簡(jiǎn)介：背景創(chuàng)傷、腫瘤、手術(shù)以及骨折不愈合等原因常常造成骨質(zhì)的缺失，成骨細(xì)胞難以爬過(guò)間隙而不能發(fā)生正常的愈合過(guò)程，最后形成骨不連。人體自身的自體骨具有良好的骨誘導(dǎo)作用，然而受到同種骨和異種骨來(lái)源供應(yīng)的限制。同種異體骨存在傳播疾病的危險(xiǎn)和發(fā)生免疫排斥反應(yīng)的可能，臨床應(yīng)用受到一定的限制。使用聚甲基丙烯酸甲酯POLYMETHYLMETHACRYLATE，PMMA骨水泥通過(guò)增強(qiáng)內(nèi)固定物周圍的松質(zhì)骨達(dá)到強(qiáng)化內(nèi)固定的目的。但是，由于PMMA固化時(shí)放熱，不能被機(jī)體吸收和重塑，阻礙骨折愈合，這些缺點(diǎn)，大大限制了其臨床應(yīng)用的范圍。近年來(lái)，以磷酸鈣為代表的無(wú)機(jī)人工骨替代材料的研發(fā)得到很大發(fā)展。華東理工大學(xué)劉昌勝教授及其合作者在上海市科委重點(diǎn)項(xiàng)目98JC14015資助下，研制成功了可吸收的新型無(wú)機(jī)骨水泥即磷酸鎂骨水泥MAGNESIUMPHOSPHATECEMENT，MPC。通過(guò)成果鑒定滬科鑒02G00182研究水平達(dá)到國(guó)際先進(jìn)，并已獲得專利。專利授權(quán)號(hào)為ZL011053739；PTC國(guó)際專利PTCCN0100282。在市科委的資助下2003年9月至2006年9月，面上項(xiàng)目，編號(hào)為034119904，經(jīng)初步研究顯示MPC粘結(jié)強(qiáng)度明顯大于傳統(tǒng)的磷酸鈣骨水泥，可以對(duì)細(xì)小非負(fù)重區(qū)域的骨折片能直接進(jìn)行粘合；材料同周圍骨質(zhì)緊密結(jié)合，界面處未出現(xiàn)明顯的炎性細(xì)胞聚集和纖維膜，未引起異物反應(yīng)，無(wú)內(nèi)臟毒性，經(jīng)過(guò)初步實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果是滿意的。體內(nèi)植入材料后，該材料及其代謝產(chǎn)物是否對(duì)周圍組織細(xì)胞產(chǎn)生影響，是否有遺傳毒性、致癌性和生殖毒性，特別是對(duì)成骨細(xì)胞的增殖和分化速度產(chǎn)生影響，以及是否對(duì)周圍組織的細(xì)胞產(chǎn)生致突變的作用也有待于進(jìn)一步研究。此外其在活體內(nèi)是否會(huì)激活細(xì)胞炎性因子，引發(fā)免疫反應(yīng)異常，目前還沒(méi)有確切數(shù)據(jù)，這也將是研究的一個(gè)內(nèi)容。目的磷酸鎂骨粘合劑自研發(fā)以來(lái)，經(jīng)初步研究顯示其粘結(jié)強(qiáng)度明顯大于傳統(tǒng)的磷酸鈣骨水泥，可以對(duì)細(xì)小非負(fù)重區(qū)域的骨折片能直接進(jìn)行粘合；材料同周圍骨質(zhì)緊密結(jié)合，界面處未出現(xiàn)明顯的炎性細(xì)胞聚集和纖維膜，未引起異物反應(yīng)，無(wú)內(nèi)臟毒性。所以MPC的生物學(xué)特性，經(jīng)過(guò)初步實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果是滿意的。但對(duì)于植入新材料，本課題將研究該材料及其代謝產(chǎn)物是否對(duì)周圍組織細(xì)胞產(chǎn)生影響，特別是對(duì)成骨細(xì)胞的增殖和分化速度產(chǎn)生影響，是否對(duì)周圍組織的細(xì)胞產(chǎn)生致突變的作用，在活體內(nèi)是否會(huì)激活細(xì)胞炎性因子，引發(fā)免疫反應(yīng)異常，符合生物安全性的要求，檢測(cè)其生物相容性是否良好。方法根據(jù)研究目的，本課題分成三個(gè)部分。1遺傳毒性試驗(yàn)1AMES試驗(yàn)將磷酸鎂骨粘合劑制備浸提液，采用鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)AMES試驗(yàn)，取以生理鹽水為陰性對(duì)照，取特定陽(yáng)性物為陽(yáng)性組，在添加大鼠肝臟微粒體酶S9的情況和不添加S9的情況下，測(cè)試各個(gè)組對(duì)各種鼠傷寒沙門菌TA100、TA102、TA97TA98的致突變比值MR。致突變比值MR實(shí)驗(yàn)組回變菌落數(shù)RT陰性對(duì)照組回變菌落數(shù)RC，將突變比值做統(tǒng)計(jì)分析，觀察MPC浸提液對(duì)菌株有無(wú)回復(fù)突變影響。2程序外DNA合成試驗(yàn)取人的外周全血，取不同濃度的MPC浸提液做試驗(yàn)，生理鹽水作為陰性對(duì)照組，硫酸鎳為特定陽(yáng)性組，RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi)加入羥基脲和3HTDR，共同培養(yǎng)后，震蕩，終止反應(yīng)后，收集細(xì)胞，洗滌、固定、脫水；加入閃爍液，計(jì)數(shù)儀上做放射性測(cè)量。測(cè)試結(jié)果用每分鐘放射計(jì)數(shù)CPM代表DNA合成。3微核試驗(yàn)取健康成熟昆明雄性小鼠分成三組，不同濃度的MPC浸提液作為試驗(yàn)組，生理鹽水為陰性對(duì)照組，環(huán)磷酰胺為陽(yáng)性組，在小鼠腹腔內(nèi)定期注射，間隔24小時(shí)，分四次給藥法。提取骨髓腔內(nèi)嗜多染紅細(xì)胞PCG，涂片、固定、染色、顯微鏡下計(jì)數(shù)微核、計(jì)算出現(xiàn)微核的百分比。2體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)1四唑鹽比色試驗(yàn)簡(jiǎn)稱MTT試驗(yàn)。取第三代小鼠成骨細(xì)胞OB，制成細(xì)胞懸液，不同濃度的MPC浸提液為試驗(yàn)組，普通細(xì)胞培養(yǎng)液為正常對(duì)照組，觀察1天、3天、5天后終止，加入MTT和二甲基亞砜DMSO，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀于570NM處測(cè)定吸光度OD值，計(jì)算細(xì)胞相對(duì)增殖率RGR，并分級(jí)細(xì)胞毒性。2堿性磷酸酶ALP測(cè)定試驗(yàn)取第三代小鼠成骨細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，不同濃度的MPC浸提液為試驗(yàn)組，酚標(biāo)準(zhǔn)液作為標(biāo)準(zhǔn)組，雙蒸水作為空白組，普通的10％DMEM細(xì)胞培養(yǎng)液作為陰性對(duì)照組。培養(yǎng)觀察1、3、5天后終止，用堿性磷酸酶試劑盒檢測(cè)后，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在510NM波長(zhǎng)下測(cè)定光吸收值，計(jì)算酚含量。