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1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文傳染性造血組織壞死癥病毒全長(zhǎng)囊膜蛋白的原核表達(dá)及病毒的電鏡觀察姓名:郭露玲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):濕地資源與環(huán)境指導(dǎo)教師:李谷20090601華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2009屆碩士學(xué)位論文AbstractInfectiousHematopoieticNecrosisVmas(IHNV)belongstotheNovirhabdovirusgenus,whichisallenvelopedvirus,andpossessesa
2、externalglycoproteinGinsertedintotheviralmembranerespondingforattachmenttothemembraneofhostcell,andhe岫virusgetentryintothehostcellAnabout15kbfulllengthsequenceofIHNVGgenewasobtainedbyI玎一PCRamplificationTheamplifiedfragme
3、ntWasclonedintoprokaryoticexpressionsystempMALc2Xvectorandthenwastransformedintossettagami2(DE3)sp咖&Recombinantswereexaminedwimrestriction髓lzymedigestionandfurthercontinuedtheinterestinsertbysequencingpMALc2XGplasmidSDS—
4、PAGErevealedthattheexpressedfusionproteinisproducedbyinducing、)l,imPTGanditsmolecularweightisaround99kD,whichistheprospectivesizecorrespondingtothepredictedvalueInthisstudypMALc2XWasusedteducehydrophobicpropertyandcytoto
5、xicityofGproteinSOthefulllengthofGproteinhasbeenexpressedsuccessfullyandtheproteinhasbeenconfirmedthatissolubleTheSUccESSofexpressingtheIHNVGproteinisagoodstartingpointforinvestigatingthestructureandfunctionsofthisprotei
6、nandfurthermoretoexplorethemechanismoftheviralentrytocell,anddesignantivirusagentorvaccineMultilplicationofIHNVinEPCWasinvestigatedandpurificatedthroughultrahighspeedcentrifugalizationTheIHNVparticlesofhighpuritycanbesee
7、nbyTEM(transmissionelectronmicroscope)Thediameteris11O一120nmThesamplesofpurificationcanbelabledbyquantumdottotracethedynamicalprocessoftheviralentryintocellKeywords:IHNV;envelopeglycoprotein;genecloning;geneexpression;el
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