續(xù)CA2超載及鈣蛋白酶抑制蛋白低表達(dá)是嚴(yán)重燙傷后骨骼肌胞漿內(nèi)的鈣蛋白酶活化的主要原因。3鈣蛋白酶抑制劑MDL28170和鈣通道RYR受體阻滯劑丹曲林能減輕燒傷引起的骨骼肌消耗為指導(dǎo)臨床治療嚴(yán)重?zé)齻趋兰∠奶峁├碚撘罁?jù)。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多檸檬酸來(lái)源的成骨誘導(dǎo)支架促進(jìn)大鼠顱骨骨缺損再生的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：第一部分成骨不全癥基因型表現(xiàn)型的關(guān)聯(lián)研究研究背景成骨不全癥是一組以骨強(qiáng)度下降、骨折風(fēng)險(xiǎn)增加為特點(diǎn)的遺傳異質(zhì)性骨病，最常見(jiàn)的致病基因?yàn)榫幋aⅠ型膠原的COL1A1、COL1A2。此外還有約15種基因可引起成骨不全癥。通過(guò)傳統(tǒng)SANGER測(cè)序的方式對(duì)成骨不全癥進(jìn)行基因診斷費(fèi)時(shí)費(fèi)力。研究目的探究二代測(cè)序平臺(tái)診斷成骨不全癥的敏感性、特異性，同時(shí)對(duì)明確基因診斷的成骨不全癥進(jìn)行基因型表現(xiàn)型關(guān)聯(lián)的分析。研究方法我們?cè)O(shè)計(jì)了包含12種成骨不全癥致病基因在內(nèi)的二代測(cè)序平臺(tái)，檢測(cè)臨床診斷為成骨不全癥的患者，通過(guò)SANGER測(cè)序?qū)z測(cè)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證，并對(duì)COL1A1、COL1A2所致成骨不全癥的基因型表現(xiàn)型進(jìn)行進(jìn)一步分析。研究結(jié)果二代測(cè)序的平均測(cè)序深度為每個(gè)堿基200X。經(jīng)SANGER測(cè)序驗(yàn)證，二代測(cè)序平臺(tái)檢測(cè)成骨不全癥的敏感性約為902％，特異性為100％，檢測(cè)到46個(gè)新突變位點(diǎn)。在COL1A1、COL1A2基因所致OI中，COL1A1單倍劑量不足所致的OI表型比A三螺旋結(jié)構(gòu)改變所致的表型較輕，其中身高Z值的改變有顯著差異單倍劑量不足組為06±11，COL1A1A三螺旋結(jié)構(gòu)改變者為65±61，COL1A2A三螺旋結(jié)構(gòu)改變者為55±46，P0007。未發(fā)現(xiàn)氨基酸替換、A三螺旋結(jié)構(gòu)位置與表現(xiàn)型之間的關(guān)系。研究結(jié)論二代測(cè)序平臺(tái)是診斷成骨不全癥的有效手段。COL1A1單倍劑量不足引起的成骨不全癥較其他類型COL1A1、COL1A2改變臨床表現(xiàn)更輕。第二部分阿侖膦酸鈉、唑來(lái)膦酸鹽治療成骨不全癥的療效對(duì)比研究背景成骨不全癥是一種以骨密度、骨強(qiáng)度下降，骨折風(fēng)險(xiǎn)增高為主要表現(xiàn)的遺傳代謝性骨病。目前，雙膦酸鹽為最常用的治療成骨不全癥的藥物，其中阿侖膦酸鈉、唑來(lái)膦酸是較常見(jiàn)的強(qiáng)有效的雙膦酸鹽類藥物。研究目的評(píng)估阿侖膦酸鈉、唑來(lái)膦酸治療成骨不全癥的療效及安全性。研究方法在這一單中心、隨機(jī)、對(duì)照臨床試驗(yàn)中，216歲成骨不全癥患者按照21的比例進(jìn)行分組，分別接受口服阿侖膦酸鈉70MG周或者靜脈注射唑來(lái)膦酸5MG年的治療。每隔6月對(duì)患者進(jìn)行骨密度BONEMINERALDENSITYBMD、X線、血清學(xué)檢測(cè)、藥物不良反應(yīng)的評(píng)估。主要研究終點(diǎn)為腰椎骨密度LUMBARSPINEBMD，LSBMD變化率，次要研究終點(diǎn)為L(zhǎng)SBMDZ值、股骨頸BMDFEMALNECKBMD，F(xiàn)NBMD變化率、FNBMDZ值、骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)變化率、再次發(fā)生骨折率。