寧夏地區(qū)牛源金黃色葡萄球菌生物被膜相關(guān)基因檢測及耐藥性研究.pdf

1、金黃色葡萄球菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌之一。近年來由于抗菌藥物的廣泛使用，其耐藥性及多重耐藥逐年增加，尤其是金黃色葡萄球菌形成生物被膜以后，不僅耐藥能力極大提高，還能逃避機體免疫作用，長期存活并引起慢性感染，因此奶牛乳房炎反復(fù)感染、治療困難。研究金黃色葡萄球菌生物被膜的形成能力和機制有助于為奶牛乳房炎臨床預(yù)防和治療提供新的思路。
　　本研究主要采集寧夏地區(qū)奶牛臨床型和隱性型乳房炎乳樣，采用革蘭氏染色鏡檢、科瑪嘉金黃色葡萄球菌顯

2、色培養(yǎng)基初步篩選以及PCR方法擴增16S rDNA、nuc基因進行金黃色葡萄球菌的分離鑒定;再根據(jù)CLSI標準委員會推薦的肉湯微量稀釋法，對鑒定出的金黃色葡萄球菌進行14種常用抗菌藥物的MIC值測定。結(jié)果顯示，共分離鑒定出265株金黃色葡萄球菌，其對萬古霉素、多西環(huán)素的敏感率達到了90％以上;對頭孢唑啉、慶大霉索、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、諾氟沙星的敏感率在80％以上;其中耐藥率較高的是氨芐西林、青霉素，耐藥率在60％左右。分離的菌株主要以3、

3、4耐的居多，所占比例分別為13.6％、15.5％，分離的菌株最多耐受的抗菌藥物達到10種。
　　利用剛果紅法培養(yǎng)金黃色葡萄球菌生物被膜，再經(jīng)結(jié)晶紫染色法檢測生物被膜的形成能力。結(jié)果顯示，265株牛源金黃色葡萄球菌中有181株可以形成生物被膜，陽性率達到68.3％;在181株生物被膜陽性菌中，弱粘附、中等粘附、強粘附菌株所占比例分別為47.5％、30.4％、22.1％。
　　采用PCR擴增技術(shù)對265株金黃色葡萄球菌進行生物被