簡介：NGS與ACGH在胚胎植入前遺傳學(xué)篩查中的在胚胎植入前遺傳學(xué)篩查中的應(yīng)用比較研究應(yīng)用比較研究海溧培養(yǎng)類別全日制學(xué)位類型專業(yè)學(xué)位一級學(xué)科專業(yè)類臨床醫(yī)學(xué)二級學(xué)科專業(yè)婦產(chǎn)科學(xué)研究方向胚胎植入前遺傳學(xué)篩查指導(dǎo)教師王曉紅教授（主任醫(yī)師）培養(yǎng)單位唐都醫(yī)院婦產(chǎn)科二O一七年五月UDC618密級公開第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄縮略語表1中文摘要3英文摘要5前言7文獻(xiàn)回顧91非整倍體92高齡婦女103反復(fù)自然流產(chǎn)114反復(fù)胚胎種植失敗125胚胎植入前遺傳學(xué)篩查技術(shù)13正文241研究對象242研究方法243結(jié)果294討論44小結(jié)54參考文獻(xiàn)55附錄64個人簡歷和研究成果78致謝79

簡介：研究目的我們根據(jù)其臨床表型及影像學(xué)資料對150例肢端發(fā)育畸形的患者進(jìn)行分類，初步了解各種表型的發(fā)病情況，并發(fā)現(xiàn)新的肢端發(fā)育畸形。在對150例患者進(jìn)行分類后，我們發(fā)現(xiàn)一例雙足畸形的患兒，我們收集該雙足畸形的家系，并對該家系進(jìn)行全外顯子測序，測序數(shù)據(jù)進(jìn)行多步驟過濾分析，篩選出與雙足畸形相關(guān)的致病基因。方法及內(nèi)容我們收集整理了20002009年就診于天津醫(yī)院骨科的150例肢端發(fā)育畸形患者的臨床病例資料及影像學(xué)資料，并按照下述方法進(jìn)行分類總結(jié)（1）多指（趾）畸形根據(jù)多余指（趾）所在的位置，多指（趾）分為軸前多指（趾）、中央多指（趾）以及軸后多指（趾）。按照ROTTERDAM分類將軸前多指分為八型，其中Ⅳ型又分為五種不同的亞型。軸后多指（趾），根據(jù)其多余指（趾）發(fā)育的成熟度分為A、B兩型A型多指（趾），其多余指（趾）發(fā)育為完全的指骨，而B型多指（趾），多余指（趾）為軟組織包圍的贅生指。（2）并指（趾）畸形其新的分類在TEMTAMY和MCKUSICK的分類基礎(chǔ)上結(jié)合了臨床表型、基因型、分子遺傳學(xué)研究進(jìn)展，將并指分為9型，Ⅰ型又分為AD四種亞型。（3）短指（趾）畸形根據(jù)BELL解剖學(xué)分型，將短指畸形分為AE五型，A型又分為A1A6六種亞型。（4）由于多指（趾）、并指（趾）、短指（趾）等表型可以是一些綜合征的特征性表現(xiàn)，我們可以通過患者是否同時存在其他各器官系統(tǒng)的先天性病變來分析患者是否可能為某一綜合征。（5）對收集到的肢端發(fā)育畸形的患者進(jìn)行分類后，歸納總結(jié)特殊的表型。對150例患者進(jìn)行分類后我們發(fā)現(xiàn)一例雙足畸形的患兒。由于目前只有關(guān)于雙足畸形小鼠模型的報道，而人類的雙足畸形病例（僅累及單側(cè)下肢）尚未見報道，其具體機(jī)制還不清楚，因此我們選取雙足畸形這一肢端畸形為研究對象，收集患者及父母兩代人的全血標(biāo)本，提取外周血基因組DNA，DNA樣品進(jìn)行質(zhì)檢，純化后，應(yīng)用華大基因公司的ILLUMINAHISEQ2000高通量測序平臺以及CG測序平臺進(jìn)行全基因組外顯子的測序。測序數(shù)據(jù)與人類HAPMAP8、DBSNP130、1000GENOMEPROJECT數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對，過濾掉已報道的常見的基因多態(tài)性位點，濾過同義突變，將患者及其父母的單核苷酸非同義突變、插入缺失突變及基因拷貝數(shù)變異的測序數(shù)據(jù)進(jìn)行比對、整合分析，初步篩選出可能的致病基因，然后采用SANGER測序?qū)蜻x基因進(jìn)行驗證。研究結(jié)果1121例患者表現(xiàn)為多指（趾）畸形，40例患者表現(xiàn)為軸后多指（趾），4例表現(xiàn)為單純的中央型多趾，其中兩例患者同時合并軸后多趾；78例患者表現(xiàn)為軸前多指（趾）；1例為左足多足畸形。85例多指畸形中79例為軸前多指，6例為軸后多指；65例多趾畸形中，6例表現(xiàn)為軸前多趾，4例為中央型多趾，56例為軸后多趾。2軸后多指（趾）均為發(fā)育完全的指（趾）骨，為TYPEA型。軸前多指（拇指多指）Ⅱ型22例，Ⅲ型2例，Ⅳ型36例，Ⅴ型2例，Ⅵ型6例，11例由于資料不完善尚無法分型。331例患者表現(xiàn)為并指（趾）畸形，SDⅠ型11例，其中SDⅠC型7例，SDⅠD型4例；SDⅡ（SPD）6例；SDⅢ型4例；SDⅤ型1例；SDⅥ型3例。1例患者34足趾并趾；2例為12足趾并趾；3例為234并指畸形，對上述六例并指畸形患者的表型，目前分類尚無法將其納入其中。4收集到的病例中，短（趾）畸形多存在于并指（趾）或者多指（趾）畸形中。短指（趾）畸形患者5例，其中4例患者同時存在多指（趾）或者并指（趾）畸形。1例為BDA3型，4例無法歸入短指（趾）畸形的分型中。5我們發(fā)現(xiàn)一些特殊的表型（1）雙足畸形，患者左足復(fù)足畸形；（2）SDⅤ型同時合并雙眼距寬、眼球突出、前額寬；（3）軸前多指Ⅱ型合并右位心、孤立腎、左腎缺如；（4）24并指且中節(jié)指骨缺如合并先天性心臟病；（5）雙足軸后多趾合并先天性心臟病；（6）軸前多指Ⅳ型、大魚際肌缺失、上唇唇裂；（7）右手外形短小、25指并指、右上肢長度、周徑較對側(cè)短，同時合并右側(cè)胸廓塌陷。6雙足畸形外顯子測序結(jié)果篩選后，患兒與父母親都不同的錯義突變?yōu)?0個，插入缺失（INDELS）突變?yōu)?4個，與肢端發(fā)育相關(guān)的新發(fā)基因突變有HOXD13和R2，兩個基因發(fā)生了錯義突變。7SANGER測序的結(jié)果患兒母親檢測出與患兒相同的HOXD13基因突變GLY11ALA，患兒父親未檢測到該突變。結(jié)論1多指（趾）畸形為最常見的肢端發(fā)育畸形，累及手指的多指畸形以軸前多指常見，而累及足趾的多趾畸形以軸后多趾常見，中央型多指（趾）最為少見；軸前多指以Ⅳ型最為常見，Ⅱ型次之。并指畸形具有很大的異質(zhì)性，其中SDⅠ型為最常見的表型。短指畸形多合并其他手部畸形而存在，如多指、并指。2我們發(fā)現(xiàn)一些特殊的表型1例左足雙足畸形，1例患者可能為POL綜合征。3我們發(fā)現(xiàn)一例雙足畸形患者，該患者存在HOXD13基因的錯義突變（GLY11ALA）突變，患者母親攜帶相同的突變，卻沒有表現(xiàn)出該表型。