主要研究終點(diǎn)采用協(xié)方差方法計(jì)算，固定因子為治療方式，協(xié)變量為年齡及基線水平。分析基于意向性分析人群。研究結(jié)果共有161例患者納入研究，其中隨機(jī)分配至阿侖膦酸鈉組107例，唑來(lái)膦酸組54例。136例患者完成了2年的治療與隨訪。經(jīng)過(guò)2年治療，阿侖膦酸鈉組LSBMD的變化率為6001％±708％，唑來(lái)膦酸組變化率為6204％±59％，兩組之間無(wú)顯著性差異0951。唑來(lái)膦酸組能夠顯著降低骨折發(fā)生率危險(xiǎn)比023，95％置信區(qū)間01180431，P＜0001。隨訪6月時(shí)，唑來(lái)膦酸組的FNBMD增長(zhǎng)率（3223％±443％）及FNBMDZ值0631±0065均顯著高于阿侖膦酸鈉組2264％±369％，P00250436±0054，P0025。隨訪24個(gè)月時(shí)，唑來(lái)膦酸組的LSBMDZ值0706±0006顯著高于阿侖膦酸鈉組0499±0051的LSBMDZ值P0013。兩組均能顯著降低骨轉(zhuǎn)換指標(biāo)堿性磷酸酶及Ⅰ型膠原羧基肽，但組間無(wú)顯著性差異。研究結(jié)論口服阿侖膦酸鈉及靜脈輸注唑來(lái)膦酸均能顯著提高成骨不全癥患者的骨密度。在降低骨折風(fēng)險(xiǎn)方面，唑來(lái)膦酸優(yōu)于阿侖膦酸鈉。兩種藥物的耐受性均較好。第三部分GHAMSTOUT綜合征的臨床分析研究背景GHAMSTOUT綜合征GHAMSTOUTSYNDROME，GSS又稱為大塊骨溶解癥，是一種極為罕見(jiàn)的以骨溶解性破壞為主要表現(xiàn)的疾病。研究目的探究GSS可能的發(fā)病機(jī)制，探索雙膦酸鹽BISPHOSPHONATES，BPS對(duì)GSS的療效。研究方法分析在北京協(xié)和醫(yī)院就診的GSS患者的臨床、影像學(xué)、病理學(xué)表現(xiàn)。對(duì)取了骨組織活檢的患者進(jìn)行淋巴管特異標(biāo)記物D240、血管標(biāo)記物CD31、CD34及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VULARENDOTHELIALGROWTHFACTVEGF，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體VULARENDOTHELIALGROWTHFACTRECEPTVEGFR等染色。通過(guò)影像學(xué)、骨密度等指標(biāo)評(píng)估BPS對(duì)于GSS的療效。研究結(jié)果在12例就診的GSS患者中，11例為多發(fā)骨骼受累，1例為單一骨骼受累。4例患者合并其他部位的淋巴管瘤。4例合并乳糜胸3的患者出現(xiàn)反復(fù)呼吸困難。骨骼活檢顯示病變部位的內(nèi)皮細(xì)胞有CD31、CD34及D240的陽(yáng)性表達(dá)。此外，還發(fā)現(xiàn)有VEGF、VEGFR的弱陽(yáng)性表達(dá)。研究結(jié)論GSS是一種極為罕見(jiàn)的淋巴管來(lái)源的疾病。合并乳糜胸時(shí)提示預(yù)后較差。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多絲素和絲素-羥基磷灰石復(fù)合多孔材料與間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞相容性以及成骨誘導(dǎo)的比較研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：背景與目的隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展和人類壽命逐漸延長(zhǎng)，動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病率與日俱增。隨之而來(lái)的便是動(dòng)脈缺血性疾病。目前，治療動(dòng)脈缺血性疾病的方法多種多樣，如各種轉(zhuǎn)流手術(shù)、動(dòng)脈內(nèi)膜剝脫術(shù)、FOGARTY導(dǎo)管取栓術(shù)及導(dǎo)管介入球囊擴(kuò)張術(shù)等，雖然可以快速恢復(fù)血流供應(yīng)，但同時(shí)亦可導(dǎo)致“缺血再灌注損傷”ISCHEMIAREPERFUSIONINJURY，IRI的發(fā)生，使病人預(yù)后轉(zhuǎn)差，降低了臨床治療的成功率。