重組人γ-干擾素腺病毒轉(zhuǎn)染的人BMSCs體外抗白血病作用研究.pdf

1、中山大學碩士學位論文重組人γ-干擾素腺病毒轉(zhuǎn)染的人BMSCs體外抗白血病作用研究姓名：李曉青申請學位級別：碩士專業(yè)：腫瘤學指導(dǎo)教師：呂躍20050512碩上論文：重組人Y 一干擾素腺病毒轉(zhuǎn)染的人B M S C s 體外抗白血病作用研究 中文摘要期依賴性的，而且在體細胞，腺病毒D N A 通常不會整合到細胞基因組中，不會產(chǎn)生致畸、致癌等。許多研究直接將裸腺病毒注入移植物體內(nèi)或受體的血液循環(huán)，但腺病毒在體內(nèi)對組織的靶向選擇就會非常困難。特別

2、是將裸腺病毒直接注入血液循環(huán)，當再次注入同樣的載體時，會導(dǎo)致載體特異性免疫反應(yīng)，不僅會降低基因轉(zhuǎn)移的效率，還會導(dǎo)致副作用的發(fā)生，如肝臟毒性等。因此，腺病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移至靶細胞的策略可作為探索基因治療的一種理想選擇。近年來，骨髓基質(zhì)細胞由于其自身的特性，特別是其歸巢特性，已作為一些缸液系統(tǒng)惡性腫瘤基因治療的靶細胞。有人提出了“基質(zhì)細胞基因治療( g e n et h e r a p yo f s t r o m a lc e l l s

3、 ) ”的概念，認為將造血生長因子的基因轉(zhuǎn)入基質(zhì)細胞，使其能分泌微環(huán)境缺損的細胞因子，將它與造血干細胞一起進行骨髓移植，可能加速造血與免疫功能的重建。用基因轉(zhuǎn)染的基質(zhì)細胞修飾造血微環(huán)境更接近造血的生理狀態(tài)，避免了全身應(yīng)用造血因子的副作用，具有明顯的優(yōu)越性。并且由于具有多向分化潛能的B M S C s ，有內(nèi)在的組織相容性，免去了應(yīng)用其他干細胞移植時篩除異抗原的必要，可自體移植，消除了異體移植的復(fù)雜性和免疫源性，并且能廣泛遷移，易與周圍組

4、織整合而發(fā)揮功能，是基因治療中非常有價值的載體細胞。在白血病和一些淋巴瘤等血液腫瘤中，骨髓移植作為一種根治性治療手段就是向供體輸入骨髓細胞，包括骨髓中的基質(zhì)細胞，所以e xv i v o 的基因治療方法特別適用于“基質(zhì)細胞基因治療”在血液系統(tǒng)惡性腫瘤中的應(yīng)用。一些研究表明基因修飾的B M S C s 能夠在體外和體內(nèi)有效地分泌表達具有治療性的多種重組蛋白。因此，我們設(shè)想利用腺病毒介導(dǎo)I F N —Y 基因轉(zhuǎn)移至C M L 患者自體骨髓基

5、質(zhì)細胞，I F N 叫基因修飾的骨髓基質(zhì)細胞回輸體內(nèi)后可歸巢至骨髓并分泌I F N ．Y 發(fā)揮對C M L 的靶向治療作用。本研究的目的：研究重組人I F N 吖腺病毒( A d ／h l F N ．丫) 在C M L 病人骨髓基質(zhì)細胞( 8 M S C s ) 中的轉(zhuǎn)染效率、I F N - Y 表達，并進一步觀察轉(zhuǎn)染A d ／h l F N 叫的骨髓基質(zhì)細胞體外抗白血病細胞株K 5 6 2 增殖和誘導(dǎo)K 5 6 2 細胞凋亡的作用。I