簡介：目的觀察MIMP對炎癥性腸病小鼠的腸道炎癥及腸道微生態(tài)的影響；探究MIMP對炎性細(xì)胞因子的作用效果和調(diào)節(jié)方式，并探討相關(guān)作用機(jī)制。方法（1）將小鼠分為3組DSSMIMP組，DSS組和健康對照組。干預(yù)期間，觀察小鼠體重變化情況，腹瀉、血便、死亡等發(fā)生率，觀察各組小鼠腸道整體情況并制作HE染色切片，觀察腸上皮組織病理學(xué)的改變；利用右旋糖苷異硫氰酸熒光素（FLUESCEINISOTHIOCYANATEDEXTRANFITCDEXTRAN）灌胃，檢測小鼠活體腸道通透性，并利用蛋白質(zhì)印跡（WESTERNBLOT）和實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)REALTIMEQUANTITATIVEPCRQRTPCR檢測各組小鼠腸道上皮中緊密連接蛋白（JAM1OCCLUDINZO1）的表達(dá)水平；利用QRTPCR檢測各組小鼠腸道上皮中炎性細(xì)胞因子IFNΓIL17IL23IL4IL10）的表達(dá)利用16SRRNA測序技術(shù)檢測各組小鼠腸道微生態(tài)的變化情況。（2）利用類小腸上皮細(xì)胞的CACO2細(xì)胞和外周血單核細(xì)胞（PBMCS）在TRANWELLS條件下建立共培養(yǎng)模型，利用脂多糖LIPOPOLYSACIDELPS作為炎癥刺激，利用酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA檢測MIMP在不同濃度及不同孵育時間下對腸道微環(huán)境中炎性細(xì)胞因子IFNΓIL17IL23IL4IL10）的調(diào)節(jié)情況。利用ELISA和QRTPCR檢測TLR4抑制劑對LPS介導(dǎo)的炎性細(xì)胞因子分泌水平的影響，并與MIMP的作用效果相互比較。利用WESTERNBLOT檢測MIMP和TLR4抑制劑對MAPK及NFΚB通路的調(diào)節(jié)情況，并利用雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測MIMP在不同濃度及不同孵育時間下對NFΚB活性影響的變化趨勢。（3）利用WESTERNBLOT檢測MIMP及TLR4抑制劑對由LPS介導(dǎo)的CACO2細(xì)胞整體水平的組蛋白（H3H4）乙酰化的調(diào)節(jié)情況，利用染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)CHIP技術(shù)檢測MIMP在不同濃度及不同孵育時間下對具體水平的IL17及IFNΓ上游啟動子區(qū)域組蛋白（H3H4）乙?；恼{(diào)節(jié)情況；利用QRTPCR檢測MIMP對LPS介導(dǎo)的組蛋白去乙?；窰ISTONEDEACEYLASEHDAC表達(dá)水平的調(diào)節(jié)情況。結(jié)果（1）與DSS組小鼠相比，MIMPDSS組整體情況較好，體重減輕程度輕，腹瀉、便血及死亡發(fā)生率低，疾病活動指數(shù)顯著下降；MIMP不但可以改善腸道整體情況，提高腸道長度P（2）在共培養(yǎng)模型中，MIMP可扭轉(zhuǎn)因LPS引起的炎性細(xì)胞因子的分泌，降低促炎性細(xì)胞因子（IFNΓIL17IL23）的水平，升高抑炎性細(xì)胞因子（IL4IL10）的水平；且MIMP的調(diào)節(jié)存在一定的劑量與時間依賴性，在特定濃度和時間時1NGML12H，MIMP的作用效應(yīng)最為顯著；同時抑制性實驗證實MIMP與TLR4抑制劑具有相同的調(diào)節(jié)炎性細(xì)胞因子的能力；此外，MIMP和TLR4抑制劑均可有效阻斷MAPK及NFΚB通路激活，且隨著MIMP劑量的提高和時間的延長，NFΚB的活性也呈現(xiàn)階梯狀下降趨勢。（3）LPS可使得組蛋白（H3H4）整體水平的乙?；潭忍岣?，而MIMP與TLR4抑制劑干預(yù)可有效降低其乙?；潭龋⒋嬖趧┝恳蕾囆?；在具體水平中，隨著劑量的提高和時間的延長，MIMP可有效降低IL17和IFNΓ上游啟動子區(qū)域組蛋白（H3H4）的乙酰化程度；同時，MIMP還可以顯著上調(diào)部分HDAC的表達(dá)。結(jié)論MIMP可有效改善IBD小鼠的炎癥狀態(tài)及腸屏障功能，顯著下調(diào)促炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，上調(diào)抑炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，并糾正IBD小鼠的腸道微生態(tài)紊亂；MIMP可通過一定劑量和時間依賴的方式調(diào)節(jié)炎性細(xì)胞因子的分泌，并可有效阻斷MAPK及NFΚB信號通路的激活；MIMP可有效降低整體及具體水平的組蛋白乙?；潭龋岣逪DAC的表達(dá)。本研究發(fā)現(xiàn)了MIMP改善腸道炎癥的現(xiàn)象并闡明其相關(guān)機(jī)制，擴(kuò)展了人們對于炎癥治療的認(rèn)識，具有一定的理論創(chuàng)新。

簡介：疼痛是臨床上最常見的癥狀之一，外周組織損傷或疾病產(chǎn)生的疼痛若不及時治療或治療方案和藥物使用不恰當(dāng)，急性疼痛往往發(fā)展成慢性疼痛（持續(xù)時間大于3個月）。慢性痛的形成，需要大量基因共同參與，最近研究報道，慢性神經(jīng)痛大鼠脊髓背根節(jié)上124％的基因表達(dá)上調(diào)而7％的卻下降。這些基因的產(chǎn)物可以長時程地、穩(wěn)定地調(diào)控慢性痛產(chǎn)生所需要的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)適應(yīng)性，而持續(xù)穩(wěn)定地改變基因表達(dá)、可遺傳性，是表觀遺傳調(diào)控兩個最主要特征。我們以往的工作表明，持續(xù)痛環(huán)境下，眾多表觀遺傳標(biāo)志蛋白表達(dá)發(fā)生了改變，并伴隨大量基因表達(dá)的變化。因此，我們提出假設(shè)，表觀遺傳調(diào)控的基因轉(zhuǎn)錄活性變化介導(dǎo)了慢性痛的產(chǎn)生和維持。