目前基礎(chǔ)及臨床研究的重點(diǎn)即為如何避免或降低IRI對(duì)病人預(yù)后的影響。主要集中在人體重要器官（如腦、心肌、肺等），對(duì)于骨骼肌的研究較少。而骨骼肌作為人體主要的動(dòng)力器官，其對(duì)缺血的耐受力較低，恢復(fù)組織灌注后較容易產(chǎn)生IRI，故對(duì)骨骼肌IRI的研究就顯得尤為重要。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立兔后肢缺血再灌注模型，探討局部低溫對(duì)IRI的保護(hù)作用以及從炎癥反應(yīng)的角度探討局部低溫對(duì)IRI的保護(hù)作用機(jī)制，為IRI提供新的防治途徑。方法取成年兔36只，雌雄不限，體重225KG，隨機(jī)分為A、B、C、D、E、F，共6組，每組6只。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物于術(shù)前12小時(shí)禁食水，腹腔推注3％水合氯醛5MLKG麻醉，麻醉成功后將動(dòng)物仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上。備皮、消毒鋪巾后，沿股動(dòng)脈走行切開(kāi)皮膚約10CM，顯露股神經(jīng)血管束，游離出股動(dòng)脈約5CM。利用無(wú)創(chuàng)血管夾夾閉股動(dòng)脈，以自制止血帶置于股動(dòng)脈、股靜脈和股神經(jīng)下方阻斷動(dòng)脈側(cè)枝循環(huán)，并保持股靜脈回流通暢，建立模型。A組為對(duì)照組，B組為IRI組，C組為再灌注后局部溫度10℃組，D組為再灌注后局部溫度15℃組，E組為再灌注后局溫度控制20℃組，F(xiàn)組為再灌注后局部溫度控制25℃組。血流阻斷時(shí)間4小時(shí)。上述A、B、C、D、E、F組分別于再灌注后1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)給予右心房穿刺取血，檢測(cè)血清中肌酸激酶CREATINEKINASECK、乳酸脫氫酶LACTATEDEHYDROGENASELDH及白介素6IL6的表達(dá)水平。于缺血再灌注4小時(shí)后取手術(shù)肢體的脛后肌組織約06G，其中03G左右修剪后放于事先注滿福爾馬林溶液的試管中進(jìn)行HE染色，觀察肌肉組織細(xì)微結(jié)構(gòu)變化，剩余肌肉檢測(cè)肌肉濕干比WD。結(jié)果1再灌注后血清中LDH、CK、IL6水平的比較再灌注4小時(shí)后血清中LDH、CK水平經(jīng)統(tǒng)計(jì)比較，A組各時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯差異P＞005C組、D組和E組與B組比較水平下降，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，P＜005。F組各時(shí)間點(diǎn)與B組比較水平上升P＜005。IL6水平經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較A組各時(shí)間點(diǎn)無(wú)明顯差異P＞005B組各時(shí)間點(diǎn)水平較其它實(shí)驗(yàn)組均高，在4小時(shí)時(shí)達(dá)到最高值為4150±459，C組、D組、E組和F組與B組比較各時(shí)間點(diǎn)都有不同程度的下降P＜005。2肌肉干濕比的比較再灌注后4H后，與A組相比各實(shí)驗(yàn)組肌肉均有不同程度的水腫P＜005。C組再灌注4H后肌肉濕干比為478±087，較其它各實(shí)驗(yàn)組均低，肌肉水腫程度最輕，差異有顯著性意義P＜005。F組再灌注4H后肌肉濕干比為607±063，較其它各實(shí)驗(yàn)組均高，肌肉水腫程度最重，差異有顯著性意義P＜005。結(jié)論局部低溫對(duì)兔骨骼肌缺血再灌注損傷有顯著的保護(hù)作用，局部溫度為10℃左右時(shí)保護(hù)作用最強(qiáng)，其保護(hù)作用的發(fā)揮是通過(guò)減輕再灌注組織的炎癥反應(yīng)而實(shí)現(xiàn)的。

