傳染性脾腎壞死病毒（ISKNV）ORF48R功能研究.pdf

1、傳染性脾腎壞死病毒(ISKNV)會導致魚類產生嚴重的流行性疾病。魚被ISKNV感染后會出現皮下出血和異常水腫等主要癥狀。研究發(fā)現ISKNV ORF48R蛋白含有一個與血小板來源生長因子(platelet-derived growth factor，PDGF)/血管生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)家族保守結構域相似的結構域。ISKNV ORF48R蛋白在結構上與腫大病毒和副痘病毒所

2、編碼的VEGF更為相似，而與魚類和哺乳動物所編碼的VEGF相差較大。我們利用模式動物斑馬魚來研究ISKNV ORF48R的基因功能。我們構建一個含有ISKNV ORF48R全基因序列的DNA重組質粒，并將該重組質粒顯微注射到處于單細胞狀態(tài)的斑馬魚受精卵中。ISKNV ORF48R基因在斑馬魚胚胎中過表達，導致斑馬魚胚胎出現心包瘤和尾部腫大等癥狀，這表明ISKNV ORF48R可以誘導血管滲透性的改變。同時也發(fā)現可以刺激VEGF受體FLK

3、-1基因在斑馬魚背部大動脈和軸靜脈區(qū)域表達顯著增加。進一步研究發(fā)現ISKNV ORF48R可與斑馬魚VEGF121之間產生協同作用，該作用對FLK-1基因表達的刺激作用要明顯強于ISKNV ORF48R或斑馬魚VEGF121單獨作用。然而在斑馬魚胚胎發(fā)育早期封閉FLK-1基因表達，則可以使ISKNV ORF48R基因過表達所誘導的心包瘤和尾部腫大等異常胚胎表型消失。由此可見，ISKNV ORF48R在ISKNV感染過程中可能具有VEGF