PGC-1α基因?qū)V西南丹瑤雞脂肪沉積的調(diào)控.pdf

1、廣西南丹瑤雞是廣西優(yōu)良的地方品種之一，其特點(diǎn)是皮薄、肉質(zhì)好。PGC-1α是脂肪沉積和能量代謝的關(guān)鍵因子，其編碼區(qū)646位點(diǎn)的多態(tài)性與脂肪沉積量高度相關(guān)。為了探討PGC-1α基因?qū)V西南丹瑤雞脂肪沉積的調(diào)控，本研究克隆和分析了廣西南丹瑤雞PGC-1α基因編碼區(qū)(CDS)的全序列，檢測(cè)了雞PGC-1α基因編碼區(qū)646位點(diǎn)的多態(tài)性，探討了PGC-1α和PPARγ基因在PGC-1α基因646位點(diǎn)不同基因型中的表達(dá)。
　　PCR擴(kuò)增并克隆獲

2、得廣西南丹瑤雞PGC-1α基因CDS序列。與GenBank上的參考序列(NM_001006457.1)相比存在10處堿基突變，其中T51C, T81C, T90C, C111T, T465C, C741T, C1572G7處為同義突變， G646A，T1579G，T1720C3處為錯(cuò)義突變，分別造成天冬氨酸突變?yōu)樘於０?，絲氨酸突變?yōu)楸彼?，絲氨酸突變?yōu)楦彼?。用STRING軟件預(yù)測(cè)，發(fā)現(xiàn)廣西南丹瑤雞PGC-1α與PPARγ蛋白存在互作

3、。
　　以廣西麻雞作為對(duì)照，利用PCR-RFLP技術(shù)分析了廣西南丹瑤雞PGC-1α基因646位點(diǎn)的多態(tài)性。結(jié)果顯示，廣西南丹瑤雞和廣西麻雞PGC-1α基因646位點(diǎn)都存在A和G兩個(gè)等位基因，A等位基因頻率在廣西南丹瑤雞和廣西麻雞分別為0.35和0.23。兩個(gè)等位基因組成AA、AG和GG三種基因型，其頻率在廣西南丹瑤雞分別為0.05，0.60，0.35，在廣西麻雞分別為0.07，0.33，0.6。
　　利用熒光定量PCR(QP

4、CR)技術(shù)分析了PGC-1α和PPARγ基因在廣西南丹瑤雞PGC-1α基因646位點(diǎn)三種不同基因型的肝臟、皮膚和腹脂中的表達(dá)。結(jié)果顯示，在肝臟組織中，PGC-1α和PPARγ在PGC-1α基因編碼區(qū)646位點(diǎn)不同基因型中的表達(dá)趨勢(shì)一致，兩個(gè)基因在AA型中的表達(dá)量都顯著高于GG型和GA型(P＜0.05)。在皮脂組織中，PGC-1α基因在AA型個(gè)體中的表達(dá)量顯著高于AG型和GG型(P＜0.05)，而PPARγ在AG型和GG型中的表達(dá)量則顯著

5、高于AA型(P＜0.05)。在腹脂中，PGC-1α和PPARγ基因在AG型和GG型中的表達(dá)量都顯著高于AA型（P＜0.05）。
　　綜上所述，本研究成功克隆廣西南丹瑤雞PGC-1α基因編碼區(qū)序列，全長為2388bp;與GenBank的參考序列(NM001006457.1)相比存在10處突變，其中7處為同義突變，3處錯(cuò)義突變;生物軟件預(yù)測(cè)發(fā)現(xiàn)廣西南丹瑤雞PGC-1α與PPARγ蛋白存在互作;廣西南丹瑤雞PGC-1α基因區(qū)646位點(diǎn)的