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文檔簡介
1、前言:
1969年Chihara等首次從香菇中分離出具有抗腫瘤活性的多糖,香菇多糖(Lentinan,LNT)。香菇多糖具有多種藥理學(xué)作用,是一種兼有抑制腫瘤和提高免疫功能的多糖類生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑。香菇多糖可以增強巨噬細胞的吞噬功能;激活T淋巴細胞釋放活化因子;提高NK細胞活性;誘導(dǎo)干擾素或白細胞介素等細胞因子的產(chǎn)生。樹突狀細胞(dendritic cells,DCs)是體內(nèi)功能最強大的專職抗原遞呈細胞(antigen pres
2、enting cell,APC),具有獨特的抗原遞呈和激活功能;它可以特異捕捉抗原,表達高水平的細胞內(nèi)主要組織相容抗原MHC-Ⅱ(MHC-Ⅱ)類分子和協(xié)同刺激分子CD80和CD86,并能移行至淋巴器官,刺激初始型T細胞增殖活化,同時刺激B淋巴細胞增殖成熟。DCs作為免疫反應(yīng)的核心和關(guān)鍵,在腫瘤細胞和T淋巴細胞的相互作用中起橋梁和樞紐作用。所以人們越來越熱衷于有關(guān)DCs的研究,尤其是在腫瘤方面的應(yīng)用。鑒于LNT在免疫系統(tǒng)中的顯著調(diào)節(jié)作用,
3、所以研究LNT對DCs的作用對于闡明LNT對免疫系統(tǒng)作用機理十分必要。本研究就LNT對小鼠骨髓來源樹突狀細胞成熟過程中表型及功能變化的影響作用進行探討。
方法:
本實驗采用小鼠骨髓來源樹突狀細胞(bone marrow dendritic cells,BMDCs)進行實驗,采集小鼠骨髓,誘導(dǎo)培養(yǎng)成樹突狀細胞。將小鼠骨髓來源樹突狀細胞分成LPS陽性對照組,LNT處理組和RPMI1640空白對照組,應(yīng)用酸性磷酸酶活性檢測
4、技術(shù)、流式細胞儀檢測技術(shù)、吞噬實驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測各組BMDCs表型和功能的各種指標(biāo)。
結(jié)果:
1.LNT處理組和LPS組BMDCs酸性磷酸酶活性均低于RPMI1640組;
2.LNT組和LPS組相似,可上調(diào)BMDCs表面MHCⅡ、CD40、CD83、CD80、CD86和DEC205的表達;
3.LNT處理組和LPS組BMDCs吞噬能力比RPMI1640空白對照組明顯下降;
5、r> 4.ELISA結(jié)果顯示1640組BMDCs的IL-12p70和TNF-a分泌較少,LNT組和LPS組BMDCs高分泌IL-12p70和TNF-a。
結(jié)論:
1.適宜濃度的LNT可以刺激DCs表型和功能的成熟。
2.適宜濃度的LNT作用使DCs細胞內(nèi)的酸性磷酸酶活性下降、減低DCs細胞對FITC-dextran的吞噬能力,表明DCs吞噬抗原能力下降,遞呈能力增加,趨向成熟。
3.適宜濃度的L
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