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文檔簡介
1、目的:
構建單純皰疹病毒1型(Herpes Simplex Virus1,HSV-1)糖蛋白B(Glycoprotein B,gB)和糖蛋白D(Glycoprotein D,gD)的Th細胞表位及B細胞表位重組串聯(lián)核酸疫苗并鑒定其真核表達。
方法:
利用生物信息學分析軟件預測HSV-1 gB和gD的Th細胞表位和B細胞表位,結合已發(fā)表文獻,設計合成HSV-1的Th細胞和B細胞表位重組串聯(lián)抗原基因(Th/B基
2、因)。將Th/B基因定向克隆入真核表達載體pVAX1,構建真核表達質粒p VAX1-Th/B。用制備的質粒轉染COS-7細胞,裂解細胞后經(jīng)Western blot鑒定其蛋白表達。
結果:
預測得到了HSV-1 gB和gD的Th細胞和B細胞表位,成功構建真核表達質粒pVAX1-Th/B,經(jīng)測序確認序列正確。SDS-PAGE分離出相應大小的蛋白表達片段,經(jīng)Western blot鑒定并證實該重組核酸疫苗能夠在體外真核細胞
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