簡(jiǎn)介：學(xué)位論文兔下頜骨牽張成骨實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立兔下頜骨牽張成骨實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立THEESTABLISHOFANANIMALMODELOFMIBULARDISTRACTIONOSTEOGENESISINRABBITS指導(dǎo)教師姓名指導(dǎo)教師姓名李光早李光早教授教授蚌埠醫(yī)學(xué)院蚌埠醫(yī)學(xué)院申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士學(xué)科專業(yè)外科學(xué)外科學(xué)（整形）（整形）論文提交日期論文提交日期2008年4月9日論文答辯時(shí)間論文答辯時(shí)間2008年5月學(xué)位授予單位學(xué)位授予單位蚌埠醫(yī)學(xué)院蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)位授予日期學(xué)位授予日期2008年6月2008年04月分類號(hào)R6229密級(jí)學(xué)校代碼10367UDC6179編號(hào)學(xué)號(hào)20057031066答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)主席論文評(píng)閱人人學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明本人所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究工作所取得的成果，本論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或已經(jīng)獲取得的研究成果。在本論文撰寫(xiě)中所引用其他研究者的研究?jī)?nèi)容和成果時(shí)已在論文中給予特別標(biāo)注和明確說(shuō)明。對(duì)本論文的實(shí)驗(yàn)研究以及論文撰寫(xiě)過(guò)程中給予幫助和建議等貢獻(xiàn)的其他人士，也已作了致謝說(shuō)明。本人完全理解本聲明的法律責(zé)任，以及所涉及的結(jié)果將由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名日期年月日關(guān)于學(xué)位論文著作權(quán)的共享聲明根據(jù)中華人民共和國(guó)著作權(quán)法和高等院校知識(shí)產(chǎn)權(quán)管理?xiàng)l例，本學(xué)位論文，題目兔下頜骨牽張成骨實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立，是研究生在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的職務(wù)作品，得到蚌埠醫(yī)學(xué)院相關(guān)部門科室的物質(zhì)技術(shù)和經(jīng)費(fèi)支持，因此，本學(xué)位論文的著作權(quán)由研究生，導(dǎo)師和蚌埠醫(yī)學(xué)院三方共同享有，均享有署名權(quán)和使用權(quán)等權(quán)益；本學(xué)位論文成果歸屬蚌埠醫(yī)學(xué)院。根據(jù)國(guó)家學(xué)位授予條例，學(xué)校對(duì)本學(xué)位論文有使用權(quán)，包括保存本學(xué)位論文；因教學(xué)和科研的目的，保留在圖書(shū)館被查閱或借閱；學(xué)?？筛鶕?jù)國(guó)家規(guī)定將本學(xué)位論文送交國(guó)家有部門保留和使用。學(xué)校在公布本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容時(shí)，應(yīng)保障研究生和導(dǎo)師的署名權(quán)等權(quán)益。研究生和導(dǎo)師在公開(kāi)發(fā)表本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容時(shí)必須保障學(xué)校的署名權(quán)等權(quán)益，即在發(fā)表論文時(shí)蚌埠醫(yī)學(xué)院及相關(guān)部門科室應(yīng)署名為作者單位。聲明人完全理解本聲明的法律責(zé)任。研究生簽名導(dǎo)師簽名日期年月日