3細(xì)胞炎性因子表達(dá)測(cè)試試驗(yàn)取第三代小鼠成骨細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，將不同濃度的MPC浸提液作為試驗(yàn)組，細(xì)胞培養(yǎng)液作為陰性對(duì)照，用IL1Β、IL6、TNFΑ抗原抗體試劑盒做雙抗體夾心法測(cè)定，觀察1、3、5天后終止，底物液顯色，酶標(biāo)儀450NM處讀數(shù)，繪制曲線圖分析。結(jié)果1在AMES試驗(yàn)中，TA100、TA102、TA97、TA98菌株陽(yáng)性對(duì)照組回變菌落數(shù)均超過(guò)陰性對(duì)照組2倍以上MR2；MPC浸提液不同濃度劑量組對(duì)菌落平均數(shù)與陰性對(duì)照組的比值均小于2MR2UDS試驗(yàn)中，不同濃度的MPC浸出液的每分鐘放射計(jì)數(shù)CPM值有濃度依賴性，隨著浸出液的濃度增加，CPM值也逐步增加；不同濃度MPC浸提液的CPM值均遠(yuǎn)低于陽(yáng)性對(duì)照組不同濃度NISO4的CMP值；3微核試驗(yàn)中，環(huán)磷酰胺陽(yáng)性對(duì)照組微核率比陰性組高10多倍，與MPC浸提液組的微核數(shù)值也相差10倍多；不同濃度的MPC微核率，與陰性對(duì)照組無(wú)顯著差異不同濃度的微核率不與濃度梯度相應(yīng)，與生理鹽水陰性組接近，不會(huì)引起嗜多染紅細(xì)胞的微核率增加；4MTT試驗(yàn)中，MPC試驗(yàn)組小鼠成骨細(xì)胞相對(duì)增殖率RGR在1、3、5天時(shí)分別為8737％～11513％、9896％～11896％和8846％～10892％；細(xì)胞毒性分級(jí)均為0或1級(jí)；不同濃度的MPC浸出液對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)明顯影響；5ALP檢測(cè)試驗(yàn)，隨著浸提液濃度的提高，ALP值有所下降；不同濃度的MPC浸提液的ALP值與陰性對(duì)照組相比，統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)明顯差異性，不會(huì)影響成骨細(xì)胞正常生長(zhǎng)。6細(xì)胞炎性因子表達(dá)測(cè)定試驗(yàn)，隨著浸提液濃度的提高，炎性因子的表達(dá)沒(méi)有顯著增加；不同濃度的MPC浸提液與陰性對(duì)照組相比，統(tǒng)計(jì)學(xué)上無(wú)明顯差異性，分子水平不會(huì)促進(jìn)炎性因子的表達(dá)。結(jié)論1磷酸鎂骨粘合劑不會(huì)引起鼠傷寒沙門菌的回復(fù)突變數(shù)增加，不會(huì)引起基因改變；2磷酸鎂骨粘合劑浸出液對(duì)DNA無(wú)損傷作用；3磷酸鎂骨粘合劑對(duì)動(dòng)物骨髓紅細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生微核突變效應(yīng)，對(duì)動(dòng)物體內(nèi)短期內(nèi)無(wú)致突變作用；4磷酸鎂骨粘合劑對(duì)成骨細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)明顯影響，對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性，有良好的細(xì)胞相容性；5磷酸鎂骨水泥在細(xì)胞分子水平不會(huì)促進(jìn)炎性因子的表達(dá)，不會(huì)誘發(fā)炎性反應(yīng)。

簡(jiǎn)介：目的提取大鼠牙髓干細(xì)胞DENTALPULPSTEMCELLSDPSCS與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLSBMSCS傳代培養(yǎng)觀察二者形態(tài)學(xué)以及其生長(zhǎng)差異。免疫熒光染色觀察大鼠牙髓干細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)。通過(guò)礦化誘導(dǎo)觀察大鼠牙髓干細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨樣細(xì)胞分化能力并通過(guò)免疫熒光對(duì)其進(jìn)行表面成骨標(biāo)志物檢測(cè)觀察其鈣化結(jié)節(jié)形成能力對(duì)比討論大鼠牙髓干細(xì)胞的成骨樣細(xì)胞分化能力與特點(diǎn)。方法通過(guò)離心法獲得大鼠骨髓細(xì)胞全骨髓體外貼壁培養(yǎng)擴(kuò)增并通過(guò)倒置顯微鏡觀察其形態(tài)；通過(guò)酶消化法處理大鼠牙髓組織獲得牙髓干細(xì)胞體外培養(yǎng)擴(kuò)增通過(guò)倒置顯微鏡觀察形態(tài)。通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)所獲得細(xì)胞表面CD45CD90分子表達(dá)；通過(guò)免疫熒光染色檢測(cè)細(xì)胞表面STRO1表達(dá)；MTT法分別測(cè)得大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與牙髓干細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線對(duì)照分析比較二者在生長(zhǎng)擴(kuò)增上的差異分別對(duì)大鼠牙髓干細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)2周后對(duì)其進(jìn)行骨鈣素OCN牙本質(zhì)泌涎蛋白DSP免疫熒光染色；繼續(xù)培養(yǎng)四周對(duì)經(jīng)誘導(dǎo)的大鼠牙髓干細(xì)胞進(jìn)行茜素紅染色觀察鈣結(jié)節(jié)形成情況。結(jié)果通過(guò)離心法獲得的大鼠骨髓細(xì)胞經(jīng)過(guò)貼壁培養(yǎng)換液逐漸將造血系細(xì)胞清除得到相對(duì)純度較高的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)；通過(guò)酶消化法獲得的大鼠牙髓干細(xì)胞第二天可完全貼壁生長(zhǎng)；所獲得的細(xì)胞經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)CD45表達(dá)陰性CD90表達(dá)陽(yáng)性符合間充質(zhì)干細(xì)胞特性；免疫熒光染色STRO1表達(dá)陽(yáng)性符合干細(xì)胞表達(dá)特性；MTT法繪制生長(zhǎng)曲線可見(jiàn)大鼠牙髓干細(xì)胞與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞第4天左右進(jìn)入生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期牙髓干細(xì)胞生長(zhǎng)增殖速度快于骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；經(jīng)過(guò)礦化誘導(dǎo)2周后骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與牙髓細(xì)胞表達(dá)成骨細(xì)胞表面標(biāo)志物OCN陽(yáng)性牙髓干細(xì)胞表達(dá)牙本質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物DSP陽(yáng)性；經(jīng)4周礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)大鼠牙髓干細(xì)胞茜素紅染色證實(shí)有礦化結(jié)節(jié)生成。