I型單純皰疹病毒絲氨酸蛋白酶VP24逃逸DNA識別受體信號通路的分子機(jī)制.pdf

1、天然免疫系統(tǒng)主要通過模式識別受體識別病毒的入侵，進(jìn)而產(chǎn)生一系列的細(xì)胞因子抵抗病毒的入侵。在DNA病毒感染的宿主細(xì)胞中，病毒的核酸被DNA受體所識別，從而啟動下游信號級聯(lián)反應(yīng)，誘導(dǎo)I型干擾素(type I interferons，IFN-I)、促炎癥細(xì)胞因子(proinflammatory cytokines)等的產(chǎn)生。cGAS(cyclic GMP-AMP synthase)作為DNA識別受體與STING一起激活天然免疫信號通路。研究表

2、明，cGAS結(jié)合DNA后可催化合成cGAMP(cyclic guanosine monophosphate-adenosine monophosphate)，cGAMP作為一種第二信使被STING識別，STING活化后招募TBK1，并進(jìn)一步促進(jìn)IRF3的磷酸化、激活、入核，從而誘導(dǎo)IFN-I的表達(dá)。I型單純皰疹病毒（Herpes simplex virus type I，HSV-1）編碼的VP24是一個由UL26基因編碼的絲氨酸蛋白酶，

3、作為一個必需基因，VP24缺失后，病毒基因組 DNA不能有效包裝入核衣殼內(nèi)，嚴(yán)重影響了子代病毒粒子的成熟。病毒為了完成它們的生活周期，必須主動調(diào)控宿主IFN介導(dǎo)的免疫應(yīng)答。現(xiàn)有研究表明，HSV-1編碼的多個病毒蛋白逃逸宿主的抗病毒天然免疫。
　　本研究發(fā)現(xiàn)VP24是第一個被鑒定到的DNA識別受體信號通路的拮抗劑。發(fā)現(xiàn)VP24對ISD激活的IFN-β mRNA轉(zhuǎn)錄有明顯抑制作用；通過共轉(zhuǎn)染低劑量cGAS和STING或單獨過表達(dá)高劑量

4、STING激活DNA識別受體信號通路，發(fā)現(xiàn)VP24能夠抑制IRF3啟動子激活的IFN-β，但是對NF-κB啟動子激活的IFN-β卻沒有作用；進(jìn)一步的研究我們發(fā)現(xiàn)VP24在TBK1和IRF3之間的信號傳遞中發(fā)揮作用。非變性膠實驗以及IRF3磷酸化實驗表明VP24下調(diào)IRF3的二聚化以及磷酸化，而在敲低了VP24的情況下，IRF3的二聚化及磷酸化得到恢復(fù)。免疫共沉淀結(jié)果證明，在 HSV-1感染細(xì)胞中，VP24能夠影響 TBK1和IRF3的相