簡(jiǎn)介：目的通過(guò)測(cè)定骨密度及相關(guān)各項(xiàng)指標(biāo)探討豬骨蛋白對(duì)骨質(zhì)疏松模型大鼠的影響。方法本實(shí)驗(yàn)采用大鼠糖皮質(zhì)激素骨質(zhì)疏松模型及骨損傷模型對(duì)豬骨蛋白的抗骨質(zhì)疏松作用進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。1將3月齡WISTAR大鼠60只隨機(jī)分為6組空白對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥組、骨蛋白高劑量組、中劑量組、低劑量組。空白對(duì)照組按10MLKG每天灌胃給予蒸餾水模型組按25MLKG每周兩次肌肉注射地塞米松骨質(zhì)疏松模型豬骨蛋白高劑量組按200MGKG每天灌胃給予豬骨蛋白中劑量組100MGKG每天灌胃給予豬骨蛋白低劑量組按50MGKG每天灌胃給予豬骨蛋白陽(yáng)性藥組按300MGKG每天灌胃給予接骨七厘片。除空白組外其余各組肌肉注射地塞米松25MGKG每周兩次連續(xù)注射6周造成骨質(zhì)疏松模型。連續(xù)給藥12周后取血、尿用于測(cè)定血鈣CA、磷P和堿性磷酸酶ALP放射性免疫法測(cè)定血清骨鈣素BGP的含量以及尿鈣CA、尿磷P、尿肌酐CR和尿羥脯氨酸HOP的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取大鼠脛骨檢查骨密度。處死時(shí)留取脛骨制作脫鈣骨切片做骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)分析。2取WISTAR大鼠60只制成脛骨骨損傷模型隨機(jī)分為6組模型組陽(yáng)性組高劑量組中劑量組低劑量組每組均為20只大鼠。空白組每日灌胃給予10MLKG蒸餾水陽(yáng)性組每日給予300MGKG接骨七厘片高劑量組每日給予200MGKG豬骨蛋白中劑量組每日給予100MGKG豬骨蛋白低劑量組每日給予50MGKG豬骨蛋白。連續(xù)給藥20D后取一半大鼠脛骨進(jìn)行放射學(xué)觀察和骨痂組織學(xué)觀察另一半大鼠繼續(xù)給藥40D后取剩余大鼠脛骨進(jìn)行放射學(xué)觀察和骨痂組織學(xué)觀察。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)利用SPSS130統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)P結(jié)果1骨蛋白高、中和低劑量組血磷含量分別為228±035MMOLL234±032MMOLL和229±030MMOLL均比骨質(zhì)疏松模型組明顯降低261±023MMOLLP結(jié)論豬骨蛋白可促進(jìn)骨形成抑制骨吸收加速骨轉(zhuǎn)化進(jìn)而改善實(shí)驗(yàn)大鼠的骨質(zhì)疏松癥狀。豬骨蛋白對(duì)糖皮質(zhì)激素所導(dǎo)致的骨質(zhì)疏松有顯著作用。

簡(jiǎn)介：目的本論文重點(diǎn)研究負(fù)載中藥淫羊藿苷生物陶瓷材料對(duì)骨缺損的修復(fù)作用，探討淫羊藿苷對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BONEMESENCHYMALSTEMCELLSBMSCS）的生物學(xué)作用及相關(guān)機(jī)理。