結(jié)論通過(guò)離心獲得的骨髓細(xì)胞經(jīng)全骨髓貼壁培養(yǎng)可隨著貼壁換液的進(jìn)行逐漸將造血系細(xì)胞清除獲得純度較高的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞其表面標(biāo)志物檢測(cè)證實(shí)純度可達(dá)80％以上；酶消化法獲得的大鼠牙髓干細(xì)胞表面標(biāo)志物表達(dá)符合間充質(zhì)干細(xì)胞特點(diǎn)且生長(zhǎng)擴(kuò)增能力強(qiáng)；通過(guò)礦化誘導(dǎo)培養(yǎng)牙髓干細(xì)胞可向成骨樣細(xì)胞分化能力與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞相當(dāng)并可形成礦化結(jié)節(jié)。牙髓干細(xì)胞具有較強(qiáng)的增殖能力并具有成骨樣細(xì)胞分化能力可以作為干細(xì)胞治療骨組織缺損修復(fù)的理想種子細(xì)胞。

簡(jiǎn)介：目的探討全膝關(guān)節(jié)置換術(shù)（TKA）術(shù)前髕骨高度的測(cè)量與術(shù)前及術(shù)后膝關(guān)節(jié)屈曲度的關(guān)系。方法本研究對(duì)2009年1月2009年10月58例（100膝）在新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院關(guān)節(jié)外科住院，對(duì)用支持高屈曲假體行全膝關(guān)節(jié)置換的病人進(jìn)行隨訪，記錄所有患者術(shù)前膝關(guān)節(jié)的屈曲度，并在術(shù)后12周進(jìn)行隨訪，收集并記錄隨訪時(shí)術(shù)后膝關(guān)節(jié)的屈曲度。對(duì)所有患者術(shù)前患膝的X線進(jìn)行測(cè)量，測(cè)得相應(yīng)的髕骨長(zhǎng)軸長(zhǎng)度和髕腱長(zhǎng)度，來(lái)計(jì)算出INSALLSALVATI指數(shù)，并將INSALLSALVATI指數(shù)分為兩組0812為一組，〉12為第二組。將兩組測(cè)得的INSALLSALVATI指數(shù)與患膝術(shù)前及術(shù)后的屈曲度進(jìn)行相關(guān)性研究。結(jié)果所有骨性關(guān)節(jié)炎的患者術(shù)前的INSALLSALVATI指數(shù)均未〈08；；PEARSON相關(guān)分析顯示INSALLSALVATI指數(shù)在0812范圍內(nèi)與膝關(guān)節(jié)屈曲度呈正相關(guān)，INSALLSALVATI指數(shù)〉12與膝關(guān)節(jié)屈曲度呈負(fù)相關(guān)，術(shù)前INSALLSALVATI指數(shù)與術(shù)后膝關(guān)節(jié)增加的屈曲度數(shù)呈正相關(guān)。結(jié)論在TKA術(shù)前行膝關(guān)節(jié)側(cè)位片時(shí)常規(guī)進(jìn)行髕骨指數(shù)的測(cè)量與計(jì)算，相應(yīng)的計(jì)算結(jié)果可用來(lái)作為骨性關(guān)節(jié)炎的診斷依據(jù)；評(píng)價(jià)骨性關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度的指標(biāo)；以及作為全膝關(guān)節(jié)置換手術(shù)中股骨后髁截骨量的多少、軟組織的松解程度及墊片厚度的參考。

簡(jiǎn)介：目的腎移植是治療終末期腎病患者的有效方法。急、慢性排斥反應(yīng)或藥物引起的腎毒性是腎移植術(shù)后常見(jiàn)的并發(fā)癥。因此及時(shí)準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)移植腎功能具有十分重要的意義，只有預(yù)先了解腎功能的變化才能通過(guò)調(diào)節(jié)免疫抑制劑的用藥來(lái)避免移植器官衰竭。腎小球?yàn)V過(guò)率（GLOMERULARFILTRATIONRATE，GFR）是評(píng)價(jià)腎功能的重要指標(biāo)。目前臨床上常規(guī)采用CCR、SCR、BUN等作為評(píng)估GFR的參數(shù)，但一些腎性和非腎性的因素可干擾這些結(jié)果，且由于腎臟有強(qiáng)大的儲(chǔ)備能力和代償能力，當(dāng)腎小球?yàn)V過(guò)功能下降到正常13時(shí)，仍有很多參數(shù)可在正常范圍1，因而在臨床上用以上檢測(cè)項(xiàng)目評(píng)價(jià)GFR存在盲點(diǎn)。CYSTATINC全稱半胱氨酸蛋白酶抑制劑C，可自由通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)，不被腎小管重吸收和分泌，其濃度不受性別、年齡、炎癥反應(yīng)、腫瘤、肌肉活動(dòng)、飲食攝入等因素影響，因而可作為一項(xiàng)理想地反映腎小球?yàn)V過(guò)功能的指標(biāo)19。本研究通過(guò)對(duì)血清CYSTATINC及其相關(guān)GFR評(píng)估公式對(duì)移植腎小球?yàn)V過(guò)功能的研究，為臨床腎移植術(shù)后提供一個(gè)簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、敏感的反映GFR的指標(biāo)。方法研究對(duì)象分為正常人群組和腎移植組。正常人群組選取健康查體者36人，其中男性18例，女性18例，平均年齡339±90歲，測(cè)定CYSTATINC濃度，記錄每例年齡、性別、身高、體重等。腎移植組選取2008年10月～2009年9月期間在濟(jì)南軍區(qū)總醫(yī)院泌尿外科接受初次尸腎移植術(shù)后一個(gè)月的患者，其中男性19例、女性17例，移植腎功能狀態(tài)穩(wěn)定。平均年齡427±16歲；以雙血漿法測(cè)定99MTC二乙三胺五醋酸（99MTEDTPA）漿清除率（MLMIN173㎡）作為診斷評(píng)價(jià)GFR的金標(biāo)準(zhǔn)。測(cè)定每例的CYSTATINC濃度，同時(shí)測(cè)定血清肌酐濃度，CYSTATINC的檢測(cè)方法為乳膠顆粒增強(qiáng)免疫透射比濁法（PARTICLEENHANCEDTURBIDIMETRICIMMUNOASSAY，PETIA）法，試劑盒購(gòu)自上海德波生物技術(shù)公司；肌酐濃度的測(cè)定方法為堿性苦味酸法，以上指標(biāo)均由我院檢驗(yàn)科BECKMANLX20全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定。通過(guò)正常人群組測(cè)定CYSTATINC參考值范圍；比較腎移植組與正常人群組CYSTATINC的均數(shù)是否有差異。