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文檔簡介
1、背景和目的:
喉癌是世界范圍內(nèi)常見的頭頸部惡性腫瘤,適當(dāng)?shù)姆派渲委?,代替或?lián)合手術(shù)、化療,可保留器官功能,提高患者生存質(zhì)量,放射抵抗在很大程度上限制了放療應(yīng)用。葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白-1(GLUT-1)的過度表達和PI3K/Akt信號通路的過度激活與喉癌放射抵抗之間存在密切關(guān)系,本文旨在探討通過反義寡核苷酸抑制GLUT-1表達以及特異性抑制PI3K/Akt信號通路對于喉癌Hep-2細胞裸鼠移植瘤的放射增敏作用。
方法:
2、> 采用喉癌Hep-2細胞懸液于裸鼠皮下接種法建立喉癌裸鼠移植瘤模型,隨機分為11組:對照組,GLUT-1 AS-ODN組(GLUT-1 AS-ODN),Ly294002組,LY294002+GLUT-1 AS-ODN組,Wortmannin組,wortmannin+GLUT-1 AS-ODN組,10Gy組,LY294002+10Gy組, wortmannin+10Gy組,LY294002+GLUT-1AS-ODN+10Gy組,wor
3、tmannin+GLUT-1 AS-ODN+10Gy組,觀察并記錄各組移植瘤的體積、重量,計算抑瘤率、放射增敏比值(E/O),采用實時RT-PCR、Westernblotting技術(shù)檢測各組移植瘤組織中GLUT-1、p-Akt、PI3K mRNA與蛋白的表達,Tunel檢測移植瘤組織細胞凋亡。
結(jié)果:
放射治療前反義GLUT-1、Wortmanin、反義GLUT-1+Ly294002、反義GLUT-1+Wortman
4、in能顯著下調(diào)GLUT-1、PI3K、p-Akt mRNA及蛋白的表達(p<0.05),促進喉癌細胞凋亡(p<0.05),抑制腫瘤的生長(p<0.05),而Ly294002表現(xiàn)出顯著的促凋亡作用,腫瘤生長受抑但無統(tǒng)計學(xué)差異。10GyX線照射后,Ly294002、Wortmanin、反義GLUT-1+Ly294002、反義GLUT-1+Wortmanin能顯著增強10Gy X線放射殺傷作用(p<0.05)。Ly294002、Wortman
5、in、反義GLUT-1+Ly294002、反義GLUT-1+Wortmanin的抑瘤率分別為3.4%、53.4%、50.0%、43.5%,E/O值分別為2.7、1.8、1.1、1.8。
結(jié)論:
GLUT-1及PI3K/Akt信號通路的過度激活與喉癌放射抵抗相關(guān),GLUT-1AS-ODN、LY294002、wortmannin能夠增加喉癌放射敏感性,其放射增敏效應(yīng)是通過抑制GLUT-1、PI3K、p-Akt mRNA和
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