CPT1基因?qū)ωi脂肪沉積的影響及其調(diào)控機(jī)制的研究.pdf

1、本研究以肉脂型的金華豬和瘦肉型的長(zhǎng)白豬為試驗(yàn)對(duì)象，在比較研究?jī)韶i種胴體品質(zhì)和肉質(zhì)的基礎(chǔ)上，探討脂肪酸β-氧化關(guān)鍵酶肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶1(CPT1)在金華豬和長(zhǎng)白豬不同組織中的表達(dá)特異性、不同生長(zhǎng)階段的表達(dá)規(guī)律及品種間的差異，研究CPT1基因表達(dá)在脂肪沉積中的作用，及其與體脂和肌內(nèi)脂肪沉積的關(guān)系。通過豬肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞體外培養(yǎng)模型的建立，利用CB1激動(dòng)劑△9-四氫大麻酚(△9-THC)和抑制劑利莫那班(SR141716)探討大麻素1型受體(

2、CB1)基因?qū)PT1調(diào)控的分子機(jī)制。主要研究結(jié)果如下：
　　 1.金華豬、長(zhǎng)白豬胴體性狀及肉質(zhì)性狀的比較研究
　　 結(jié)果表明，180日齡金華豬瘦肉率和眼肌面積均顯著小于同日齡的長(zhǎng)白豬(p＜0.01)；金華豬肌內(nèi)脂肪含量顯著高于長(zhǎng)白豬(p＜0.01)，金華豬背膘厚、脂肪率和皮脂率均顯著高于長(zhǎng)白豬(p＜0.01)；金華豬壓出水比顯著低于長(zhǎng)白豬(p＜0.01)；金華豬滴水損失低于長(zhǎng)白豬，但差異不顯著(p＞0.05)；金華豬和

3、長(zhǎng)白豬宰后45min肌肉pH值差異不顯著(p＞0.05)，且均在正常范圍內(nèi)；肉色中金華豬L值顯著高于長(zhǎng)白豬(p＜0.01)，兩豬種a值和b值差異不顯著(p＞0.05)。試驗(yàn)表明，金華豬和長(zhǎng)白豬在胴體品質(zhì)和肉質(zhì)上存在顯著差異，在肉質(zhì)上，金華豬肉質(zhì)優(yōu)于長(zhǎng)白豬。
　　 2.金華豬、長(zhǎng)白豬血液生化指標(biāo)及脂肪代謝相關(guān)酶活的比較研究
　　 與長(zhǎng)白豬相比，金華豬具有較高的血清總膽固醇(TC)含量、低密度脂蛋白(LDL)和載脂蛋白B(A

4、po B)含量；具有較低的血清甘油三酯(TG)含量和脂蛋白a(Lp a)含量。在皮脂中，金華豬激素敏感脂肪酶(HSL)的活性顯著低于長(zhǎng)白豬(p＜0.05)，肝脂酶(HL)的活性顯著高于長(zhǎng)白豬(p＜0.05)。在同一豬種上，HSL、脂蛋白酯酶(LPL)和HL的活性在脂肪組織中最高，肝臟組織中其次，肌肉組織中最低。
　　 3.豬CPT1基因表達(dá)的組織特異性、表達(dá)規(guī)律及品種差異研究
　　 CPT1基因的兩種亞型L-CPT1和M

5、-CPT1在豬的不同組織均有廣泛的表達(dá)。L-CPT1 mRNA在肝臟、胰臟和十二指腸中表達(dá)量較高，在背最長(zhǎng)肌、皮脂、脾和腦中表達(dá)量較低。M-CPT1 mRNA在背最長(zhǎng)肌和皮脂中表達(dá)量較高，在腎臟、脾臟、腦、肺和十二指腸中表達(dá)量較低。在不同生長(zhǎng)階段的金華豬和長(zhǎng)白豬上，L-CPT1和M-CPT1具有相似的表達(dá)規(guī)律，兩基因的mRNA表達(dá)量都呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，在30日齡時(shí)表達(dá)量達(dá)到最高。品種差異性比較研究的結(jié)果表明，在背最長(zhǎng)肌中，金華豬的

6、CPT1 mRNA表達(dá)量和蛋白表達(dá)量均顯著高于長(zhǎng)白豬(p＜0.01)，且與肌內(nèi)脂肪含量呈正相關(guān)；在皮下脂肪和腹脂中，金華豬的CPT1 mRNA表達(dá)量和蛋白表達(dá)量均顯著低于長(zhǎng)白豬(p＜0.01)，且與體脂肪率呈負(fù)相關(guān)。提示CPT1基因與體脂和肌內(nèi)脂肪沉積有密切的關(guān)系。
　　 4.CB1對(duì)CPT1基因表達(dá)和脂肪沉積的影響
　　 通過豬肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞體外培養(yǎng)模型的建立，利用CB1激動(dòng)劑Δ9-THC和抑制劑SR141716研究

7、CB1對(duì)脂肪酸β-氧化關(guān)鍵酶CPT1的調(diào)控作用及對(duì)脂肪沉積的影響。研究結(jié)果表明，CB1激動(dòng)劑激活CB1基因表達(dá)后，顯著降低了CPT1基因的表達(dá)，同時(shí)增加了細(xì)胞內(nèi)脂滴的沉積，減少了培養(yǎng)基中甘油的含量。CB1抑制劑SR141716抑制CB1基因的表達(dá)后，顯著提高了CPT1基因的表達(dá)，同時(shí)減少了細(xì)胞內(nèi)脂滴的沉積，增加了培養(yǎng)基中甘油的含量。在培養(yǎng)基中添加CPTl的抑制劑乙莫克舍(ETM)后，未對(duì)CB1基因的表達(dá)產(chǎn)生影響，推測(cè)CB1可能是CPT1