腺樣囊性癌臨床病理分析及Glut-1、PI3K-AKT信號通路的表達(dá)和意義.pdf

1、目的：發(fā)生在耳鼻咽喉氣管部位的腺樣囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)極為少見,生長位置較為隱蔽,早期癥狀不典型,早期確診較為困難。與大涎腺的腺樣囊性癌一樣,耳鼻咽喉氣管部位的腺樣囊性癌生長較為緩慢但侵襲性強,常沿神經(jīng)、血管生長,易復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移,手術(shù)與放化療聯(lián)合治療的方法尚達(dá)不到理想的治療效果,預(yù)后極差。不同的病變部位、病理類型,TNM分期、治療方法、切緣等因素差異可直接影響ACC患者的預(yù)后,但影響其預(yù)后的真

2、正原因尚不明了。因此探討腺樣囊性癌浸潤與轉(zhuǎn)移的發(fā)病機制及預(yù)后的相關(guān)因素,尋求新的診斷和治療方法有良好的應(yīng)用前景。隨著免疫學(xué)、分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,從分子水平探討ACC發(fā)生、發(fā)展的機制,對于認(rèn)識ACC的發(fā)病機制、判斷預(yù)后、發(fā)現(xiàn)潛在的治療靶點具有重要意義。ACC與其它惡性腫瘤一樣,惡性細(xì)胞所處的生理環(huán)境能量相對匱乏,呈現(xiàn)局部缺氧狀態(tài),并引起腫瘤細(xì)胞因子的過度表達(dá)。惡性腫瘤細(xì)胞的葡萄糖代謝率較高,這種現(xiàn)象已被正電子發(fā)射計算機斷層(Posi

3、tron emission tomography,PET)檢查所證實,PET／CT也證實ACC中存在此現(xiàn)象。惡性腫瘤細(xì)胞對葡萄糖的代謝率增高與葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白(Glucose transporter protein,Glut)及基因的異常表達(dá)有關(guān),其中葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白-1(Glut-1)在惡性腫瘤細(xì)胞的葡萄糖吸收和轉(zhuǎn)運中起主導(dǎo)作用,Glut-1的異常表達(dá)與多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有關(guān),而PI3K／Akt在Glut-1表達(dá)的調(diào)節(jié)中起重要作用。PI3K

4、／Akt是一種對生長和增殖有重要作用的異二聚體酶,是近年來發(fā)現(xiàn)的生長因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。研究發(fā)現(xiàn)在人類許多腫瘤中都有PI3K-Akt的過度表達(dá)。從惡性腫瘤葡萄糖能量供應(yīng)的層面已有研究發(fā)現(xiàn),PI3K／Akt途徑的激活與Glut-1表達(dá)的增加有關(guān)。我們的前期研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn),Glut-1的異常表達(dá)與頭頸部癌的生物學(xué)行為有關(guān),與頭頸部癌的預(yù)后差有關(guān),可以作為靶向治療的新方法之一,并且我們已通過反義寡脫氧核苷酸技術(shù)阻斷喉癌Hep-2細(xì)胞Glut-1的

5、表達(dá),能抑制喉癌細(xì)胞的葡萄糖吸收的影響及Hep-2細(xì)胞增殖,可能是喉癌治療的一種理想靶標(biāo)。目前,Glut-1在腫瘤發(fā)生機制中的研究,多集中于頭頸部較常見腫瘤類型如鱗狀細(xì)胞癌,而在腺樣囊性癌中Glut-1的表達(dá)情況與臨床生物學(xué)特性的關(guān)系研究較為少見,尤其是腺樣囊性癌中PI3K／Akt信號通路調(diào)控Glut-1表達(dá)的研究更為少見,國內(nèi)尚未見有文獻(xiàn)報道。本課題在前期研究基礎(chǔ)上,從癌細(xì)胞能量供應(yīng)的層面,采用免疫組織化學(xué)方法檢測耳鼻咽喉氣管腺樣囊性

6、癌組織中Glut-1及PI3K和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白的表達(dá),回顧性分析患者的臨床病例特點,探討Glut-1及P13K和p-Akt蛋白表達(dá)與耳鼻咽喉腺樣囊性癌生物學(xué)行為的關(guān)系。
　　 方法：收集1993.1～2010.2期間浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院耳鼻咽喉科收治的14例耳鼻咽喉氣管腺樣囊性癌病例進(jìn)行回顧性分析,觀察臨床病理參數(shù)對患者生存狀態(tài)和預(yù)后的影響。并應(yīng)用免疫組織化學(xué)EliVisionTM法檢測14例耳鼻喉氣管腺樣

