中藥復(fù)方“連黃”對(duì)金黃色葡萄球菌耐藥基因femA影響的研究.pdf

1、本試驗(yàn)應(yīng)用體外培養(yǎng)試驗(yàn)來(lái)初步研究中藥復(fù)方“連黃”對(duì)耐藥金黃色葡萄球菌的β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物耐藥性的抑制作用。通過(guò)瓊脂平板點(diǎn)種培養(yǎng)法檢測(cè)亞抑菌濃度的中藥復(fù)方“連黃”對(duì)金黃色葡萄球菌的β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物的耐藥性抑制率，同時(shí)將“連黃”對(duì)金黃色葡萄球菌株的耐藥抑制率分別與敏感金黃色葡萄球菌進(jìn)行比較，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，判斷耐藥性抑制劑的作用效果。通過(guò)藥敏紙片法檢測(cè)β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物對(duì)中藥復(fù)方“連黃”作用前后的耐藥金黃色葡萄球菌的抑菌環(huán)大小的改變，同時(shí)將β-內(nèi)

2、酰胺類(lèi)藥物對(duì)中藥復(fù)方“連黃”作用后的耐藥金黃色葡萄球菌的抑菌環(huán)與其對(duì)敏感金黃色葡萄球菌的抑菌環(huán)大小進(jìn)行比較，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，判斷耐藥性抑制劑的作用效果。
　　本研究采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴(kuò)增耐藥金黃色葡萄球菌的耐藥基因 femA。對(duì)臨床分離的耐藥金黃色葡萄球菌N01、敏感金黃色葡萄球菌B1、實(shí)驗(yàn)室誘導(dǎo)產(chǎn)生耐藥性的金黃色葡萄球菌D01、耐藥金黃色葡萄球菌868（韓國(guó)菌株）的耐藥基因femA進(jìn)行對(duì)比、分析不同菌株間該基因的同源性關(guān)

3、系。通過(guò)耐藥基因失活試驗(yàn)、PCR法檢測(cè)中藥復(fù)方“連黃”對(duì)金黃色葡萄球菌的耐藥基因 femA的影響，初步探討中藥復(fù)方“連黃”降低金黃色葡萄球菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物耐藥性的作用機(jī)制。
　　結(jié)果：通過(guò)瓊脂平板點(diǎn)種法結(jié)果可知，中藥復(fù)方“連黃”對(duì)金黃色葡萄球菌868、D01的耐藥性抑制率與敏感金黃色葡萄球菌B1比較差異不顯著（p>0.05），對(duì)金黃色葡萄球菌N01、N02的耐藥性抑制率與敏感金黃色葡萄球菌B1比較差異顯著（p<0.05）。藥敏

4、紙片法結(jié)果可知，經(jīng)中藥復(fù)方“連黃”作用后，β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物對(duì)金黃色葡萄球菌868、D01的抑菌環(huán)大小與其對(duì)敏感金葡菌B1的抑菌環(huán)大小比較差異不顯著（p>0.05），對(duì)金黃色葡萄球菌N01、N02的抑菌環(huán)大小與其對(duì)敏感金鋪菌B1的抑菌環(huán)大小比較差異顯著（p<0.05）。PCR法擴(kuò)增的耐藥金黃色葡萄球菌D01的femA基因與GenBank中序列號(hào)為AF144461的耐藥金黃色葡萄球菌耐藥基因femA的同源性達(dá)99％，表明實(shí)驗(yàn)室成功擴(kuò)增出金黃

5、色葡萄球菌的耐藥基因femA；PCR法擴(kuò)增的耐藥金黃色葡萄球菌868、、N01株的femA基因與AF144461的同源性均達(dá)到98％。中藥復(fù)方“連黃”作用前后金黃色葡萄球菌的耐藥基因femA在23～72堿基區(qū)內(nèi)發(fā)生較大改變，其對(duì)應(yīng)的氨基酸序列也發(fā)生改變。
　　結(jié)論：中藥復(fù)方“連黃”可有效的降低金黃色葡萄球菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)藥物的耐藥性，但對(duì)耐藥金黃色葡萄球菌N02株無(wú)效；耐藥金葡菌868、D01、N01的femA基因片段突變位點(diǎn)集中