然而，在持續(xù)疼痛的環(huán)境下，疼痛相關(guān)的中樞神經(jīng)組織和系統(tǒng)，表觀遺傳標(biāo)志物和基因表達(dá)模式發(fā)生了何種變化，這些表觀遺傳標(biāo)志物如何調(diào)控了這些基因表達(dá)變化，及其如何貢獻(xiàn)于慢性痛的形成，尚不明朗。疼痛誘導(dǎo)的表觀遺傳學(xué)改變是一個可逆過程，因此，理論上恢復(fù)疼痛處理系統(tǒng)中異常的表觀遺傳形態(tài)，會解除疼痛，抑制慢性痛的形成。越來越多的研究集中在識別和制定新的藥物，主要是針對轉(zhuǎn)錄機(jī)制中可以扭轉(zhuǎn)疼痛帶來的表觀遺傳變化的調(diào)控元件。眾多作用于表觀遺傳修飾系統(tǒng)的化合物可以有效地對抗癌癥細(xì)胞，如組蛋白去乙?；敢种苿┊惲u肟酸SAHA，也稱沃雷諾司，已通過美國FDA批準(zhǔn)。表觀遺傳療法用于癌癥的初步成效為類似的方法解決慢性痛做好了準(zhǔn)備，這是有別于傳統(tǒng)疼痛癥狀治療的新方法?；谝陨咸岢龅膯栴}，本研究聯(lián)合運(yùn)用生物化學(xué)、分子生物學(xué)、免疫組織化學(xué)、電生理學(xué)、病毒和行為學(xué)等技術(shù)手段研究慢性痛環(huán)境下，中樞神經(jīng)系統(tǒng)表觀遺傳調(diào)控的基因表達(dá)活性改變?nèi)绾呜暙I(xiàn)于慢性痛產(chǎn)生，在此基礎(chǔ)上提出緩解疼痛的可能方案。本研究主要發(fā)現(xiàn)1持續(xù)炎性狀態(tài)下，組蛋白乙?；{(diào)控的BDNF表達(dá)增加，通過激活TRKB，經(jīng)過PLCPKC信號通路啟動中縫大核NRM中GLUA1亞基的突觸轉(zhuǎn)移，產(chǎn)生慢性疼痛行為。2HDAC抑制劑增加GAD65活性，恢復(fù)GABA突觸的抑制功能，并減輕痛敏行為。我們進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，BDNFTRKB信號通路調(diào)節(jié)的GAD65在突觸末端聚集，對HDAC抑制劑誘導(dǎo)的鎮(zhèn)痛中具有至關(guān)重要的作用。3神經(jīng)損傷狀態(tài)下HDAC抑制劑表觀遺傳上調(diào)神經(jīng)生長因子NGF表達(dá)，后者通過TRKAPLCIP3CAMKⅡ信號通路介導(dǎo)D（Δ阿片受體）突觸遷移。Δ阿片受體激動劑與HDAC藥物聯(lián)合使用緩解疼痛行為。4阿片類藥物在鎮(zhèn)痛的同時，可產(chǎn)生強(qiáng)烈的獎賞效應(yīng)，從而導(dǎo)致藥物濫用和成癮的風(fēng)險。過去一直認(rèn)為疼痛誘導(dǎo)的負(fù)向情緒可以抑制藥物濫用，本研究卻發(fā)現(xiàn)，疼痛增加了嗎啡獎賞效應(yīng)，降低嗎啡產(chǎn)生獎賞效應(yīng)的閾值。慢性痛模型的小鼠大腦中央杏仁核CEA，組蛋白二甲基化轉(zhuǎn)移酶G9A的表達(dá)發(fā)生明顯下調(diào)，繼而降低了眾多疼痛相關(guān)基因啟動子上的組蛋白二甲基化水平，使得這些基因的轉(zhuǎn)錄活性增加。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，G9A表達(dá)下調(diào)是通過MECP2調(diào)控的表觀遺傳學(xué)機(jī)制。此外，MECP2可實現(xiàn)特異性調(diào)控谷氨酸神經(jīng)元的活性。我們在表觀遺傳水平揭示了MECP2G9ABDNF通路介導(dǎo)疼痛對阿片獎賞效應(yīng)易化的分子機(jī)制。本研究主要從表觀遺傳角度，揭示慢性痛環(huán)境下，神經(jīng)環(huán)路產(chǎn)生不良適應(yīng)性的分子生物學(xué)基礎(chǔ)，闡明其在慢性疼痛形成和維持中的作用，為理解慢性痛的頑固性提供了全新的視角。

簡介：分類號教育碩士專業(yè)學(xué)位論教育碩士專業(yè)學(xué)位論文題目目以“中心法則”以“中心法則”核心概念核心概念為主線的為主線的遺傳學(xué)專題遺傳學(xué)專題復(fù)習(xí)教學(xué)設(shè)計復(fù)習(xí)教學(xué)設(shè)計TITLETHETEACHINGDESIGNOFTHEGEICTOPICREVIEWBASEDONTHEKEYCONCEPTMAINLINEOF“CENTRALDOGMA”學(xué)科專業(yè)業(yè)學(xué)科教學(xué)學(xué)科教學(xué)生物生物作者姓名名程婷導(dǎo)師及職導(dǎo)師及職稱稱聶劉旺聶劉旺教授教授論文提交日期論文提交日期2013年11月授予學(xué)位日期授予學(xué)位日期現(xiàn)工作單現(xiàn)工作單位位蕪湖市火龍崗中學(xué)蕪湖市火龍崗中學(xué)安徽師范大學(xué)學(xué)位評定委員會辦公安徽師范大學(xué)學(xué)位評定委員會辦公室本論文經(jīng)答辯委員會全體委員審查，確認(rèn)符合安徽師范大學(xué)碩士學(xué)位論文質(zhì)量要求。答辯委員會簽名主席工作單位、職稱委員導(dǎo)師

簡介：第一章中國大陸地區(qū)中小學(xué)學(xué)生脊柱側(cè)凸的患病率系統(tǒng)評價和META分析目的通過系統(tǒng)評價及META分析的方法探討中國大陸地區(qū)中小學(xué)學(xué)生中脊柱側(cè)凸的患病率。方法電子檢索網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫PUBMED，SCOPUS，CNKI，萬方及維普數(shù)據(jù)庫，檢索時間為各個數(shù)據(jù)庫建庫至2014年3月1日。以“脊柱側(cè)凸”、“脊柱側(cè)彎”、“SCOLIOSIS”和“流行病學(xué)”、“患病率”、“發(fā)病率”、“普查”、“PREVALENCE”、“INCIDENCE”、“EPIDEMIOLOGY”為字詞，并通過布爾邏輯算符“”連接。根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)對文獻(xiàn)進(jìn)行篩選，并根據(jù)質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)對文獻(xiàn)進(jìn)行質(zhì)量評價。META分析采用STATA120STATACP，COLLEGESTATION，TX軟件進(jìn)行分析。