構(gòu)建負(fù)載淫羊藿苷的微納米修飾羥基磷灰石（MICRONANOHYBRIDSTRUCTUREDHYDROXYAPATITEMICRONANOHAP）控釋給藥系統(tǒng)，應(yīng)用于大鼠股骨缺損，以評(píng)價(jià)其體內(nèi)成骨成血管修復(fù)效果；進(jìn)一步在大鼠骨質(zhì)疏松模型上，研究探討全身給藥及局部載淫羊藿苷磷酸鈣骨水泥（CALCIUMPHOSPHATECEMENTCPC）控釋系統(tǒng)對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠顱骨缺損的修復(fù)效果，為骨缺損再生修復(fù)提供新的思路和方法。材料與方法1、對(duì)年輕大鼠BMSCS，給予不同濃度的淫羊藿苷處理，通過(guò)MTT法、流式細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡、REALTIMEPCR、WESTERNBLOTTING、堿性磷酸酶活性檢測(cè)及酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定等檢測(cè)淫羊藿苷對(duì)BMSCS增殖、成骨分化及成血管因子表達(dá)的影響，并進(jìn)一步通過(guò)WESTERNBLOTTING法和抑制試驗(yàn)探討ERK、P38和JNK等分子信號(hào)通路在其中的作用。2、構(gòu)建年輕大鼠股骨缺損模型，將淫羊藿苷負(fù)載于MICRONANOHAP后植入大鼠股骨缺損處，通過(guò)MICROCT、序列熒光標(biāo)記和組織學(xué)檢測(cè)新骨形成情況，通過(guò)MICROFIL和MICROCT觀察其血管生成情況。3、通過(guò)卵巢去除法（OVARIECTOMYOVX）建立大鼠骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型；對(duì)骨質(zhì)疏松BMSCS（BMSCSOVX）給予不同濃度的淫羊藿苷處理，觀察淫羊藿苷對(duì)BMSCSOVX增殖、成骨分化、成血管因子表達(dá)的影響；同時(shí)觀察不同濃度下破骨細(xì)胞的生成情況。4、構(gòu)建骨質(zhì)疏松大鼠顱骨缺損模型，淫羊藿苷負(fù)載于CPC后將BMSCSOVX負(fù)載于復(fù)合材料上，植入大鼠顱骨缺損處，術(shù)后給予骨質(zhì)疏松大鼠淫羊藿苷灌胃處理，通過(guò)MICROCT、序列熒光標(biāo)記和組織學(xué)檢測(cè)不同組別骨質(zhì)疏松大鼠顱骨缺損的再生修復(fù)效果，并觀察其血管生成情況。結(jié)果1、不同濃度的淫羊藿苷對(duì)BMSCS的增殖有抑制作用，且淫羊藿苷的增殖抑制作用呈濃度依賴性。2、淫羊藿苷可促進(jìn)BMSCS的成骨、成血管基因表達(dá)及ALP活性，以20ΜM濃度效果最佳。3、淫羊藿苷作用于BMSCS，ERK、P38和JNK磷酸化增強(qiáng)，且ERK、P38和JNK通路被阻斷后淫羊藿苷誘導(dǎo)的BMSCS成骨分化也受到抑制，而在ERK被阻斷后淫羊藿苷誘導(dǎo)的BMSCS成血管因子表達(dá)受到抑制。4、MICRONANOHAP可緩慢地釋放淫羊藿苷；大鼠股骨缺損部位填充載淫羊藿苷MICRONANOHAP后其新骨及血管生成量增多。5、BMSCSOVX在淫羊藿苷作用下細(xì)胞增殖無(wú)明顯變化，但其成骨、成血管基因表達(dá)及ALP活性表達(dá)增強(qiáng)，以20ΜM濃度最為明顯。6、CPC可緩慢釋放淫羊藿苷；在骨質(zhì)疏松大鼠顱骨缺損模型中，淫羊藿苷局部緩釋組的新骨形成及血管生成均較空白對(duì)照組強(qiáng)，聯(lián)合淫羊藿苷全身給藥后，其骨修復(fù)效果最為顯著。結(jié)論1、淫羊藿苷對(duì)大鼠BMSCS的增殖有抑制作用，但對(duì)其成骨分化和成血管因子的表達(dá)有明顯促進(jìn)作用，以20ΜM濃度最為明顯。2、ERK參與淫羊藿苷誘導(dǎo)BMSCS成骨分化和成血管因子表達(dá)的過(guò)程，而P38和JNK信號(hào)途徑可能僅參與淫羊藿苷誘導(dǎo)的成骨過(guò)程。3、MICRONANOHAP可作為淫羊藿苷的緩釋載體；淫羊藿苷MICRONANOHAP緩釋系統(tǒng)有利于促進(jìn)骨缺損的修復(fù)。4、淫羊藿苷對(duì)BMSCSOVX的增殖無(wú)明顯促進(jìn)或抑制作用，但可促進(jìn)BMSCSOVX成骨分化和成血管因子表達(dá)，以20ΜM濃度最為明顯。5、CPC可作為淫羊藿苷的緩釋載體；淫羊藿苷全身給藥聯(lián)合局部緩釋用藥促進(jìn)骨修復(fù)能力最顯著。