比較腎移植組CYSTATINC、SCR與RGFR的相關(guān)性，并將所測(cè)數(shù)據(jù)應(yīng)用HOEK公式、FILLER公式、瑞金方程與99MTCDTFA清除率（RGFR）比較，觀察3種GFR評(píng)估公式與99MTCDTPA清除率（RGFR）的相關(guān)性，觀察3種GFR評(píng)估公式的偏離度、精確度和準(zhǔn)確性。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（（）±S）表示，兩組間比較用T檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用直線回歸，SPSS散點(diǎn)圖分析3種EGFR方程的偏離度、精確度和準(zhǔn)確性，P結(jié)果1正常人群組的CYSTATINC參考值范圍036～130MGL。腎移植組的CVSTATINC參考值范圍062～266MGL。兩者均數(shù)行T檢驗(yàn)，P2腎移植組病人的CYSTATINC與99MTCDTPA清除率的相關(guān)程度最密切，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P腎移植組病人CYSTATINC、SCR與99MTCDTPA清除率相關(guān)系數(shù)分別為R0885（P31相關(guān)性HOEK公式與99MTCDTPA清除率相關(guān)程度最密切HOEK公式、FILLER公式、瑞金方程與99MTCDTPA清除率均有較好的相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)分別為R0835（P32偏離度HOEK公式偏離度小于FILLER公式、瑞金方程。結(jié)果分別為HOEK公式偏離度1424任意單位，F(xiàn)ILLER公式偏離度1798任意單位，瑞金方程偏離度1495任意單位。33精確度HOEK公式精確度優(yōu)于FILLER公式、瑞金方程。結(jié)果分別為HOEK公式精確度279MLMIN173㎡，F(xiàn)ILLER公式精確度313MLMIN173㎡瑞金方程精確度312MLMIN173㎡。34準(zhǔn)確性99MTCDTPA清除率±10％、±30％的準(zhǔn)確性HOEK公式（472％，922％）優(yōu)于FILLER公式公式（306％，722％）、瑞金方程（250％，750％）。結(jié)論1CYSTATINC是一項(xiàng)良好的評(píng)價(jià)腎功能指標(biāo)。腎移植術(shù)后一個(gè)月的CYSTATINC濃度高于正常范圍2以CYSTATINC為基礎(chǔ)的HOEK公式的偏離度、精確度、準(zhǔn)確性均優(yōu)于以SCR為基礎(chǔ)瑞金方程和CYSTATINC基礎(chǔ)FILLER評(píng)估公式，能夠更好的反映腎小球?yàn)V過(guò)功能。3使用腎小球?yàn)V過(guò)率評(píng)估方程，對(duì)預(yù)測(cè)移植腎功能是一種簡(jiǎn)單、實(shí)用、經(jīng)濟(jì)有效的方法，便于臨床推廣應(yīng)用。

簡(jiǎn)介：背景關(guān)節(jié)軟骨損傷在臨床中極為普遍常見(jiàn)的原因?yàn)殛P(guān)節(jié)創(chuàng)傷、退行性變兩類既往研究主要集中于退行性軟骨損傷及隨后發(fā)生的軟骨下骨的修復(fù)機(jī)制而對(duì)于急性損傷后軟骨下骨的組織、形態(tài)研究甚是少見(jiàn)本研究旨在觀察關(guān)節(jié)軟骨急性損傷后軟骨下骨的早期變化探討其可能的發(fā)生機(jī)制為治療軟骨損傷提供依據(jù)。目的探討軟骨急性損傷后軟骨下骨的早期組織形態(tài)學(xué)、分子生物、生物力學(xué)的變化。材料和方法1健康成年新西蘭兔24只隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組建立股骨頭軟骨缺損模型2分別收集術(shù)后即刻、4天、7天、14天標(biāo)本大體觀察造模后的軟骨形態(tài)變化免疫印跡測(cè)定軟骨缺損區(qū)周圍軟骨蛋白聚糖、番紅固綠染色觀察軟骨下骨微觀形態(tài)變化、免疫組化法測(cè)定骨轉(zhuǎn)換標(biāo)志物OPGRANKL的表達(dá)3MICROCT掃描分析軟骨下骨超微結(jié)構(gòu)改變、力學(xué)檢測(cè)法評(píng)估軟骨下骨機(jī)械強(qiáng)度變化。結(jié)果可見(jiàn)股骨頭缺損模型于術(shù)后7天出現(xiàn)軟骨缺損面積明顯擴(kuò)大深度增加缺損區(qū)周圍軟骨蛋白聚糖含量明顯降低呈退變表現(xiàn)利用染色法觀測(cè)進(jìn)一步證實(shí)了7天起軟骨下骨骨小梁吸收連續(xù)性中斷。利用免疫組化及免疫熒光發(fā)現(xiàn)術(shù)后714天軟骨下骨中OPG表達(dá)明顯減少RANKL表達(dá)量顯著增加OPGRANKL比值降低提示骨轉(zhuǎn)換減弱甚至逆轉(zhuǎn)。采用MICROCT分析發(fā)現(xiàn)術(shù)后7天及術(shù)后14天軟骨下骨的骨小梁數(shù)量減少骨小梁厚度及間距增大。抗壓力學(xué)試驗(yàn)分析抗壓強(qiáng)度和彈性模量未見(jiàn)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論軟骨損傷后軟骨下骨可在早期7天后即發(fā)生顯著組織形態(tài)變化和骨轉(zhuǎn)換能力的下調(diào)從而導(dǎo)致軟骨進(jìn)一步破壞術(shù)后2周內(nèi)未見(jiàn)軟骨下骨從在明顯力學(xué)改變基于此的修復(fù)手段可為軟骨損傷修復(fù)提供治療靶點(diǎn)。

簡(jiǎn)介：目的采用高脂飼料結(jié)合小劑量STZ一次性腹腔注射誘導(dǎo)正常的SD大鼠發(fā)生2型糖尿病T2DM，制造一種符合人類T2DM發(fā)病特點(diǎn)的動(dòng)物模型，用放射免疫法檢測(cè)各組大鼠BGP水平、免疫組化方法檢測(cè)大鼠胰腺BGP的含量，同時(shí)檢測(cè)各組大鼠血糖、血脂、胰島素，并用二甲雙胍干預(yù)，綜合分析二甲雙胍干預(yù)下BGP水平與糖脂代謝的關(guān)系，探討B(tài)PG對(duì)胰島B細(xì)胞增殖、胰島素分泌、胰島素敏感性、脂代謝的影響，為T2DM臨床的防治提出更新、更可靠的理論依據(jù)。方法適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，將36只重約180230G大鼠按隨機(jī)分為3組，每組12只，分別為正常對(duì)照組A組，T2DM大鼠非干預(yù)組B組，T2DM大鼠二甲雙胍干預(yù)組C組，B、C組用高脂飼料喂養(yǎng)。第8周末，3組大鼠禁食不禁水12H，然后B、C組大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素25MGKG，A組注射檸檬酸檸檬酸鈉緩沖液作對(duì)照。第10周末行OGTT篩選成模大鼠。OGTT篩選成模大鼠后，C組給于二甲雙胍100MGKG1D1灌胃4周，A、B組給于相同體積的蒸餾水灌胃。在實(shí)驗(yàn)第4、8、10、14周末分別取大鼠血清，酶法檢測(cè)甘油三脂TG、總膽固醇TC和高密度脂蛋白膽固醇HDLC、葡萄糖氧化法檢測(cè)空腹血糖FPG，放射免疫法檢測(cè)骨鈣素BGP和空腹胰島素FINS。