結(jié)果根據(jù)檢索策略，初始檢索共檢索出427篇文獻(xiàn)，其中PUBMED71篇，SCOPUS77篇，萬方49篇，CNKI194篇，維普36篇。經(jīng)過瀏覽標(biāo)題，根據(jù)納入及排除標(biāo)準(zhǔn)，最終納入38篇文獻(xiàn)，共34項研究。在納入34項研究中，脊柱側(cè)凸患病率報道范圍為011％至264％，META分析結(jié)果顯示中國大陸中小學(xué)生脊柱側(cè)凸患病率為102％95％CI，085118，其中34項研究報道了特發(fā)性脊柱側(cè)凸的患病率，META分析結(jié)果顯示中國大陸中小學(xué)生特發(fā)性脊柱側(cè)凸患病率為093％95％CI072114。亞組分析顯示脊柱側(cè)凸在男性及女性中的患病率分別為087％95％CI，072103和122％95％CI，101142。女性患病與男性患病比率為15495％CI，135174，女性患者明顯多于男性患者P＜001。COBB角在1020，2040，大于40中的三組患病率分別為074％95％CI，057091133‰95％CI104161和025‰95％CI017032。510歲，1114歲和1520歲三個年齡段人群患病率分別為073％95％CI055090097％95％CI075119和114％95％CI086142。結(jié)論中國大陸地區(qū)中小學(xué)脊柱側(cè)凸患病率為102％，IS患病率為093％。COBB角度在1020，2040，40以上的患病率分別為074％，133‰，025‰。女性患病率明顯高于男性，比率約為154。隨著年齡增加，脊柱側(cè)凸患病率上升。第二章基因多態(tài)性與特發(fā)性脊柱側(cè)凸易感性的META分析目的通過系統(tǒng)評價及META分析的方法探討基因多態(tài)性MTNR1BMELATONINRECEPT1BRS4753426MATN1MATRILIN1GENERS1149048CHL1CLOSEHOMOLOGUEOFL1RS10510181VDRVITAMINDRECEPTBSMⅠESRESTROGENRECEPTXBAⅠPVUⅡIGF1INSULINLIKEGROWTHFACT1RS5742612LBX1LADYBIRDHOMEOBOXHOMOLOG1RS11190870MMP3MATRIXMETALLOPEPTIDASE3RS3025058和IL6INTERLEUKIN6，RS1800795與特發(fā)性脊柱側(cè)凸易感性的相關(guān)性。方法電子檢索網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫西文數(shù)據(jù)庫PUBMED，SCOPUS，中文數(shù)據(jù)庫CNKI，萬方及維普數(shù)據(jù)庫，檢索時間為各個數(shù)據(jù)庫建庫至2014年3月1日。以“脊柱側(cè)凸”、“脊柱側(cè)彎”、“SCOLIOSIS”和“基因”、“基因多態(tài)性”、“GENE”和“GENEPOLYMPHISM”為字詞，并通過布爾邏輯算符“”連接。根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)對文獻(xiàn)進(jìn)行篩選。META分析采用STATA120STATACP，COLLEGESTATION，TX軟件或者REVMAN51軟件進(jìn)行分析。結(jié)果根據(jù)檢索策略，初始檢索共檢索出2989篇文獻(xiàn)，其中PUBMED860篇，SCOPUS1482篇，萬方147篇，CNKI278篇，維普131篇。經(jīng)過瀏覽標(biāo)題，根據(jù)納入及排除標(biāo)準(zhǔn)，最終納入36篇文獻(xiàn)。META分析結(jié)果顯示RS1149048位點等位基因G和VDR基因BSMⅠ位點等位基因A攜帶者患IS的危險性分別高于等位基因AI1295％CI，102124和等位基因G15795％CI，125198的攜帶者。RS11190870等位基因C攜帶者患IS的危險性低于等位基因T06395％CI，054073的攜帶者，但此相關(guān)性僅存在與女性患者中06195％CI，056065。其他基因多態(tài)性位點未發(fā)現(xiàn)與IS易感性有關(guān)。結(jié)論本研究發(fā)現(xiàn)MATN1RS1149048，VDRBSMⅠ和LBX1RS11190870三個多態(tài)性位點與IS易感性有關(guān)。第三章全椎弓根螺釘，鉤及釘鉤混合系統(tǒng)治療青少年特發(fā)性脊柱側(cè)凸的效果比較網(wǎng)絡(luò)META分析及系統(tǒng)評價目的通過META分析及網(wǎng)絡(luò)META分析的方法系統(tǒng)評價全椎弓根螺釘，鉤及釘鉤混合系統(tǒng)治療青少年特發(fā)性脊柱側(cè)凸的效果。方法電子檢索網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫西文數(shù)據(jù)庫PUBMED，SCOPUS，中文數(shù)據(jù)庫CNKI，萬方及維普數(shù)據(jù)庫，檢索時間為各個數(shù)據(jù)庫建庫至2014年3月1日。以“脊柱側(cè)凸”、“脊柱側(cè)彎”、“SCOLIOSIS”和“椎弓根螺釘”、“椎弓根鉤”、“釘鉤混合系統(tǒng)”、“PEDICLESCREW”，“HOOK”和“HYBRID”為字詞，并通過布爾邏輯算符“”連接。根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)對文獻(xiàn)進(jìn)行篩選，根據(jù)文獻(xiàn)評價方法對納入文獻(xiàn)進(jìn)行評價。META分析采用STATA120STATACP，COLLEGESTATIONTX或者REVMAN51軟件進(jìn)行分析，網(wǎng)絡(luò)META分析采用WINBUGS14軟件，序貫分析采用TSA軟件TSA09BETA進(jìn)行分析。結(jié)果根據(jù)檢索策略，初始檢索共檢索出2985篇文獻(xiàn)，其中PUBMED398篇，SCOPUS1796篇，萬方231篇，CNKI325篇，維普235篇。經(jīng)過瀏覽標(biāo)題，最終納入文獻(xiàn)37篇。在矯正主彎COBB角度方面，直接META分析和網(wǎng)絡(luò)META分析結(jié)果均提示椎弓根螺釘系統(tǒng)治療青少年特發(fā)性脊柱側(cè)AIS凸優(yōu)于釘鉤混合系統(tǒng)和全椎弓根鉤系統(tǒng)，釘鉤混合系統(tǒng)優(yōu)于全椎弓根鉤系統(tǒng)。