BCG對(duì)人外周血來(lái)源樹(shù)突狀細(xì)胞miRNA表達(dá)譜的影響及其初步驗(yàn)證.pdf

1、結(jié)核分枝桿菌是典型的胞內(nèi)寄生菌，主要靶細(xì)胞是巨噬細(xì)胞，但樹(shù)突狀細(xì)胞能顯著激活初始型T細(xì)胞，啟動(dòng)T細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)，是細(xì)胞免疫反應(yīng)的重要啟動(dòng)者。MicroRNAs作為一類18-22 nt的小分子，其調(diào)控作用廣泛存在真核生物的各個(gè)進(jìn)程，而且在免疫方面尤為重要，本研究采用miRNA芯片明晰BCG感染前后DCs中miRNA表達(dá)譜的變化，以發(fā)現(xiàn)可能參與DCs調(diào)控結(jié)核分枝桿菌感染相關(guān)miRNA，并采用Real time PCR進(jìn)行初步驗(yàn)證，為闡明D

2、Cs抗結(jié)核分枝桿菌的特異性miRNA調(diào)控機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
　　 1、成功分離并培養(yǎng)出健康人外周血來(lái)源的樹(shù)突狀細(xì)胞，經(jīng)過(guò)BCG感染DCs前后MicroRNA芯片檢測(cè)，顯示miRNA表達(dá)譜的差異，上調(diào)的有hsa-miR-1270；hsa-miR-147b；hsa-miR-3201；hsa-miR-132；hsa-miR-3611；hsa-miR-155；hsa-miR-1973；hsa-miR-934；hsa-miR-106b*等30

3、個(gè)，下調(diào)的有hsa-miR-27b；hsa-miR-151-5p；hsa-miR-374c；hsa-miR-425；hsa-miR-125b；hsa-miR-361-5p；hsa-miR-320c；hsa-miR-130a等32個(gè)，這些miRNA可能在DCs抗結(jié)核分枝桿菌的感染中起著重要的作用。
　　 2、成功采用頸環(huán)引物捕捉成熟miRNA，并反轉(zhuǎn)錄成cDNA，構(gòu)建了T載體，采用絕對(duì)定量對(duì)其中的4個(gè)miRNA分子進(jìn)行了Real