第14周末處死所有大鼠，取出胰腺和內(nèi)臟脂肪組織，用電子天平稱量?jī)?nèi)臟脂肪并計(jì)算體脂比；胰腺組織用HE染色并在光鏡下觀察病理改變，用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)胰腺組織BGP的情況。結(jié)果1B、C組大鼠腹腔注射STZ3天后，即出現(xiàn)多尿、多飲、多食等癥狀，OGTT結(jié)果顯示B、C各時(shí)點(diǎn)血糖水平均高于A組，達(dá)到糖尿病成模標(biāo)準(zhǔn)，而A組各時(shí)點(diǎn)未達(dá)到成模標(biāo)準(zhǔn)。2第4周末B、C組經(jīng)高脂喂養(yǎng)后體重增長(zhǎng)，顯著高于A組，第8周末體重增長(zhǎng)最為顯著，出現(xiàn)明顯的腹型肥胖。第8周注射STZ后B、C組大鼠均先出現(xiàn)體重大幅度下降，然后緩慢有所回升，但至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)其體重均小于A組。第4周末TG出現(xiàn)升高P3第4周末，高脂喂養(yǎng)的B、C兩組與A組相比，血清BGP均有輕度升高，但差異無(wú)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。第8周末，B、C兩組血清BGP與A組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P005。第10周末，B、C組血清BGP與A組相比，BGP均顯著性下降P005。4大鼠胰腺HE染色結(jié)果。B組胰島變小，分布較彌散，部分胰島排列不規(guī)則，結(jié)構(gòu)不清，形狀不規(guī)則，胰島細(xì)胞數(shù)量減少，部分細(xì)胞可見(jiàn)細(xì)胞核固縮。C組胰島大小不一，形狀偶可見(jiàn)不規(guī)則，界限稍模糊，胰島細(xì)胞數(shù)量介于A、B之間。5第14周各組大鼠胰腺細(xì)胞BGP含量均有差異P6免疫組織化學(xué)染色結(jié)果BGP與胰島細(xì)胞核特異性抗體結(jié)合后呈棕黃色顆粒。胰腺的外分泌部管腔中亦可見(jiàn)淡棕黃色的顆粒。A組低倍鏡下胰島細(xì)胞豐富，多為圓形或橢圓形，大小不一，形態(tài)完整，棕黃色顆粒含量豐富。高倍鏡下細(xì)胞界限清晰，呈免疫反應(yīng)陽(yáng)性的棕黃色胰島素顆粒均勻分布在細(xì)胞核內(nèi)，顆粒含量豐富，胞核居中，著色深。B組低倍鏡下胰島細(xì)胞少見(jiàn)，形態(tài)不規(guī)則，邊緣不整齊，棕黃色顆粒含量少；高倍鏡下細(xì)胞界限不清晰，胞核呈偏心分布，棕黃色顆粒含量少，著色淺。C組低倍鏡下胰島形態(tài)基本正常，邊緣尚完整，棕黃色顆粒含量介于A、B組之間；高倍鏡下細(xì)胞界限基本清晰，部分胞核呈偏心分布，著色程度介于A、B組之間。7PEARSON直線相關(guān)分析顯示，血清BGP水平和胰腺BGP含量與FPG、TG、TC呈負(fù)相關(guān)P結(jié)論1實(shí)驗(yàn)SD大鼠經(jīng)高脂飼料喂養(yǎng)8周后，雖然FPG正常，但I(xiàn)SI下降，提示存在胰島素抵抗，注射小劑量STZ，損傷部分胰腺，成功誘發(fā)T2DM模型。2T2DM大鼠血清BGP與胰腺BGP含量顯著低于對(duì)照組，與FINS、HDLC成正相關(guān)，并與FPG、TG、TC成負(fù)相關(guān)。表明BGP參與糖脂代謝過(guò)程，與T2DM發(fā)病有關(guān)。3骨骼分泌的BGP在胰島細(xì)胞中呈陽(yáng)性，以Β細(xì)胞更為顯著，提示其有促進(jìn)胰島Β細(xì)胞增殖，分泌胰島素的作用。4二甲雙胍治療后血清BGP水平和胰腺BGP含量均提高，提示其可能具有促進(jìn)BGP分泌的作用，但機(jī)理有待證實(shí)。

簡(jiǎn)介：目的觀察健骨方對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎模型兔的關(guān)節(jié)軟骨形態(tài)學(xué)與組織學(xué)改變、軟骨細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶1MMP1、基質(zhì)金屬蛋白酶3MMP3、特異性組織基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子TIMP1、白細(xì)胞介素1ΒIL1Β的作用及對(duì)軟骨細(xì)胞凋亡指數(shù)AI與增殖指數(shù)PI的不同影響健骨方治療膝骨關(guān)節(jié)炎的臨床療效觀察為探討中藥療效的作用機(jī)制及臨床用藥提供依據(jù)。方法實(shí)驗(yàn)研究將35只新西蘭兔隨機(jī)分7組正常對(duì)照組模型對(duì)照組補(bǔ)腎組活血化瘀組清熱利濕組祛風(fēng)勝濕組補(bǔ)腎活血解毒組前兩組給予生理鹽水后五組分別給予左歸丸失笑散四妙散豨桐丸健骨方。飼養(yǎng)8周后大體觀察關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)一般表現(xiàn)光鏡下觀察形態(tài)學(xué)變化并檢測(cè)軟骨、滑膜中MMP1、MMP3、TIMP1、IL1Β的表達(dá)陽(yáng)性情況MMP3、TIMP1平均灰度的檢測(cè)軟骨細(xì)胞的凋亡指數(shù)和增殖指數(shù)。臨床觀察將60例膝骨關(guān)節(jié)炎患者隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組試驗(yàn)組30例服用健骨方對(duì)照組30例服用硫酸氨基葡萄糖兩組療程均為6個(gè)月。結(jié)果實(shí)驗(yàn)研究光鏡下觀察形態(tài)學(xué)變化據(jù)MANKIN’S評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)光鏡下關(guān)節(jié)軟骨及滑膜的退變程度評(píng)分模型對(duì)照組評(píng)分明顯高于正常對(duì)照組P＜005表明建模成功健骨方組、失笑散組、豨桐丸組、四妙散組、左歸丸組評(píng)分分別與模型對(duì)照組比較均有降低P＜005表明以上各組可以通過(guò)降低評(píng)分來(lái)改善軟骨病變健骨方組評(píng)分分別與其他各中藥組比較均有降低P＜005表明健骨方組在降低評(píng)分改善軟骨病變方面優(yōu)于其他各中藥組。光鏡下觀察組織學(xué)變化左歸丸組失笑散組四妙散組豨桐丸組、健骨方組中關(guān)節(jié)軟骨、滑膜中MMP1、MMP3、IL1Β陽(yáng)性表達(dá)較模型對(duì)照組均降低健骨方組降低較為明顯左歸丸組失笑散組四妙散組豨桐丸組、健骨方組中關(guān)節(jié)軟骨、滑膜中TIMP1陽(yáng)性表達(dá)較模型對(duì)照組均有升高健骨方組升高較為明顯。軟骨、滑膜中MMP3平均灰度方面模型對(duì)照組與正常對(duì)照組比較均數(shù)增高P＜005表明建模成功健骨方組、左歸丸組、四妙散組、失笑散組、豨桐丸組分別與模型對(duì)照組比較均數(shù)降低P＜005表明以上各組可以通過(guò)降低軟骨細(xì)胞中MMP3平均灰度來(lái)改善軟骨病變健骨方組分別與其他各中藥組比較均數(shù)降低P＜005表明健骨方組在降低軟骨細(xì)胞中MMP3平均灰度方面優(yōu)于其他各中藥組。