在矯正AVT，AVR，LIV傾斜角方面，直接META分析和網(wǎng)絡(luò)META分析結(jié)果均提示椎弓根螺釘系統(tǒng)治療AIS優(yōu)于釘鉤混合系統(tǒng)和全椎弓根鉤系統(tǒng)，釘鉤混合系統(tǒng)優(yōu)于全椎弓根鉤系統(tǒng)。在術(shù)中出血量方面，直接META分析和網(wǎng)絡(luò)META分析結(jié)果均提示椎弓根螺釘系統(tǒng)治療AIS低于釘鉤混合系統(tǒng)和全椎弓根鉤系統(tǒng)，釘鉤混合系統(tǒng)低于全椎弓根鉤系統(tǒng)。在融合節(jié)段方面，直接META分析和網(wǎng)絡(luò)META分析結(jié)果均未發(fā)現(xiàn)三者之間有統(tǒng)計學(xué)差異。在手術(shù)時間方面，直接META分析未發(fā)現(xiàn)三者之間有統(tǒng)計學(xué)差異，但是網(wǎng)絡(luò)META分析結(jié)果提示椎弓根螺釘系統(tǒng)治療AIS低于釘鉤混合系統(tǒng)和全椎弓根鉤系統(tǒng)，釘鉤混合系統(tǒng)低于全椎弓根鉤系統(tǒng)。結(jié)論1在治療AIS的三種不同系統(tǒng)中間，全椎弓根螺釘系統(tǒng)在矯正主彎COBB角度AVT，AVR，LIV傾斜角方面優(yōu)于釘鉤混合系統(tǒng)和全椎弓根鉤系統(tǒng)，術(shù)中出血量和手術(shù)時間均低于釘鉤混合系統(tǒng)和全椎弓根鉤系統(tǒng)。2釘鉤混合系統(tǒng)在矯正主彎COBB角度，AVT，AVR，LIV傾斜角方面優(yōu)于全椎弓根鉤系統(tǒng)，術(shù)中出血量和手術(shù)時間均低于全椎弓根鉤系統(tǒng)。

簡介：脊柱側(cè)凸是指患者在站立位下，冠狀位側(cè)方彎曲超過10°的三維畸形，是臨床中最為常見和復(fù)雜的畸形，不僅因為其致畸致殘率高，手術(shù)難度大，更有大量患者伴隨有其他畸形而給臨床診斷和治療造成困難。研究與脊柱側(cè)凸相關(guān)的綜合征是理解和認(rèn)識脊柱畸形致病機(jī)理的重要手段。通過既往的探索和發(fā)現(xiàn)提示HEDGEHOG通路與可能與脊柱畸形以及與脊柱畸形伴隨的其他畸形共同相關(guān)，但仍存在著許多未解決的問題1、由于缺乏大規(guī)模脊柱畸形隊列研究，對于脊柱畸形和其他伴隨畸形的潛在相關(guān)性仍不十分清楚2、既往的文獻(xiàn)較少報道HEDGEHOG通路基因致病導(dǎo)致的脊柱畸形報道，或缺乏專業(yè)性的描述，為脊柱畸形的機(jī)制研究帶來許多困難3、關(guān)于HEDGEHOG通路相關(guān)基因，近年來既有與先天性脊柱側(cè)凸的報道，又有與特發(fā)性脊柱側(cè)凸的報道，兩者是否有內(nèi)在關(guān)聯(lián)仍不清楚。因此，將試圖通過遺傳學(xué)角度，對HEDGEHOG通路基因在脊柱側(cè)凸中扮演的角色進(jìn)行進(jìn)一步探討和研究。目的與方法1、通過大規(guī)模脊柱側(cè)凸臨床隊列，尋找脊柱側(cè)凸，特別是先天性脊柱側(cè)凸與其伴隨畸形的潛在相關(guān)性2、通過外顯子捕獲測序技術(shù)，收集和設(shè)計以HEDGEHOG通路相關(guān)基因為主的捕獲芯片，嘗試發(fā)掘和明確HEDGEHOG信號通路基因突變對先天性脊柱側(cè)凸人群的貢獻(xiàn)率，并進(jìn)行必要的基因型表型分析。3、基于前期對HEDGEHOG通路相關(guān)基因AKAP2在特發(fā)性脊柱側(cè)凸中的報道，驗證大規(guī)模漢族特發(fā)性脊柱側(cè)凸人群中AKAP2基因突變的貢獻(xiàn)。結(jié)果1、在356例先天性脊柱側(cè)凸患者中，565％的患者伴隨有其他系統(tǒng)畸形。其中以脊髓神經(jīng)管畸形最為多見，心臟畸形次之。與單純CS相比，合并有其他畸形的患者脊柱畸形的表型更為復(fù)雜，受累節(jié)段更多。2、伴隨或單純伴隨有心臟畸形患者，其脊柱在下胸段受累更為常見，與單純CS的患者相比，具有明確的統(tǒng)計學(xué)差異。3、通過設(shè)計HEDGEHOG通路相關(guān)基因捕獲芯片，在285例CS患者中進(jìn)行測序分析，發(fā)現(xiàn)12例患者攜帶有高致病性HEDGEHOG通路相關(guān)基因突變。4、通過進(jìn)一步的生物信息學(xué)分析與既往文獻(xiàn)報道，認(rèn)為PTCH2PR525Q，PI1028TPTCH1PV1094M以及GLI3PP1093L，PR863C錯義突變可能是患者的側(cè)凸及伴隨的多發(fā)畸形的致病基因，上述患者的脊柱畸形表現(xiàn)具有一定的共同點。5、對125例特發(fā)性脊柱側(cè)凸患者進(jìn)行AKAP2基因SANGER測序，發(fā)現(xiàn)一例患者攜帶RS765223801突變可能是其致病基因。該患者除脊柱側(cè)凸外還伴有室間隔缺損。結(jié)論1、脊柱側(cè)凸常與其他系統(tǒng)畸形共同出現(xiàn)，且脊柱畸形與其他系統(tǒng)畸形可存在一定的相關(guān)性。2、HEDGEHOG通路相關(guān)基因突變可能在脊柱側(cè)凸（包括CS和IS）及其他多系統(tǒng)畸形中扮演重要作用。

簡介：111111111IIUIIIIII111Y3277473京協(xié)彳口嚼學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)學(xué)生畢業(yè)論文八年制繇目錄中文摘要。1ABSTRACT第1章引言4第2章實驗材料521研究對象522主要實驗試劑523主要實驗儀器624分析軟件6第3章實驗方法731DNA的提取一732全外顯子測序833生物信息學(xué)分析934交叉對比一1235SANGEJ‘測序驗證12第4章實驗結(jié)果1541DNA的提取1542全外顯子測序～15413生物信息學(xué)分析1744交叉對比1945SANGEL’測序驗證20第5章討論2251遺傳模式2252單基因致病性分析2353結(jié)論2554小結(jié)與展望25第6章參考文獻(xiàn)。26綜述陰道斜隔綜合征的病因?qū)W研究進(jìn)展29至5謝。34附錄生殖道畸形分子遺傳學(xué)研究參與者知情同意書35

