2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:以乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)誘導(dǎo)刺激小鼠髓系樹突狀細胞(DC),利用芯片技術(shù)檢測刺激前后細胞microRNA(mRNA)表達情況,了解HBsAg刺激DC前后miRNA表達譜的變化,為研究miRNA在乙型肝炎病毒感染的免疫機制中的作用提供新線索。
   方法:首先,體外利用GM-CSF、IL-4等因子誘導(dǎo)培養(yǎng)未成熟樹突狀細胞,TNF-α誘導(dǎo)成熟,使用優(yōu)化后的實驗條件進行原代DC培養(yǎng),用倒置顯微鏡、透射電鏡、流式細胞儀

2、等方法鑒定培養(yǎng)出的原代DC。其次,培養(yǎng)所得imDC分為四組:未刺激組(A組)、HBsAg、LPS、TNFα分別刺激組(即BCD組)。用TRIZOL法抽提細胞總RNA,并純化后,利用吸光光度計、Agilent2100生物分析儀等方法鑒定RNA質(zhì)量,確保下一步實驗結(jié)果的準確性。最后,利用基因芯片技術(shù),將細胞miRNA與小鼠miRNA芯片雜交,采用圖像軟件等技術(shù)進行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換分析及校正。三個刺激組分別與未刺激組的miRNA表達譜進行比較。篩選出

3、HBsAg刺激組部分差異表達較顯著的miRNA,利用計算機軟件技術(shù)對部分顯著表達的miRNA進行靶基因初步預(yù)測。
   結(jié)果:利用改良后的方法可體外培養(yǎng)出純度較高、數(shù)量較大的小鼠髓系DC。HBsAg刺激前后miRNA差異表達2倍以上者共30個,其中16個上調(diào),14個下調(diào)。三個不同刺激組間miRNA差異譜存在不同差異。篩選出的靶基因中包含DC信號通路的相關(guān)成分。
   結(jié)論:發(fā)現(xiàn)HBsAg刺激小鼠髓系DC前后miRNA表達

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