廣東地區(qū)葡萄球菌中耐藥基因cfr的流行性研究.pdf

1、葡萄球菌是最常見的化膿性球菌,也是醫(yī)院交叉感染的重要來源之一，可以對(duì)人類和畜牧業(yè)造成嚴(yán)重的危害。近年來隨著抗菌藥物的濫用和多重耐藥基因 cfr在動(dòng)物源菌株中的廣泛傳播，致使動(dòng)物源葡萄球菌耐藥現(xiàn)狀備受關(guān)注。本論文對(duì)廣東不同地區(qū)豬場(chǎng)中動(dòng)物源和密切接觸者攜帶cfr的葡萄球菌的流行特征及是否存在cfr陽性菌株的克隆傳播進(jìn)行了初步研究，旨在為指導(dǎo)臨床合理應(yīng)用抗菌藥物，減緩耐藥性傳播提供一定的理論依據(jù)。
　　2013年從豬場(chǎng)采集1000份豬及

2、其密切接觸者鼻拭子和肛門拭子樣品，用甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基分離出995株革蘭氏陽性菌株，采用PCR檢測(cè)到到96株攜帶cfr的陽性菌株。采用鏡檢和MALDI-TOF-MS儀器鑒定攜帶cfr的陽性菌，檢測(cè)到36株為葡萄球菌，檢測(cè)率為3.6％(36/995)。其中，34株來源于豬，另外2株來源于人。通過PCR測(cè)定葡萄球菌的gap以及16S rRNA基因，對(duì)36株攜帶cfr葡萄球菌菌株進(jìn)行進(jìn)一步菌種鑒定。結(jié)果表明這36株主要為松鼠葡萄球菌（n=

3、18），其次為腐生葡萄球菌（n=5），科氏葡萄球菌（n=4），阿爾萊葡萄球菌（n=3），緩慢葡萄球菌（n=1)，木糖葡萄球菌（n=1)，馬胃葡萄球菌（n=1)，另外還檢測(cè)到1株金黃色葡萄球菌。
　　采用瓊脂稀釋法測(cè)定36株攜帶cfr的葡萄球菌對(duì)臨床常用的12種抗菌藥物的最小抑菌濃度。結(jié)果表明，36株攜帶cfr的葡萄球菌對(duì)臨床常用的多種藥物均呈現(xiàn)出不同程度的耐藥性。耐藥率較高的依次有四環(huán)素、氨芐西林、克林霉素、頭孢噻呋以及氟苯尼考，

4、其耐藥率依次為83.33%、77.78%、77.78%、75%以及75%。其余氯霉素、沃尼妙林、苯唑西林、紅霉素、慶大霉素以及環(huán)丙沙星的耐藥率分別為69.44%、63.89%、63.89%、52.78%、50%以及38.89%，而利奈唑胺較為敏感，其耐藥率僅為5.56%。另外，耐甲氧西林葡萄球菌共有21株，占58.33%，還發(fā)現(xiàn)1株耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌。36株攜帶cfr的葡萄球菌，有30株對(duì)3～12種受試藥物耐藥，表明多重耐藥性現(xiàn)

5、象嚴(yán)重。
　　采用PCR方法檢測(cè)36株攜帶cfr的葡萄球菌中其它耐藥基因，如fexA、ermA、ermB、ermC以及tetM、tetA和tetB。結(jié)果顯示在36株攜帶cfr的葡萄球菌中有23株攜帶fexA基因，未檢測(cè)到ermA、ermB、ermC、tetM、tetA及tetB基因。
　　采用Sma-I PFGE對(duì)36株cfr陽性葡萄球菌進(jìn)行親緣關(guān)系分析。結(jié)果顯示30株分型成功，PFGE圖譜呈現(xiàn)多樣性，其中16株松鼠葡萄球菌

6、分為12個(gè)組群（＞90%相似度），表明 cfr陽性葡萄球菌多為為非克隆菌株，呈現(xiàn)多樣化的遺傳背景。但是，也發(fā)現(xiàn)克隆傳播菌株，如來自于同一養(yǎng)殖場(chǎng)的腐生葡萄球菌菌株328和371，其中菌株328來源于豬，而菌株371來源于人以及來自于不同養(yǎng)殖場(chǎng)松鼠葡萄球菌菌株251和283的PFGE圖譜呈現(xiàn)相似度為100%。
　　綜上所述，我國(guó)廣東不同地區(qū)豬場(chǎng)中動(dòng)物源和密切接觸者中攜帶 cfr葡萄球菌存在較低的流行性（3.6%），攜帶cfr葡萄球菌對(duì)