簡介：1圳㈣?LII||㈣㈣Ⅲ|L_II』Y3244942分類號R1S密級單位代碼學(xué)號南京醫(yī)科犬掌博士學(xué)位論文題目墜籃曼擔(dān)差胞處掛拉固王堂佳變是生置癌曼盛性的羞璧性丞擔(dān)羞邊能堂玨窺學(xué)科專業(yè)鱟盎復(fù)盒星里生堂學(xué)院名稱煎基醫(yī)牡盤堂盆基衛(wèi)生堂醫(yī)完成時間三Q二±壘五月㈣㈣II|II?㈣洲刪咖㈣Y3244942南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除了文中特別加以標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。作者簽名吳娟導(dǎo)師簽名菇杉日期A口L7年6月』日日期矽／聲∥月／日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南京醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于請在以下相應(yīng)方框內(nèi)打“√”1、保密口，在一年解密后適用本授權(quán)書。2、不保密吖作者簽名吳稿導(dǎo)師簽名EE，／月．月6移脾儼口，捫W期期

簡介：近幾年來，隨著合成生物學(xué)科的不斷發(fā)展，各種新的生物學(xué)技術(shù)也應(yīng)運(yùn)而生。其中，光遺傳學(xué)技術(shù)已經(jīng)成為蓬勃發(fā)展的領(lǐng)域，通過構(gòu)建工程化的光感受器，來控制活細(xì)胞和生物體的生命行為。選擇染色體基因整合系統(tǒng)MINITN7將藍(lán)光響應(yīng)系統(tǒng)整合到銅綠假單胞菌株P(guān)AO1中。將基因整合到染色體，比起質(zhì)?？寺∠到y(tǒng)來說，在細(xì)菌中具有更強(qiáng)的穩(wěn)定性，因為不會出現(xiàn)類似質(zhì)粒丟失的情況。另外，MINITN7系統(tǒng)與其他的轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)相比，具有更高的轉(zhuǎn)化率和特定的結(jié)合位點，不會發(fā)生插入到基因組任意位置中的情況。本論文中提及的構(gòu)建的PDAWNTN7光控系統(tǒng)為在銅綠假單胞菌中時空性控制基因表達(dá)提供了強(qiáng)有力的支持，也可以達(dá)到精準(zhǔn)控制銅綠假單胞菌生物學(xué)行為的要求。通過在光控系統(tǒng)中引入報告基因SFGFP綠色熒光蛋白，可以觀測到藍(lán)光光感受器在銅綠假單胞菌中光誘導(dǎo)基因～20倍的表達(dá)。很多持續(xù)性的細(xì)菌感染都是由生物膜引起的。一個典型的例子是在遺傳性疾病囊性纖維化患者中，由銅綠假單胞菌生物引起的毀滅性的肺部感染，一旦銅綠假單胞菌定殖于囊性纖維化肺，形成生物膜，即使是最具侵襲性的抗生素治療也不能根除所有細(xì)菌。本研究中，在光控系統(tǒng)中引入PA2133這一功能蛋白后，可以抑制銅綠假單胞菌生物膜的形成。這是由于PA2133基因中含有EAL結(jié)構(gòu)域，這一結(jié)構(gòu)域表達(dá)的蛋白作用相當(dāng)于磷酸二酯酶，磷酸二酯酶可以降解CDIGMP，CDIGMP刺激生物膜中粘性物質(zhì)和胞外聚合物的生物合成，而降解后引起細(xì)菌的分離，從而PA2133的過量表達(dá)可以引起生物膜的降解。由此，本論文為生物膜的防治提供了一種新的思路。

簡介：目的MYH9相關(guān)綜合征MYH9RD是MYH9基因突變導(dǎo)致的，具有耳聾、腎炎、白內(nèi)障或凝血障礙等一種或多種臨床癥狀的遺傳病。因MYH9RD屬于罕見病，它的血象與特發(fā)性血小板減少性紫癜ITP相似，醫(yī)院常將MYH9RD誤診為ITP，做不必要的激素治療甚至是脾切除手術(shù)。因此對疑似MYH9RD患者進(jìn)行基因診斷十分必要。本研究通過MYH9基因測序，從基因水平上對誤診為ITP的一家系患者作出確診，找到致病突變并分析基因型與表型的關(guān)系，對家系患者進(jìn)行遺傳學(xué)分析。方法采集家系患者和健康對照者外周血，檢測血常規(guī)。分別用光學(xué)顯微鏡和透射電鏡觀察患者中性粒細(xì)胞、血小板及其細(xì)胞器的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點。根據(jù)NCBI參考序列設(shè)計PCR擴(kuò)增MYH9蛋白編碼區(qū)的引物，對MYH9基因序列和突變片段進(jìn)行一代測序、克隆測序和酶切實驗，確定突變位點和類型。并進(jìn)行線粒體全基因組測序?qū)ふ壹膊∠嚓P(guān)SNP。最后使用計算軟件預(yù)測突變蛋白對機(jī)體的影響和序列保守性分析。結(jié)果8名家系患者的血常規(guī)檢測有“巨大血小板、血小板數(shù)量減少和中性粒細(xì)胞含包涵體”的MYH9RD三聯(lián)征，其中一人的血小板數(shù)量在正常值的下限內(nèi)（122109L）?；颊哂衅つw易挫傷、紫癜消退緩慢等癥狀，但臨床表現(xiàn)略有不同。基因測序結(jié)果表明，家系所有8例患者的MYH9基因C5803DELG雜合缺失，導(dǎo)致移碼突變，造成非肌肉肌球蛋白重鏈ⅡANMMHCⅡA的羧基端非螺旋尾部的蛋白截短，共涉及26個氨基酸變異（PALA1935PROFS13）。而家系內(nèi)和非家系健康人均無此突變。透射電鏡結(jié)果顯示，患者的血小板內(nèi)細(xì)胞器含量差異大，其中開發(fā)管道數(shù)量與血小板體積成比例增加。PROVEAN軟件預(yù)測變異蛋白對機(jī)體有害（SCE367＜25），MUTATIONTASTER計算表明變異區(qū)域的氨基酸序列在哺乳動物中是部分保守，預(yù)測變異能引起疾病。結(jié)論在有8名患者的家系中，C5803DELG突變與疾病共分離，是該家系患者的致病突變。NMMHCⅡA的異常磷酸化可能是導(dǎo)致MYH9RD患者血小板一直處于激活狀態(tài)的重要原因?；颊叩呐R床表現(xiàn)支持國際上對MYH9基因型與表型關(guān)系的研究結(jié)論發(fā)生在NMMHCⅡA蛋白羧基端尾部的突變產(chǎn)生的癥狀較輕。預(yù)計患者不會出現(xiàn)嚴(yán)重的腎病、白內(nèi)障或耳聾，但不排除老年期發(fā)病的可能。該突變PALA1935PROFS13是一個新發(fā)現(xiàn)的突變，國際上尚未見報道。