軟骨、滑膜中TIMP1平均灰度方面模型對(duì)照組與正常對(duì)照組比較均數(shù)增高P＜005表明建模成功健骨方組、左歸丸組、四妙散組、失笑散組、豨桐丸組與模型對(duì)照組比較均數(shù)增高P＜005表明以上各組可以通過(guò)增高軟骨細(xì)胞中TIMP1而改善軟骨病變健骨方組與其他各中藥組比較均數(shù)增高P＜005說(shuō)明健骨方組在增高軟骨細(xì)胞中TIMP1平均灰度方面優(yōu)于其他各中藥組。軟骨細(xì)胞的增殖指數(shù)方面模型對(duì)照組與正常對(duì)照組比較均數(shù)降低P＜005表明建模成功健骨方組與模型對(duì)照組比較均數(shù)增高P＜005表明健骨方可以通過(guò)刺激軟骨細(xì)胞的增值而改善軟骨病變其他各中藥組分別與模型對(duì)照組比較均數(shù)增高但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞005。軟骨細(xì)胞的凋亡指數(shù)方面模型對(duì)照組與正常對(duì)照組比較均數(shù)增高P＜005表明建模成功健骨方組、失笑散組、豨桐丸組與模型對(duì)照組比較均數(shù)均有降低P＜005表明以上各組可以降低軟骨細(xì)胞凋亡指數(shù)來(lái)改善軟骨病變四妙散組、左歸丸組與模型對(duì)照組比較均數(shù)降低但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞005健骨方組分別與其他各中藥組比較均數(shù)降低P＜005表明健骨方組在降低軟骨細(xì)胞凋亡指數(shù)方面明顯優(yōu)于其他各中藥組。臨床觀察治療后中醫(yī)癥候積分和病情輕重方面試驗(yàn)組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005說(shuō)明試驗(yàn)組在改善中醫(yī)癥候和病情輕重方面優(yōu)于對(duì)照組降低C反應(yīng)蛋白CRP方面兩組組內(nèi)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＞005說(shuō)明在降低CRP方面兩組療效現(xiàn)當(dāng)。結(jié)論實(shí)驗(yàn)研究顯示健骨方能改善軟骨及滑膜的退變程度計(jì)分有效的降低關(guān)節(jié)軟骨MMP1、MMP3、TIMP1、IL1Β陽(yáng)性表達(dá)和MMP3平均灰度降低軟骨細(xì)胞的凋亡指數(shù)升高軟骨細(xì)胞的增殖指數(shù)和TIMP1平均灰度來(lái)改善軟骨病變其具體作用機(jī)理有待于進(jìn)一步探討臨床觀察顯示健骨方治療膝骨關(guān)節(jié)炎患者療效肯定并可以有效降低CRP。

簡(jiǎn)介：貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院20LO屆碩士學(xué)位論文口7汐弓多午目錄目錄1摘要23前言4剛舌4研究方法58結(jié)果819討論2023參考文獻(xiàn)2425英文摘要2627致謝28論文獨(dú)創(chuàng)申明29綜述3040量墮墾堂墮旦堡圭蘭垡笙苧盟里三弓9‘OOO‘。。。。______________________________________________________________________●●●____●______●__●__●_●____________________________________●●_____●___________■_______川牙合L1MP與下頜前部唇、舌側(cè)牙槽傾斜程度成正相關(guān)，PO05，RO426。結(jié)論1骨性安氏Ⅲ類錯(cuò)牙舍下前牙區(qū)牙槽骨質(zhì)結(jié)構(gòu)左右對(duì)稱，牙槽基骨弓平滑、延續(xù)。舌側(cè)骨質(zhì)厚度大于唇側(cè)。牙根切2／3部分牙槽骨稀薄，根尖1／3部分骨質(zhì)漸厚。2骨性安氏IⅡ類錯(cuò)牙合畸形下切牙向唇側(cè)移動(dòng)的距離小于舌側(cè)，切牙牙根唇側(cè)頸1／3對(duì)應(yīng)牙槽骨區(qū)域容易發(fā)生邊緣骨喪失、齦裂、皮質(zhì)裂等醫(yī)源性損傷，而舌側(cè)牙根尖發(fā)生根吸收的可能性更大。3骨性安氏Ⅲ類錯(cuò)牙合中牙及牙槽均存在代償傾斜。牙齒傾斜方向與牙槽骨傾斜方向基本一致，傾斜程度成一定正相關(guān)。維持切牙與牙槽的相對(duì)位置關(guān)系可能是獲得正畸治療后穩(wěn)定的基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞骨性安氏砸類錯(cuò)霧舍T頜切牙牙槽骨CT

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多骨支架力學(xué)模型的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：研究背景電子與電器設(shè)備在日常生活中的廣泛應(yīng)用以及產(chǎn)品更新?lián)Q代速度的加快大量報(bào)廢的電子電器設(shè)備或稱為電子垃圾在世界范圍內(nèi)急劇增長(zhǎng)。在處理這些電子垃圾過(guò)程中所產(chǎn)生的種類繁多的有毒有害物質(zhì)如重金屬及其他化學(xué)物質(zhì)可能對(duì)環(huán)境和人類生活造成巨大的威脅。廣東貴嶼鎮(zhèn)是“世界電子垃圾終點(diǎn)站”之一有著二十多年的作坊式電子垃圾拆解歷史。長(zhǎng)期不當(dāng)?shù)碾娮永幚矸绞浇o當(dāng)?shù)氐沫h(huán)境造成了嚴(yán)重的污染我們以往的研究發(fā)現(xiàn)貴嶼地區(qū)兒童血鉛血鎘水平明顯高于周面地區(qū)及其它地區(qū)。鉛、鎘為己知的最易在體內(nèi)蓄積的毒物之一人體內(nèi)90％95的鉛儲(chǔ)存于骨內(nèi)鉛在骨中的半衰期很長(zhǎng)520年并可保持相對(duì)穩(wěn)定鎘在體內(nèi)的生物半衰期長(zhǎng)達(dá)1030年。無(wú)論是從毒性還是蓄積作用來(lái)看鉛鎘都是污染人類生存環(huán)境、威脅人類健康的主要的金屬元素。骨骼是鉛鎘的主要靶器官之一人群流行病學(xué)調(diào)查和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示兒童時(shí)期的鉛鎘能導(dǎo)致骨軟化及骨質(zhì)疏松。目的監(jiān)測(cè)電子垃圾拆解區(qū)兒童血鉛血鎘負(fù)荷水平及骨代謝相關(guān)指標(biāo)探討鉛鎘暴露對(duì)兒童生長(zhǎng)發(fā)育及骨代謝影響。材料與方法2009年11～12月調(diào)查貴嶼當(dāng)?shù)赜變簣@238名3～8歲兒童采集靜脈血及尿樣并進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查。用原子石墨爐吸收法檢測(cè)血鉛血鎘濃度ELISA試劑盒檢測(cè)骨代謝指標(biāo)血清骨鈣素骨堿性磷酸酶尿脫氧吡啶酚水平化學(xué)比色法檢測(cè)尿肌酐水平尿脫氧吡啶酚的水平經(jīng)肌酐校正自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清總鈣水平。