7、囊性癌病例以及對照組15例炎性病變(5例鼻息肉組織及10例聲帶息肉)、14例良性腫瘤(5例鼻腔良性神經(jīng)鞘瘤、1例耵聹腺瘤、1例喉部良性軟骨瘤、7例鼻腔內(nèi)翻性乳頭狀瘤)的Glut-1、PI3K和p-Akt的蛋白表達(dá)情況,14例腺樣囊性癌病理學(xué)分類分別為篩孔型、管狀型及實體性,臨床病理學(xué)分期在T1、T2、T3期；顯微鏡下計數(shù)陽性細(xì)胞,結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。采用SPSS15.0軟件,各臨床病理因素的關(guān)系因素及Glut-1、PI3K和p-Akt之

8、間的關(guān)系用x2檢驗、Fisher精確概率法,以α=0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義檢驗水準(zhǔn),相關(guān)性分析采用Kappa檢驗(即一致性檢驗),如果kappa>0.75,提示兩個指標(biāo)的一致性非常好,即相關(guān)性高,kappa值在0.4～0.75之間,兩個指標(biāo)間的一致性中等,kappa<0.4,兩個指標(biāo)間一致性較差。
　　 結(jié)果：⑴14例腺樣囊性癌(ACC)患者,男性6例,女性8例,年齡32～80歲,平均54歲。位于外耳道者4例,鼻腔3例,鼻竇3

9、例,喉部3例,氣管1例。T16例、T25例or T33例,所有患者均未發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。全部患者均行手術(shù)治療,10例患者術(shù)后進(jìn)行了放射治療。本組資料顯示,10例患者術(shù)后進(jìn)行了放射治療,隨訪至今仍分別存活6年9個月(病例1),4年3個月(病例3),15年(病例4),24年(病例5),9年5個月(病例6),5年7個月(病例7),1年5個月(病例9),5年8個月(病例11),6年6個月(病例12),7年(病例14),8例((病例1、3、4

10、、6、9、11、12、14)放射劑量不清,2例放射劑量50Gy。在放射的10例中,接受手術(shù)+放療后2年(病例6)、5年(病例5)出現(xiàn)局部復(fù)發(fā),行多次手術(shù),現(xiàn)1例帶瘤生存(病例6),1例無瘤生存(病例5),其余8例均無復(fù)發(fā),說明放射治療控制局部復(fù)發(fā)有一定效果；3例無術(shù)后放射治療,其中1例隨訪24個月后失訪,1例隨訪半年后失訪,1例隨訪至今存活1年8個月；1例第一次在外院手術(shù)后9個月,在我院再次手術(shù),術(shù)后失訪,有無術(shù)后放療情況不清楚。本組鼻

11、腔.鼻竇及外耳道ACC局部復(fù)發(fā)率高,喉及氣管ACC未見復(fù)發(fā),無頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。⑵14例耳鼻喉氣管腺樣囊性癌組織中Glut-1陽性表達(dá)率為35.7％(5／14),PI3KN性表達(dá)率為28.6％(4／14),p-Akt陽性表率為71.4％(10／14)；對照組:15例炎性病變Glut-1、PI3K和P-Akt均為陰性表達(dá)；14例良性腫瘤中,Glut-1均呈陰性表達(dá),1例PI3K、2例p-Akt呈陽性表達(dá),陽性表達(dá)率分別為7.14％(

12、1／14)；14.3％(2／14)。耳鼻喉氣管腺樣囊性癌組織組Glut-1、PI3K、p-Akt陽性表達(dá)率明顯高于對照組,差異有顯著性(P<0.05,P<0.01)。ACC中Glut-1和PI3K表達(dá)、Glut-1p-Akt表達(dá)、p-Akt和P13K表達(dá),經(jīng)kappa檢驗,kappa值分別為0.186、0.364、0.276,說明Glut-1、PI3K、p-Akt表達(dá)之間相關(guān)一致性較差。
　　 結(jié)論：①鼻腔-鼻竇及外耳道ACC局