簡介：學(xué)校代碼10459學(xué)號或申請?zhí)?01422443676密級公開專業(yè)碩士學(xué)位論文常染色體隱性遺傳早發(fā)性帕金森病2例家系分子遺傳學(xué)研究作者姓名張瑞導(dǎo)師姓名楊偉民教授專業(yè)學(xué)位名稱神經(jīng)病學(xué)培養(yǎng)院系第一臨床學(xué)院完成時間2017年5月原創(chuàng)性聲明創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者日期年月日學(xué)位論文使用授權(quán)聲明學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的論文及相關(guān)的職務(wù)作品，知識產(chǎn)權(quán)歸屬鄭州大學(xué)。根據(jù)鄭州大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)鄭州大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或者其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。本人離校后發(fā)表、使用學(xué)位論文或與該學(xué)位論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時，第一署名單位仍然為鄭州大學(xué)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。學(xué)位論文作者日期年月日

簡介：分類號UDC密級編號角方霜糾大摩博士學(xué)位論文遺傳變異與神經(jīng)母細(xì)胞瘤易感性、預(yù)后關(guān)系的分子流行病學(xué)研究MOLECULAREPIDEMIOLOGICALSTUDYONTHEASSOCIATIONOFGENETICVARIATIONSWITHNEUROBLASTOMASUSCEPTIBILITYANDPROGNOSIS導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型論文提交日期張焯榮封志純兒科學(xué)在職博士2017年5月7日Ⅲ9MⅢ1Ⅲ4仆MJ■■_㈣8㈣23ⅢY博士學(xué)位論文遺傳變異與神經(jīng)母細(xì)胞瘤易感性、預(yù)后關(guān)系的分子流行病學(xué)研究背景博士研究生張焯榮指導(dǎo)教師封志純教授摘要神經(jīng)母細(xì)胞瘤NEUROBLASTOMA，NB是嬰幼兒最常見的惡性腫瘤，可發(fā)生在交感神經(jīng)系統(tǒng)的任何部位，預(yù)后極差，且容易遺留慢性健康問題，大大降低患者的生活質(zhì)量。NB的病因及發(fā)展過程極其復(fù)雜，具體的發(fā)病機(jī)制至今未明，因而缺乏有效的預(yù)防和治療手段。既往的5個主要在歐裔人群中開展的全基因組關(guān)聯(lián)研究GENOMEWIDEASSOCIATIONSTUDYGWAS發(fā)現(xiàn)CASCL5、BARDL、LM01、DUSPL2、DDX4、IL31RA、HSDL7812、LIN28B和HACEL基因的23個單核苷酸多態(tài)性SINGLENUCLEOTIDEPOLYMORPHISM，SNP與NB易感性和預(yù)后相關(guān)，但亞洲范圍內(nèi)的相關(guān)研究尚未見報道。目的通過對NB患者及健康人的23個SNP基因型差異進(jìn)行分析，了解遺傳變異與NB易感性、預(yù)后的相關(guān)性，為形成針對中國漢族人群NB的新型靶向診療方案提供理論依據(jù)。方法

簡介：第一部分、廣西人群Β珠蛋白基因15個STR基因座的遺傳多態(tài)性研究目的研究與Β珠蛋白（ΒGLOBIN，HBB）基因緊密連鎖的15個短串聯(lián)重復(fù)序列SHTTEMREPEAT，STR基因座在廣西人群中的遺傳多態(tài)性，為建立Β地中海貧血胚胎植入前遺傳學(xué)診斷PREIMPLANTATIONGEICDIAGNOSIS，PGD的單體型分析技術(shù)PREIMPLANTATIONGEICHAPLOTYPING，PGH提供實驗依據(jù)。方法采集廣西地區(qū)150名無關(guān)個體的外周靜脈血，提取外周血基因組DNA，通過熒光PCR技術(shù)擴(kuò)增與Β珠蛋白基因緊密連鎖距離HBB基因＜1MB的15個STR基因座HBB4506、D11S988、HBB4677、D11S2362、HBB5089、D11S1243、HBB5138、HBB5178、HBB5205、D11S1760、HBB5576、HBB5655、HBB5820、HBB5859、D11S1338），擴(kuò)增產(chǎn)物使用ABI3500DX遺傳分析儀進(jìn)行毛細(xì)管電泳，結(jié)果用GENEMAPER41軟件進(jìn)行分析。最后利用MICROSOFTEXCEL軟件計算15個HBBSTR基因座的等位基因頻率分布以及多態(tài)信息量POLYMPHISMINFMATIONCONTENT，PIC等。結(jié)果在這15個HBBSTR基因座（HBB4506、D11S988、HBB4677、D11S2362、HBB5089、D11S1243、HBB5138、HBB5178、HBB5205、D11S1760、HBB5576、HBB5655、HBB5820、HBB5859、D11S1338上分別檢出18、24、22、11、18、27、13、13、16、23、22、16、17、18和7個等位基因，等位基因頻率從0003333到0383333不等。這15個HBBSTR基因座的多態(tài)信息量PIC分別為08457、08983、08931、07592、08698、09046、07940、07925、07708、09102、08583、08467、07438、08366和07704。這15個基因座的PIC均＞07000，平均值為08329，其中PIC＞08500的HBBSTR基因座有6個。結(jié)論本研究檢測的這15個HBBSTR基因座在廣西人群中的多態(tài)信息量PIC較高，具有高度的遺傳多態(tài)性，在建立Β地中海貧血胚胎植入前遺傳學(xué)診斷PGD的單體型分析PGH技術(shù)中具有較高的應(yīng)用價值，為后續(xù)工作的開展提供了實驗依據(jù)。第二部分、Β地中海貧血胚胎植入前遺傳學(xué)診斷中不同診斷方法的比較目的對Β地貧PGD中兩種遺傳學(xué)診斷方法反向點雜交REVERSEDOTBLOT，RDB結(jié)合STR單體型分析技術(shù)與二代測序NEXTGENERATIONSEQUENCING，NGS技術(shù)，從診斷時間、確診率、費(fèi)用等方面進(jìn)行對比研究，建立最適宜的遺傳學(xué)診斷技術(shù)應(yīng)用于廣西地區(qū)Β地貧PGD。