卡介苗對(duì)白血病裸鼠抑白血病作用及機(jī)制研究.pdf

1、青島大學(xué)碩士學(xué)位論文卡介苗對(duì)白血病裸鼠抑白血病作用及機(jī)制研究姓名：王媛媛申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：兒科學(xué)（小兒血液與腫瘤）指導(dǎo)教師：孫立榮20090530第二部分卡介苗體外激活淋巴細(xì)胞對(duì)白血病裸鼠殺傷作用的機(jī)制研究目的：腫瘤微小殘留病和多藥耐藥是血液腫瘤治療達(dá)完全緩解后復(fù)發(fā)和導(dǎo)致難治性的主要原因，成為攻克血液腫瘤的難點(diǎn)。研究表明白血病在獲得完全緩解后進(jìn)行免疫治療可提高療效，可提高白血病患兒長(zhǎng)期無(wú)病生存率。本文通過(guò)建立人早幼粒白血病(HL6

2、0)突變株細(xì)胞異種移植模型，探討卡介苗(BCG)抑制白血病裸鼠白血病細(xì)胞生長(zhǎng)的作用及其機(jī)理，為卡介苗臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法：對(duì)8～10周齡的BALB／c裸鼠皮下接種110‘／nilHL60細(xì)胞，建立白血病裸鼠模型。首先經(jīng)rhGMCSF斗瑚L4竹11TNFa(GlT)誘導(dǎo)培養(yǎng)DC，應(yīng)用DC激活淋巴細(xì)胞，再將體外培養(yǎng)的免疫活性細(xì)胞注入裸鼠腫瘤組織內(nèi)，根據(jù)DC激活淋巴細(xì)胞的方式不同分為Groupl：GIT誘導(dǎo)培養(yǎng)DC與淋巴細(xì)胞直接共同孵育

3、；Group2：BCG組(DCBCG淋巴細(xì)胞)；Group3：滅活BCG組(DC滅活BCG淋巴細(xì)胞)；Groul)4：DCBCG淋巴細(xì)胞HL60抗原組，觀察各組裸鼠帶瘤生存情況，采用HE染色觀察白血病細(xì)胞的浸潤(rùn)，采用免疫組化了解免疫細(xì)胞的反應(yīng)及分布。結(jié)果：(1)HL一60細(xì)胞植入裸鼠皮下，5~7天發(fā)現(xiàn)各組裸鼠于體表接種部位形成淡紫紅色的腫塊，并逐漸出現(xiàn)局部及肝臟脾臟浸潤(rùn)(2)裸鼠腫瘤組織內(nèi)接種體外激活的免疫細(xì)胞后，各組均出現(xiàn)不同程度的腫

4、瘤組織壞死現(xiàn)象。(3)免疫活性淋巴細(xì)胞組裸鼠較其他藥物治療組的裸鼠生存時(shí)間延長(zhǎng)約1以天。(4)實(shí)驗(yàn)各組腫瘤組織內(nèi)有大量的炎癥細(xì)胞，壞死組織周圍可見(jiàn)到大量小鼠自身的B淋巴細(xì)胞，Group4組腫瘤組織內(nèi)可見(jiàn)更廣泛的壞死區(qū)域。(5)裸鼠局部組織見(jiàn)CD35、CD45RO及CD8陽(yáng)性細(xì)胞浸潤(rùn)。結(jié)論：l、HL60細(xì)胞較易形成白血病移植裸鼠模型。2、BCG能直接誘導(dǎo)DC成熟，增強(qiáng)其抗原遞呈功能。3、活BCG與滅活BCG有同樣誘導(dǎo)DC成熟的作用。4、經(jīng)