神經(jīng)氨酸酶NanC體外抗白血病活性研究.pdf

1、目的:
　　鑒定通過(guò)離子交換層析和親和層析純化方法后得到的NanC蛋白,并探究NanC蛋白體外對(duì)人急性早幼粒白血病細(xì)胞株HL60和人急性單核白血病細(xì)胞株THP-1細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡的影響,并探究NanC蛋白作用機(jī)制。
　　方法:
　　(1)用SDS-PAGE電泳鑒定純化后的NanC蛋白。
　　(2)用MTT法測(cè)定不同劑量NanC蛋白對(duì)HL60細(xì)胞和THP-1細(xì)胞細(xì)胞增殖,并用流式細(xì)胞數(shù)監(jiān)測(cè)Nanc對(duì)細(xì)胞凋亡的影響

2、。
　　(3)采用realtime-PCR和Western blot方法檢測(cè)基因mRNA水平和蛋白水平表達(dá)情況,探究NanC蛋白體外抑制細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用機(jī)制。
　　(4) Western blot方法檢測(cè)NanC蛋白作用涉及到的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。
　　結(jié)果:
　　(1)SDS-PAGE電泳結(jié)果顯示NanC蛋白純度較高。
　　(2)體外抗腫瘤活性研究發(fā)現(xiàn),NanC蛋白體外有良好的抗腫瘤活性,能抑制THP

3、-1細(xì)胞細(xì)胞增殖,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
　　(3)NanC蛋白體外抗腫瘤活性機(jī)制研究發(fā)現(xiàn),NanC蛋白誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用可能通過(guò)激活凋亡相關(guān)基因Bax和下調(diào)Bcl-2基因?qū)崿F(xiàn)。
　　(4)NanC蛋白體外對(duì)腫瘤細(xì)胞活性影響主要通過(guò)NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,能有效調(diào)控p65基因表達(dá)。
　　結(jié)論:
　　(1)NanC蛋白在腫瘤研究領(lǐng)域也有一定作用,體外對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖,細(xì)胞凋亡有顯著作用,并能激活細(xì)胞經(jīng)典凋亡信號(hào)途徑。