金黃色葡萄球菌菌膜形成影響因素研究.pdf

1、本研究采用96孔細(xì)胞培養(yǎng)板法研究外部環(huán)境因素對(duì)金黃色葡萄球菌菌膜形成的影響，并以此確定適宜的菌膜培養(yǎng)條件，對(duì)112株不同來(lái)源的金黃色葡萄球菌分離株的菌膜形成能力進(jìn)行評(píng)價(jià)，同時(shí)調(diào)查了菌膜形成相關(guān)基因在分離株中的分布，分析菌膜形成與相關(guān)基因之間的關(guān)系。
　　首先考察培養(yǎng)材料、培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)溫度、營(yíng)養(yǎng)條件等因素對(duì)菌膜形成的影響，確定親水性細(xì)胞培養(yǎng)板、TSB培養(yǎng)基、37℃培養(yǎng)48h為適宜的菌膜體外培養(yǎng)條件，以此對(duì)112株分離株的菌膜形成量

2、進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示，金黃色葡萄球菌普遍可以形成菌膜，112株菌中的30株（26.8％）具有較強(qiáng)的菌膜形成能力，21株（18.8%）菌膜形成能力中等，51株（45.5%）菌膜形成能力較弱，10株（8.9%）菌膜陰性；菌株來(lái)源與菌膜形成能力之間沒有表現(xiàn)出一定的規(guī)律性，相同來(lái)源的不同菌株菌膜形成能力差異較大，說(shuō)明菌株自身特性是影響菌膜形成的重要因素。
　　在此基礎(chǔ)上，采用ScaⅠ酶切法和多重PCR法對(duì)112株分離株進(jìn)行agr基因分型，并

3、使用普通PCR法調(diào)查菌膜形成相關(guān)基因ica，rbf及bap在112株分離株中的分布，分析上述菌膜相關(guān)遺傳背景與菌膜形成之間的相關(guān)性。4種agr基因型在所調(diào)查的112株菌中均有分布，其中agrⅠ型菌株所占比例最高（61.8%），其次為agrⅢ型（20.9%）、 agrⅡ型(11.8%), agrⅣ型最少（5.5%）。不同agr基因型的菌株在菌膜形成方面均存在著顯著的差異，agrⅠ型菌株的菌膜形成能力強(qiáng)于其他型菌株。ica和rbf基因在金黃