鐵對銅誘導矛尾復蝦虎魚脂肪沉積及其離子轉(zhuǎn)運的影響.pdf

1、銅（Cu）和鐵（Fe）都是動物體生理代謝必需的微量元素，它們在吸收和代謝上有著復雜的交互作用。銅和鐵的相互關系在哺乳動物研究廣泛。研究發(fā)現(xiàn)，水體鐵含量過高會降低銅的吸收，因而對機體生理生化代謝有顯著影響。然而，在魚類，有關銅和鐵在生理代謝上的交互作用鮮見報道。本論文主要探討鐵對銅誘導矛尾復蝦虎魚肝臟脂肪沉積的影響及其在離子轉(zhuǎn)運中的相互作用。主要研究結果如下：
　　1.探討了鐵對銅誘導的矛尾復蝦虎魚脂肪沉積的影響。采用3×2雙因素實

2、驗設計，矛尾復蝦虎魚在0（對照組）、0.606μM Cu、1.212μMCu、1.128μM Fe、0.606μM Cu+1.128μM Fe和1.212μM Cu+1.128μM Fe六個處理中暴露56d，分別于28 d和56 d取樣。測定六個處理中蝦虎魚的生長性能、肝臟脂肪與金屬含量、肝臟組織學、組織化學、肝臟脂代謝相關酶活及基因表達。水體鐵添加提高了第56 d最高銅濃度組蝦虎魚的存活率。第28 d和第56 d，鐵添加提高了肝臟鐵含

3、量而降低了肝臟銅含量。而且，鐵添加降低了脂肪合成相關酶的酶活及其基因表達水平（葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）和脂肪酸合成酶（FAS）），升高了脂肪甘油三酯水解酶（ATGL）基因的表達。在相同的銅濃度下，第28 d鐵添加下調(diào)了固醇調(diào)控元件結合蛋白-1（SREBP-1）和過氧化物酶體增殖物激活受體（PPARγ）基因的表達，而上調(diào)了PPARα基因的表達。然而第56 d，SREBP-1、PPARγ和PPARα基因表達水平趨勢多變，且與水體鐵

4、濃度關系不明顯。轉(zhuǎn)錄因子與酶活及其基因表達水平的相關性表明，鐵添加通過調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子來調(diào)控這些酶活及其基因的表達。總之，鐵添加通過下調(diào)脂肪合成代謝和上調(diào)脂肪分解代謝來降低銅誘導魚類脂肪沉積。在鐵暴露下，蝦虎魚肝臟中這些酶活及其基因表達的不同反應模式，表明鐵影響銅誘導脂代謝的改變具有時間效應。
　　2.克隆得到了蝦虎魚銅離子轉(zhuǎn)運蛋白（CTR1和CTR2）、二價金屬離子轉(zhuǎn)運蛋白（DMT1）和金屬硫蛋白（MT1和MT2）的cDNA全長序列

5、，探討了銅和鐵共暴露對這些離子轉(zhuǎn)運蛋白基因表達水平的影響。蝦虎魚 CTRs蛋白序列具有兩個富含蛋氨酸結構域（MxM和 MxxxM）和三個跨膜域。在羧基末端，CTR1含有一個保守的半胱氨酸和組氨酸殘基結構域（HCH），而CTR2不具有此結構域。蝦虎魚DMT1蛋白序列具有12個保守的疏水性跨膜域。而蝦虎魚MTs蛋白序列在半胱氨酸殘基數(shù)量（20;31.75％）及其位置上高度保守。這五個基因在所有組織都能表達，但是在肝臟中表達水平最高。銅暴露有