不同分化階段樹突狀細胞骨架結(jié)合蛋白表達變化的研究.pdf

1、目的：樹突狀細胞（dendritic cells，DCs）被認為是目前功能最為強大的抗原提呈細胞，在啟動和放大固有免疫和適應性免疫應答方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。不同分化階段DCs運動能力不同，可導致免疫應答結(jié)果的不同。因此，研究不同分化階段樹突狀細胞重要細胞骨架結(jié)合蛋白的表達變化，為深入研究DCs運動能力和提高基于過繼回輸DCs的抗腫瘤免疫治療療效提供理論依據(jù)。
　　方法：外周血單個核細胞來源的單核細胞，在體外經(jīng)重組人白介素-4（rec

2、ombinant human interleukin-4,rhIL-4）和重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,rhGM-CSF)誘導培養(yǎng)5天獲得未成熟DCs(immature dendritic cells,imDCs)，繼續(xù)經(jīng)腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、

3、重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子和重組人白細胞介素-4誘導培養(yǎng)3天后分化為成熟樹突狀細胞(mature dendritic cells,mDCs)。分別提取不同分化階段DCs的總蛋白和總RNA，實時定量PCR(Real-time qPCR)和蛋白質(zhì)芯片檢測細胞骨架結(jié)合蛋白的基因和蛋白水平的表達變化。
　　結(jié)果：單核細胞經(jīng)imDCs向mDCs分化的過程中，一些肌動蛋白微絲的單體隔離蛋白、加帽蛋白、橫連蛋白、解聚蛋白、成核蛋白和膜結(jié)合