飼料脂肪水平和脂肪酸種類對大黃魚脂肪沉積的影響.pdf

1、以我國重要的海水性養(yǎng)殖魚類大黃魚（Larmichthys crocea）為研究對象，在海水浮式網(wǎng)箱內(nèi)進(jìn)行攝食生長實(shí)驗(yàn)，以觀察飼料脂肪水平和脂肪酸種類對大黃魚生長、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積相關(guān)基因表達(dá)的影響，在此基礎(chǔ)上探討脂肪水平和脂肪酸調(diào)控大黃魚脂肪沉積的分子機(jī)制。本文研究內(nèi)容和主要研究結(jié)果如下:
　　1.飼料脂肪水平對大黃魚生長、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積的影響
　　用三種不同脂肪水平——低脂(6％)、適宜脂肪水平(12％)和高

2、脂(18％)的飼料飼養(yǎng)大黃魚（150.0±4.9 g）10周，研究脂肪水平對大黃魚生長性能、血漿生化指標(biāo)、組織脂肪含量以及脂肪沉積相關(guān)過程（脂蛋白組裝和清除、脂肪酸吸收和甘油三酯合成、分解）基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明，脂肪水平對大黃魚特定生長率(SGR)沒有顯著影響（P＞0.05）。然而，大黃魚肝體比(HSI)、臟體比(VSI)、血漿甘油三酯(TAG)、非酯化脂肪酸(NEFA)和低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-c)含量隨飼料脂肪水平的升高而

3、顯著升高(P＜0.05)。與對照組相比，攝食低脂飼料時，在一定程度上，雖然肝臟對脂蛋白的攝取、脂肪酸的吸收增加，甘油三酯合成增加，甘油三酯分解和分泌降低，但由于攝食的脂肪少，肝臟脂肪含量顯著降低;雖然肌肉對脂肪酸的吸收可能增加，但脂蛋白攝取和甘油三酯合成的降低以及脂肪的來源不足使肌肉脂肪含量降低。攝食高脂飼料時，肝臟對脂蛋白攝取、脂肪酸吸收的增加以及甘油三酯分解的降低等途徑可能參與了肝臟脂肪含量的增加，同時肝臟也可能通過增加甘油三酯的分

4、泌、降低脂肪的合成來減少肝脂的沉積;肌肉可能通過降低對脂蛋白的攝取、脂肪酸的吸收以及甘油三酯的合成等途徑來抑制脂肪的過度沉積;腹部脂肪組織可能通過增加脂蛋白攝取、脂肪酸吸收以及甘油三酯合成來增加脂肪沉積，但脂肪組織脂解率也可能增加，使其脂肪含量低于對照組。因此，飼料脂肪水平調(diào)控脂肪沉積是個復(fù)雜的過程，存在組織特異性調(diào)控方式。
　　2.飼料中飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸對大黃魚生長、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積的影響
　　用三種分別富

5、含長鏈多不飽和脂肪酸(FO)、棕櫚酸(PA)和油酸(OO)的飼料投喂大黃魚（151.0±3.5 g）10周，研究飼料中不同脂肪酸種類對大黃魚生長性能、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積相關(guān)基因（包括脂蛋白組裝和清除、脂肪酸吸收、甘油三酯合成和分解）表達(dá)的影響。結(jié)果表明，與FO組相比，PA組大黃魚增重率(WGR)沒有顯著變化，而OO組增重率顯著降低（P＜0.05）。PA組大黃魚肝體比(HSI)和臟體比(VSI)顯著低于OO組(P＜0.05)，但與FO

6、組之間差異不顯著(P＞0.05)。血漿甘油三酯(TAG)、總膽固醇、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-c)的濃度不受飼料處理的影響(P＞0.05)。OO組大黃魚血漿非酯化脂肪酸(NEFA)濃度最高，其濃度約為PA組的2倍。PA組肝臟和肌肉脂肪水平的降低可能主要是由于肝臟脂蛋白分泌、脂肪酸β-氧化增加以及肌肉甘油三酯合成降低和脂肪酸β-氧化增加。與PA組相反，攝食OO組飼料的大黃魚肝臟和肌肉脂肪含量顯著增加

7、;脂蛋白和脂肪酸吸收增加以及沒有明顯增強(qiáng)的脂肪酸β-氧化能力可能是導(dǎo)致OO組肝臟脂肪含量增加的重要原因;肌肉脂肪含量增加可能主要是因?yàn)橹鞍?、脂肪酸吸收增加和甘油三酯合成增加。此外，雖然腹部脂肪組織脂肪含量沒有明顯變化，但脂肪組織ATGL表達(dá)量顯著增加，脂肪組織脂解率的增加也可能是導(dǎo)致OO組肝臟脂肪沉積增加的原因之一。
　　3.飼料中亞油酸和亞麻酸對大黃魚生長、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積的影響
　　用三種分別富含長鏈多不飽和脂肪

8、酸(FO)、亞油酸(SO)和亞麻酸(PO)的飼料投喂大黃魚（151.5±3.9 g）10周。研究不同脂肪酸種類對大黃魚生長性能、血漿生化指標(biāo)和脂肪沉積相關(guān)基因（包括脂蛋白組裝和清除、脂肪酸吸收、甘油三酯合成和分解）表達(dá)的影響。結(jié)果表明，大黃魚增重率(WGR)、存活率和肝體比(HSI)不受飼料處理的影響(P＞0.05)，但SO組臟體比(VSI)顯著高于FO組（P＜0.05）。血漿甘油三酯(TAG)、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-c)和非酯

9、化脂肪酸(NEFA)的濃度不受飼料處理的影響(P＞0.05)。PO組血漿總膽固醇水平、SO組和PO組血漿低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-c)水平顯著高于FO組(P＜0.05)。SO和PO組肝臟脂肪含量顯著高于FO組，但全魚、肌肉和脂肪組織脂肪含量與FO組相比差異不顯著(P＞0.05)。SO組肝臟對脂蛋白的攝取和脂肪酸的吸收增加可能是導(dǎo)致肝脂沉積的主要原因，雖然肝臟甘油三酯合成降低、甘油三酯分解以及分泌增加等途徑可能參與了降低脂肪沉積，但這

10、些方法仍不足以抑制肝脂沉積，從而使SO組肝臟脂肪含量顯著增加。PO組肝脂沉積增加可能是由于對脂蛋白的攝取和脂肪酸的吸收增加，雖然肝臟甘油三酯分泌可能增加，但仍不能將過多脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)至肝外，導(dǎo)致PO組肝脂沉積顯著增加。此外，腹部脂肪組織ATGL表達(dá)量顯著增加，脂肪組織脂解率的增加也可能是導(dǎo)致SO和PO組肝臟脂肪沉積增加的原因之一。
　　4.不同脂肪酸條件下大黃魚肝臟基因表達(dá)譜分析
　　采用Illumina HiSeqTM2000/

11、MiseqTM高通量測序技術(shù)，分析了大黃魚腦、胃、腸、腎、心臟、肌肉、脂肪組織和肝臟混合樣品的轉(zhuǎn)錄組文庫，共獲得126963條Unigene，長度范圍為201bp-29701bp，平均長度795 bp。在NR數(shù)據(jù)庫中注釋成功的Unigenes數(shù)目為28586條，注釋成功率為22.51％。利用所得的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫，對不同脂肪酸（FO，SO和PO）條件下大黃魚肝臟基因表達(dá)譜進(jìn)行了分析。結(jié)果表明脂肪酸種類對肝臟基因表達(dá)譜有顯著影響。與FO組相比