2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的: 運(yùn)用磷脂酰肌醇3-激酶抑制劑(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3-K)LY294002[2-(4-嗎啉基)-8-苯基-4氫-1-苯并吡喃-4-酮]作用于胃癌細(xì)胞系SGC7901,探討PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在胃癌細(xì)胞增殖及凋亡中的作用機(jī)制,以及抑制該信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對胃癌細(xì)胞化療敏感性的影響。 方法: 1.采用MTT比色法,流式細(xì)胞術(shù)檢測正常培養(yǎng)組和LX294002處理組,胃癌細(xì)胞

2、SGC7901的抑制率,凋亡率以及對細(xì)胞周期的影響.Westem-blot檢測P-Akt蛋白的表達(dá)水平。 2.采用MTT比色法,流式細(xì)胞術(shù)檢測5-FU、DDP及ADM單獨(dú)或聯(lián)合P13K抑制劑LY294002對人胃癌細(xì)胞SGC7901的抑制率、凋亡率。并分析單獨(dú)及聯(lián)合應(yīng)用LY294002對SGC7901細(xì)胞周期的影響。Western-blot檢測單獨(dú)及聯(lián)合化療藥后P-Akt蛋白在SGC7901細(xì)胞中的表達(dá)水平。 結(jié)果:

3、 1.MTT法示:胃癌細(xì)胞株SGC7901,經(jīng)PI3K阻滯劑LY294002(10μmol/l)作用后,細(xì)胞生長受到抑制,與正常培養(yǎng)組比較,培養(yǎng)24h時(shí)尚無差異,培養(yǎng)48h、72h后差異顯著(P<0.05)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。流式細(xì)胞法及Western blot結(jié)果顯示:阻斷P13K后,胃癌細(xì)胞SGC7901的凋亡率增強(qiáng)、G0/G1期細(xì)胞比例增加并使P-Akt蛋白表達(dá)減弱。與正常培養(yǎng)組比較(P<0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.

4、單獨(dú)使用化療藥5-FU、DDP及ADM均可抑制SGC7901細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)其凋亡。當(dāng)化療藥與抑制劑聯(lián)合應(yīng)用,對細(xì)胞的抑制作用明顯增強(qiáng),促凋亡作用增強(qiáng),與對照組比較(P<0.05)。細(xì)胞周期同步分析顯示,單獨(dú)用藥均可將SGC7901細(xì)胞阻滯于G0/G1期。聯(lián)合使用抑制劑使處于G0/G1期細(xì)胞增加。 3.Western blot顯示化療藥上調(diào)P-Akt蛋白的表達(dá),聯(lián)合使用抑制劑后SGC7901細(xì)胞P-Akt蛋白的表達(dá)與未使用抑制劑比

5、較減弱。(P<0.05)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論: 1.P13K/Akt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在胃癌的進(jìn)展中起重要作用,該信號通路的活化使胃癌細(xì)胞向DNA合成期及有絲分裂期轉(zhuǎn)化,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、抑制凋亡。 2.化療藥5FU、DDP及ADM不同程度上調(diào)胃癌細(xì)胞SGC7901P-Akt蛋白的表達(dá)。 3.聯(lián)合抑制劑LY294002通過下調(diào)SGC7901 P-Akt蛋白的表達(dá),提高化療藥5FU、DDP及ADM對胃癌細(xì)胞株S

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