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文檔簡介
1、目的:觀察FOLFOX4聯(lián)合1-甲基-色氨酸(1-MT)對荷胃癌小鼠皮下移植瘤生長的抑制作用、對胃癌組織吲哚胺-2,3-雙加氧酶(IDO)表達水平的影響和對脾臟樹突狀細(xì)胞(DC)表面分子表達水平的影響。
方法:用脂質(zhì)體法將含IDO基因的重組質(zhì)粒穩(wěn)定轉(zhuǎn)染小鼠前胃癌細(xì)胞(MFC),PT-PCR法檢測到IDO轉(zhuǎn)染組細(xì)胞IDOmRNA的表達,Western blot法檢測到IDO轉(zhuǎn)染組細(xì)胞IDO蛋白的表達,建立小鼠胃癌皮下移植瘤模
2、型,隨機分為6組,MFC未轉(zhuǎn)染組、pcDNA3.1轉(zhuǎn)染組、pcDNA3.1-IDO轉(zhuǎn)染組、1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組、FOLFOX4-pcDNA3.1-IDO治療組、FOLFOX4+1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組,觀察各組小鼠成瘤情況,腫瘤重量差異,免疫組織化學(xué)法檢測腫瘤組織內(nèi)IDO的表達情況,RT-PCR法檢測脾臟組織IDOmRNA的表達,流式細(xì)胞術(shù)檢測小鼠脾臟樹突狀細(xì)胞表面分子CD11c、CD86、CD80、
3、主要組織相容性抗原復(fù)合物Ⅱ(MHC-Ⅱ)的表達。
結(jié)果:與MFC未轉(zhuǎn)染組和PCDNA3.1轉(zhuǎn)染組相比較,PCDNA3.1-IDO轉(zhuǎn)染組腫瘤生長速度較快,重量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與pcDNA3.1-IDO轉(zhuǎn)染組比較,1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組、 FOLFOX4-pcDNA3.1-IDO治療組和FOLFOX4+1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組腫瘤重量減輕,其抑瘤率分別為8.91%,80.20
4、%,86.13%,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組和FOLFOX4-pcDNA3.1-IDO治療組比較,F(xiàn)OLFOX4+1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組腫瘤重量明顯減輕,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);腫瘤組織內(nèi)IDO表達:1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組、FOLFOX4-pcDNA3.1-IDO治療組、FOLFOX4+1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組癌細(xì)胞內(nèi)著色少見
5、,顏色較淡,而MFC未轉(zhuǎn)染組、pcDNA3.1轉(zhuǎn)染組、pcDNA3.1-IDO轉(zhuǎn)染組胃癌細(xì)胞質(zhì)內(nèi)可見著色廣泛,顏色較深,F(xiàn)OLFOX4+1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組IDO表達最少,pcDNA3.1-IDO轉(zhuǎn)染組IDO表達最多;與MFC未轉(zhuǎn)染組和pcDNA3.1轉(zhuǎn)染組比較,pcDNA3.1-IDO轉(zhuǎn)染組脾臟組織IDOmRNA表達顯著增加(P<0.05),MFC未轉(zhuǎn)染組和pcDNA3.1轉(zhuǎn)染組脾臟組織IDO mRNA表達無明顯差
6、異(P>0.05);與pcDNA3.1-IDO轉(zhuǎn)染組相比,1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組、FOLFOX4-pcDNA3.1-IDO治療組和FOLFOX4+1-MT-PCDNA3.1-IDO治療組脾臟組織IDOmRNA表達明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與FOLFOX4+1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組相比,1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組和FOLFOX4-pcDNA3.1-IDO治療組脾臟組織IDO
7、mRNA表達明顯增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與pcDNA3.1-IDO轉(zhuǎn)染組比較,MFC未轉(zhuǎn)染組、pcDNA3.1轉(zhuǎn)染組、1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組脾臟DC數(shù)量增加,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);FOLFOX4-pcDNA3.1-IDO治療組、FOLFOX4+1-MT-PCDNA3.1-IDO治療組脾臟DC數(shù)量明顯增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與FOLFOX4+1-MT-pcDNA3.1-IDO
8、治療組比較,1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組、FOLFOX4-pcDNA3.1-IDO治療組脾臟DC數(shù)量減少,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。與pcDNA3.1-IDO轉(zhuǎn)染組比較,MFC未轉(zhuǎn)染組、pcDNA3.1轉(zhuǎn)染組、1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組、 FOLFOX4-pcDNA3.1-IDO治療組、FOLFOX4+1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組DC表面分子CD86、CD80、MHC-Ⅱ的表達明顯增加,差
9、異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),與FOLFOX4+1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組比較,1-MT-pcDNA3.1-IDO治療組、FOLFOX4-pcDNA3.1-IDO治療組DC表面分子CD86、CD80、MHC-Ⅱ的表達明顯減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:FOLFOX4聯(lián)合1-MT抑制胃癌小鼠皮下移植瘤的生長,下調(diào)胃癌組織IDO的表達,降低脾臟IDOmRNA的表達,增加小鼠脾臟樹突狀細(xì)胞表面分子
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