SPEARMAN相關(guān)分析雙變量相關(guān)率的比較使用卡方檢驗(yàn)均值比較使用MANNWHITNEYUTEST或者TTEST。多元線性回歸模型探討暴露與調(diào)查變量之間的相關(guān)性。結(jié)果1體檢兒童血鉛平均水平730ΜGDL3302490ΜGDL超標(biāo)率10ΜGDL為164血鎘的平均水平069ΜGL025686ΜGL。血鎘水平隨年齡的增長(zhǎng)而提高。家庭周圍存在電子垃圾拆解是血鉛血鎘增高的危險(xiǎn)因素經(jīng)常補(bǔ)充鈣維生素D和乳制品為保護(hù)因素。2相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)血鉛與尿脫氧吡啶酚正相關(guān)血鈣水平與骨堿性磷酸酶水平和尿脫氧吡啶酚的水平正相關(guān)同時(shí)發(fā)現(xiàn)女童血鈣水高于男童四歲兒童血鈣尿脫氧吡啶酚值最高六歲兒童血鈣尿脫氧吡啶酚值最低。3單獨(dú)分析血鉛與骨代謝指標(biāo)之間相關(guān)性根據(jù)血鉛的四分位數(shù)將兒童分為四組結(jié)果顯示高鉛暴露組兒童尿脫氧吡啶酚值最高低鉛暴露組兒童尿脫氧吡啶酚值最低。4為進(jìn)一步分析暴露與各變量之間相關(guān)性在多元線性回歸模型中校正年齡和性別的因、素血鉛水平與兒童身高體重負(fù)相關(guān)與尿脫氧吡啶酚水平正相關(guān)。通過(guò)校正血鎘與兒童身高的關(guān)系消失了同時(shí)并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)血鎘與骨代謝指標(biāo)之間的相關(guān)性。結(jié)論2009年當(dāng)?shù)貎和U血鎘水平與以往相比已有較大幅度的下降本次研究發(fā)現(xiàn)兒童時(shí)期鉛暴露可以影響其體格生長(zhǎng)并提高兒童破骨細(xì)胞的活性可能導(dǎo)致成年的骨質(zhì)疏松此次研究并未發(fā)現(xiàn)鎘暴露對(duì)兒童身高和骨代謝的影響考慮到鎘在兒童體內(nèi)的累積效應(yīng)可能對(duì)成年后的健康造成威脅鉛鎘暴露對(duì)兒童健康威脅仍不容忽視。

簡(jiǎn)介：骨性骨關(guān)節(jié)炎（OA）是一種慢性關(guān)節(jié)疾病，屬祖國(guó)醫(yī)學(xué)“骨痹”等范疇，是目前臨床上中老年人常見(jiàn)病、多發(fā)病。中藥在防治本病有很大優(yōu)勢(shì)，但目前臨床上缺乏行之有效的中成藥，“壯骨活絡(luò)膠囊”由于乃博教授依據(jù)中醫(yī)學(xué)基本理論，采用經(jīng)驗(yàn)方配伍，并結(jié)合自己的二十余年臨床實(shí)踐，研制出簡(jiǎn)便易服，治療膝骨性關(guān)節(jié)炎的中成藥制劑，該藥具有補(bǔ)益肝腎、健脾化痰、祛瘀通絡(luò)之功效，適用于肝腎虧虛、痰瘀交阻型膝骨性關(guān)節(jié)炎。壯骨活絡(luò)膠囊臨床實(shí)驗(yàn)研究共完成60例（其中觀察組30例，對(duì)照組30例），臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，在改善單項(xiàng)癥狀、關(guān)節(jié)腫脹、關(guān)節(jié)疼痛、等方面，明顯優(yōu)于對(duì)照組。其臨床使用安全可靠，療效穩(wěn)定，無(wú)毒副作用，價(jià)格患者能接受的優(yōu)點(diǎn)。

簡(jiǎn)介：目的探討細(xì)胞因子誘導(dǎo)劑CYTOKINEINDUCER聚肌胞POLYINOSINIC有無(wú)抗鴨乙肝病毒DUCKHEPATITISBVIRUSDHBV作用及其機(jī)制。方法采用隨機(jī)引物法地高辛素ROMPRIMERSLABELLINGDIGOXIGENIN標(biāo)記DHBVDNA探針經(jīng)斑點(diǎn)雜交法DOTBLOTTING檢測(cè)重慶麻鴨血清篩選出陽(yáng)性血清并感染1日齡重慶麻鴨建立急性DHBV感染模型；隨機(jī)分為聚肌胞治療組、磷酸鹽緩沖液PHOSPHATEBUFFEREDSOLUTIONPBS對(duì)照組和DHBV陰性鴨對(duì)照組；聚肌胞或PBS腹腔注射20ΜGKG每日一次連續(xù)給藥3天；分別于用藥前、用藥3天分別頸外靜脈采血分離血清檢測(cè)DHBSAG、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶ASPARTATEAMINOTRANSFERASEAST、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶ALANINEAMINOTRANSFERASEALT、干擾素ΓINTERFERONINFΓ、腫瘤壞死因子ΑTUMNECROSISFACTTNFΑ等指標(biāo)；于用藥前、用藥3天分別抽取肝組織常規(guī)石蠟切片觀察肝組織病理變化、免疫組化觀察肝細(xì)胞DHBVS抗原表達(dá)情況。結(jié)果血清學(xué)觀測(cè)結(jié)果一、鴨肝功能聚肌胞治療3天后肝功能無(wú)明顯好轉(zhuǎn)。二、DHBSAG水平聚肌胞治療3天后DHBSAG0D值變化不明顯。三、細(xì)胞因子水平聚肌胞治療3天后細(xì)胞因子TNFΑ、INFΓ顯著增多。組織病理學(xué)觀測(cè)結(jié)果聚肌胞治療3天后鴨肝組織壞死情況無(wú)明顯好轉(zhuǎn)。免疫組化觀測(cè)結(jié)果聚肌胞治療3天后肝細(xì)胞中S抗原陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)無(wú)明顯減少。結(jié)論小劑量聚肌胞短療程即可誘導(dǎo)鴨血清細(xì)胞因子TNFΑ、INFΓ的顯著增加但未觀察到明顯的抗鴨乙肝病毒作用。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多補(bǔ)腎中藥血清對(duì)成骨細(xì)胞骨形成蛋白的UPP-Smad蛋白信號(hào)網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)機(jī)制研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的高血壓是危害人類健康的常見(jiàn)病，主要表現(xiàn)為小動(dòng)脈張力增加，不能對(duì)抗增高的血管緊張度及對(duì)血管活性物質(zhì)做出正常反應(yīng)。腸系膜動(dòng)脈作為人體主要的內(nèi)臟血管，在全身的動(dòng)脈中所占比例最大，是形成外周阻力的主要血管，對(duì)循環(huán)中的活性物質(zhì)敏感，對(duì)血壓的調(diào)節(jié)具有重要意義。大電導(dǎo)鈣激活鉀通道（LARGECONDUCTANCECALCIUMACTIVATEDPOTASSIUMCHANNELS，BKCA）是血管平滑肌上主要的負(fù)反饋調(diào)節(jié)器，在血管的舒張調(diào)節(jié)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。一氧化氮（NITRICOXIDE，NO）是體內(nèi)調(diào)節(jié)血管張力的重要?dú)怏w分子，通過(guò)激活BKCA發(fā)揮其調(diào)節(jié)作用。