簡(jiǎn)介：數(shù)字化骨庫(kù)及計(jì)算機(jī)導(dǎo)航輔助骨腫瘤切除后數(shù)字化骨庫(kù)及計(jì)算機(jī)導(dǎo)航輔助骨腫瘤切除后骨缺損的異體骨精細(xì)化重建骨缺損的異體骨精細(xì)化重建吳智鋼培養(yǎng)類別全日制學(xué)位類型學(xué)術(shù)學(xué)位一級(jí)學(xué)科（專業(yè)類）臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科（專業(yè)）外科學(xué)（骨外）研究方向骨腫瘤外科治療指導(dǎo)教師郭征教授（主任醫(yī)師）培養(yǎng)單位西京醫(yī)院骨科二O一四年五月博士學(xué)位論文分類號(hào)UDC密級(jí)第四軍醫(yī)大學(xué)THEFOURTHMILITARYMEDICALUNIVERSITY第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文目錄縮略語(yǔ)表1中文摘要3英文摘要6前言10文獻(xiàn)回顧121骨庫(kù)沿革1211骨庫(kù)的建設(shè)1212骨庫(kù)的管理132骨腫瘤保肢技術(shù)1621骨腫瘤分期1622骨腫瘤外科邊界的分類1623保肢術(shù)的適應(yīng)癥和方法1724大段同種異體骨移植的應(yīng)用183骨庫(kù)的數(shù)字化改建1931數(shù)字骨科學(xué)概念的提出1932異體骨數(shù)字化的應(yīng)用20321傳統(tǒng)選骨技術(shù)20322虛擬3D技術(shù)21323數(shù)字化骨庫(kù)的意義224計(jì)算機(jī)輔助導(dǎo)航技術(shù)2441導(dǎo)航技術(shù)的發(fā)展2442導(dǎo)航技術(shù)在骨腫瘤外科中的應(yīng)用255展望27正文281課題設(shè)計(jì)及流程2811數(shù)字化骨庫(kù)的構(gòu)建方法29

簡(jiǎn)介：目的探討一期前路病灶清除同種異體骨植骨融合內(nèi)固定治療胸腰椎結(jié)核的臨床療效。方法回顧性分析新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院脊柱外科2007年6月～2009年3月一期前路病灶清除同種異體骨植骨融合內(nèi)固定的41例胸腰結(jié)核患者的臨床資料，并進(jìn)行信件、電話及醫(yī)院門診隨訪，平均隨訪時(shí)間21個(gè)月，病變累及兩個(gè)或兩個(gè)以上椎體，其中男性15例，女性26例，年齡4～67歲，平均年齡36歲；胸椎（胸4～12椎體）21例，胸12腰1椎體3例，腰椎（腰2～4椎體）17例，有7例患者有不同程度的后凸畸形，后凸角為21°～62°，平均42°，22例伴神經(jīng)功能障礙者，術(shù)前正規(guī)抗癆2～4周，對(duì)研究對(duì)象的植骨塊融合情況、神經(jīng)功能恢復(fù)情況、后凸畸形矯正情況進(jìn)行隨訪分析；結(jié)果病例隨訪平均21個(gè)月，41例患者胸背部及腰部疼痛術(shù)后明顯減輕，切口一期愈合，血沉術(shù)后1～3個(gè)月逐漸恢復(fù)正常，無(wú)一例結(jié)核復(fù)發(fā)，術(shù)后7例有后凸畸形的患者，后凸角矯正至0°～22°。所有患者椎間植骨獲骨性愈合，愈合時(shí)間為7～12個(gè)月（按MOON觀察標(biāo)準(zhǔn)）。22例伴神經(jīng)功能障礙者，4例術(shù)前FRANKELB級(jí)患者術(shù)后神經(jīng)功能改善為C級(jí)；5例術(shù)前FRANKELC級(jí)患者術(shù)后改善為D級(jí)；13例術(shù)前FRANKE1D級(jí)患者術(shù)后完全恢復(fù)。術(shù)中未出現(xiàn)脊髓、神經(jīng)、血管、硬膜損傷等并發(fā)癥，術(shù)后并發(fā)癥有手術(shù)入路側(cè)胸腔積液1例，經(jīng)保守治療后治愈。結(jié)論一期前路病灶清除同種異體髂骨植骨融合內(nèi)固定治療胸腰椎結(jié)核可有效清除病灶，矯正后凸畸形，重建脊柱的穩(wěn)定性，改善神經(jīng)功能，臨床效果良好。