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文檔簡介
1、目的:探討彈性蛋白肽對髓樣樹突狀細胞表面共刺激分子表達的影響
方法:利用含有40ng/mL小鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)、10ng/mL白介素4(IL-4)和10%胎牛血清(FBS)的RPMI1640培養(yǎng)基刺激誘導小鼠骨髓來源的單個核細胞增殖分化為符合實驗要求的高純度未成熟髓樣樹突狀細胞(imDC),收集細胞隨機分為空白對照組及彈性蛋白肽組:空白對照組不加任何刺激,彈性蛋白肽組加入終濃度為1ug/mL的彈性蛋白
2、肽(elastin peptide,VGVAPG)刺激,兩組細胞在相同條件下繼續(xù)培養(yǎng)24h。然后收集細胞利用流式細胞技術和RT-PCR技術檢測樹突狀細胞表面共刺激分子CD40、CD80和CD86的表達變化,ELISA法檢測培養(yǎng)細胞上清液細胞因子白介素6(IL-6)和轉化生長因子β(TGF-β)的水平變化。
結果:流式細胞術及RT-PCR檢測均顯示,空白對照組樹突狀細胞表面共刺激分子表達較低,彈性蛋白肽刺激后,樹突狀細胞表面共刺
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