高血壓狀態(tài)下，BKCA介導(dǎo)的電流及BKCA對(duì)NO的敏感性是否有變化，其機(jī)制不完全清楚，深入討論這些問(wèn)題對(duì)揭示高血壓發(fā)生的病理生理機(jī)制有重要意義。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)運(yùn)用血管環(huán)和全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)觀察高血壓患者腸系膜動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞（VULARSMOOTHMUSCLECELLS，VSMCS）BKCA電流及BKCA對(duì)NO的敏感性變化，為探討高血壓的發(fā)生機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法（1）膜片鉗實(shí)驗(yàn)將分離好的腸系膜動(dòng)脈，縱向剖開(kāi)剪成2MM5MM的組織條塊，置于酶液中進(jìn)行兩步消化。選取具有較強(qiáng)立體感，表面光滑的平滑肌細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，采用全細(xì)胞穿孔膜片鉗技術(shù)記錄電流。電流信號(hào)經(jīng)膜片鉗放大器（AXOPATCH200B）放大，濾波處理后輸入計(jì)算機(jī)，經(jīng)CLAMPEX101軟件采集電流，CLAMPFIT101、MINIANALYSIS60軟件系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。觀察并比較高血壓組（HYPERTENSIONGROUP，HT）和血壓正常組（NMOTENSIONGROUP，NT）BKCA宏觀電流及自發(fā)瞬時(shí)外向電流（SPONTANEOUSTRANSIENTOUTWARDCURRENTS，STOCS）。（2）血管環(huán)實(shí)驗(yàn)迅速分離腸系膜動(dòng)脈置于溶液Ⅰ中，將游離血管剪成長(zhǎng)約03～04CM的血管環(huán)，用兩根銀絲穿過(guò)動(dòng)脈環(huán)并形成三角環(huán)狀，固定在含95O2和5CO2，37℃的浴槽中。血管環(huán)經(jīng)過(guò)張力換能器（TRI201）、生物放大器（ML135）與生理記錄儀（POWERLAB8SP）相連，采用T軟件采集數(shù)據(jù)并進(jìn)行分析。觀察NO對(duì)HT和NT腸系膜動(dòng)脈血管環(huán)張力的影響。實(shí)驗(yàn)采用硝普鈉（SODIUMNITROPRUSSIDE，SNP）作為NO的供體，KC1檢驗(yàn)血管環(huán)活性并引起一定收縮，乙酰膽堿（ACETYCHOLINE，ACH）驗(yàn)證血管環(huán)內(nèi)皮是否受損。結(jié)果（1）急性酶分離的腸系膜動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞BKC。電流的基本特性①BKCA宏觀電流具有明顯的電壓依賴性及外向整流的性質(zhì)；STOCS的幅度和頻率具有明顯的電壓依賴性，可以隨機(jī)性的疊加在全細(xì)胞BKCA電流上（N10）。②BKCA的特異性阻斷劑IBERIOTOXIN（IBTX）（100NM）可阻斷BKCA宏觀電流及STOCS（N5）（2）比較HT與NTBKCA宏觀電流及STOCS①HT（N10）與NT（N10）BKCA電流密度分別為106558±22337PAPF（60MV）、110727±24688PAPF（60MV），兩組間無(wú)明顯差異（P005）。②HT（N10）STOCS（20MV）幅值及頻率為279314±32642PA、15226±02839HZ，NT（N10）STOCS（20MV）幅值及頻率為612568±27463PA、22698±04652HZ，HTSTOCS幅值和頻率比NT低（P005）。②NO降低人腸系膜血管環(huán)張力，IBTX（100NM）可抑制NO引起的張力降低（N5）。⑨NO引起HT（N10）和NT（N10）血管舒張分別為1481±303，3197±586，HT舒張的程度比NT低（P005）。結(jié)論（1）急性酶分離的人腸系膜動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的BKCA宏觀電流有明顯的電壓依賴性和外向整流特征；由BKCA介導(dǎo)的STOCS幅度和頻率具有明顯的電壓依賴性及隨機(jī)性。（2）高血壓組的BKCA電流密度與血壓正常組相似，STOCS幅值、頻率比血壓正常組低。（3）BKCA參與了NO舒張人腸系膜血管的機(jī)制。（4）高血壓組血管對(duì)NO的反應(yīng)比血壓正常組低。

簡(jiǎn)介：目的運(yùn)用補(bǔ)腎增骨方對(duì)切除卵巢大鼠骨質(zhì)疏松癥模型進(jìn)行干預(yù)對(duì)血清雌二醇E2、降鈣素CT、胰島素樣生長(zhǎng)因子ⅠIGFⅠ以及骨密度BMD檢測(cè)采用免疫組織學(xué)技術(shù)檢測(cè)VEGF在骨質(zhì)疏松癥中的表達(dá)及其分布規(guī)律以探討該方對(duì)骨質(zhì)疏松癥的防治作用并從基因水平闡明補(bǔ)腎增骨方對(duì)去勢(shì)大鼠骨質(zhì)疏松模型骨重建中的調(diào)控作用及其機(jī)制。方法建立骨質(zhì)疏松模型模型評(píng)估證實(shí)造模成功后實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組模型組、陽(yáng)性藥物對(duì)照組、補(bǔ)腎增骨方組、每組各8只大鼠分別喂飼蒸餾水、尼爾雌醇水溶液、補(bǔ)腎增骨方水溶液、蒸餾水連續(xù)喂養(yǎng)56天。停止用藥3天后采集頸動(dòng)脈血進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查包括血清雌二醇E2、降鈣素CT、胰島素樣生長(zhǎng)因子ⅠIGFⅠ檢測(cè)。取材后行右側(cè)股骨的骨密度檢測(cè)采用免疫組織學(xué)技術(shù)檢測(cè)左側(cè)股骨上端的VEGF的表達(dá)。結(jié)果1補(bǔ)腎增骨方能顯著提高去勢(shì)大鼠骨密度BMD水平。2補(bǔ)腎增骨方能顯著提高去勢(shì)大鼠血清中雌二醇E2、降鈣素CT、胰島素樣生長(zhǎng)因子ⅠIGFⅠ水平。3補(bǔ)腎增骨方顯著促進(jìn)提高去勢(shì)大鼠VEGF骨中表達(dá)量。結(jié)論1補(bǔ)腎增骨方能顯著提高去勢(shì)大鼠骨密度BMD水平?？赡苁茄a(bǔ)腎增骨方防治骨質(zhì)疏松癥的機(jī)制之一。2補(bǔ)腎增骨方能顯著提高去勢(shì)大鼠血清雌二醇E2、降鈣素CT、胰島素樣生長(zhǎng)因子ⅠIGFⅠ水平可能是補(bǔ)腎增骨方防治骨質(zhì)疏松癥的機(jī)制之一。3補(bǔ)腎增骨方組能顯著促進(jìn)去勢(shì)大鼠VEGF在骨中表達(dá)可能是補(bǔ)腎增骨方防治骨質(zhì)疏松癥的機(jī)制之一。4補(bǔ)腎增骨方對(duì)于骨質(zhì)疏松癥有顯著的防治作用補(bǔ)腎增骨方治療優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照組與模型組說(shuō)明辨證治療是必要的。