方法選擇雙方均為Β地中海貧血基因突變攜帶者、有PGD指征且同意參加本研究的的夫婦?；颊叻驄D及另外三名家系成員（女方母親、男方母親和男方父親）一同抽取外周靜脈血進(jìn)行15個STR位點的家系連鎖分析?；颊呓?jīng)過常規(guī)的藥物促排卵、取卵、取精、卵胞漿內(nèi)單精子注射INTRACYTOPLASMICSPERMINJECTION，ICSI、胚胎培養(yǎng)等程序，將所得胚胎全部進(jìn)行囊胚培養(yǎng)，形成囊胚后，取囊胚期數(shù)個（58個）滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞活檢，活檢后即將所有囊胚行玻璃化冷凍。利用多重置換擴(kuò)增MULTIPLEDISPLACEMENTAMPLIFICATION，MDA法對滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞進(jìn)行全基因組擴(kuò)增WHOLEGENOMEAMPLIFICATION，WGA。MDA擴(kuò)增產(chǎn)物一部分采用反向點雜交RDB結(jié)合15個短串聯(lián)重復(fù)序列STR位點的單體型分析PGH技術(shù)進(jìn)行遺傳學(xué)診斷（A組）另一部分MDA擴(kuò)增產(chǎn)物采用二代測序NGS方法進(jìn)行診斷（B組）。比較兩種方法的檢出率、診斷符合率、所需時間和費(fèi)用等。待診斷結(jié)果出來后選擇最合適的囊胚進(jìn)行解凍移植。結(jié)果納入本研究的患者獲卵24個，胚胎13個，囊胚培養(yǎng)后形成6枚囊胚（囊胚評分分別為4BB，4BC，3CC，3CC，3BC，3CC），每個囊胚取滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞活檢，6例樣本MDA法擴(kuò)增均擴(kuò)增成功，擴(kuò)增成功率100％。A組中，囊胚1地貧基因型診斷結(jié)果為Β28ΒCD4142囊胚2地貧基因型診斷結(jié)果為ΒCD4142ΒN囊胚3地貧基因型診斷結(jié)果為ΒNΒN囊胚4的地貧基因型診斷結(jié)果為Β28ΒNΒN囊胚5和6的地貧基因型診斷結(jié)果均為Β28ΒN。B組的地貧基因型診斷結(jié)果與A組完全一致，B組同時對囊胚26進(jìn)行染色體拷貝數(shù)檢測，診斷出囊胚2為整倍體，囊胚36均為非整倍體。A組所需診斷時間為23天，結(jié)果分析所需時間約為1個工作日B組所需診斷時間為23天，結(jié)果外送嘉寶仁和公司分析，所需時間為7個工作日。A組費(fèi)用為2000元囊胚，而B組費(fèi)用為3500元囊胚。最后選擇囊胚2解凍移植，遺憾的是未獲得臨床妊娠。結(jié)論與二代測序NGS技術(shù)相比，反向點雜交結(jié)合STR單體型分析技術(shù)也能在Β地中海貧血PGD中有效、準(zhǔn)確地診斷出植入前囊胚的地貧基因型，能夠應(yīng)用于Β地貧PGD臨床。雖然目前二代測序價格昂貴、結(jié)果分析人員要求高，臨床推廣應(yīng)用受限，但NGS是PGD遺傳學(xué)診斷技術(shù)的發(fā)展方向和未來趨勢。然而考慮到目前各方面條件的限制以及在廣西地區(qū)開展Β地貧PGD的急切需求，RDB結(jié)合15個STR位點單體型分析的診斷方法更加適合目前的廣西地區(qū)Β地貧PGD，值得推廣應(yīng)用。第三部分、MDA結(jié)合RDB及STR單體型分析在Β地貧PGD中的臨床應(yīng)用研究目的研究多重置換擴(kuò)增MDA結(jié)合反向點雜交RDB及短串聯(lián)重復(fù)序列STR單體型分析技術(shù)在Β地貧PGD中的臨床應(yīng)用。方法納入8對雙方均為Β地中海貧血基因突變攜帶者且要求進(jìn)行Β地貧PGD治療的夫婦。攜帶者夫婦及其雙方父母（每個家系一共6名成員）均抽取外周靜脈血進(jìn)行15個STR位點的家系連鎖分析?；颊呓?jīng)過常規(guī)的藥物促排卵、取卵、取精、卵胞漿內(nèi)單精子注射ICSI、胚胎培養(yǎng)等程序，將所得胚胎全部進(jìn)行囊胚培養(yǎng)，形成囊胚后，取囊胚期數(shù)個（58個）滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞活檢，活檢后即將所有囊胚進(jìn)行玻璃化冷凍。利用多重置換擴(kuò)增MDA法對取得的滋養(yǎng)外胚層細(xì)胞進(jìn)行全基因組擴(kuò)增WGA。MDA擴(kuò)增產(chǎn)物采用反向點雜交RDB結(jié)合15個短串聯(lián)重復(fù)序列STR位點的單體型分析PGH技術(shù)進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。待診斷結(jié)果出來后，結(jié)合致病基因遺傳學(xué)診斷結(jié)果和囊胚評分，選擇最佳囊胚進(jìn)行解凍移植，妊娠后孕1822周通過羊水產(chǎn)前診斷進(jìn)一步驗證PGD診斷結(jié)果。結(jié)果這8對夫婦，Β地中海貧血基因突變類型分別為CD4142N、CD17N、28N或IVSⅡ654N。每個家系6名成員檢測15個STR位點后結(jié)果顯示每個家系均有7個或以上（HBB基因上游或下游均有2個以上）的STR位點可以提供診斷信息，單體型構(gòu)建成功?；颊呓?jīng)過常規(guī)藥物促排卵，取卵、卵胞漿內(nèi)單精子注射ICSI后共獲得147枚胚胎，形成86枚囊胚，囊胚形成率5850％。其中82枚囊胚擴(kuò)增成功，擴(kuò)增成功為9535％。80枚囊胚獲得了明確診斷，其中24枚囊胚為正常純合子38枚囊胚診斷為雜合子18枚囊胚為不能移植的異常純合子或雙重雜合子。8例患者中一共4例患者進(jìn)行了囊胚解凍移植（例1、例2、例3和例6），均為單囊胚移植。其中3例（例1、例2和例3）獲得妊娠，1例（例6）未妊娠。妊娠率為75％34。例1和例2患者移植正常純合子囊胚（基因型ΒNΒN），中孕期羊水產(chǎn)前診斷結(jié)果與PGD診斷結(jié)果相符。例3患者移植雜合子囊胚基因型為ΒCD4142ΒN，移植后獲得妊娠，但目前還未行產(chǎn)前診斷驗證PGD診斷結(jié)果。結(jié)論本研究建立的Β地貧PGD方法即經(jīng)多重置換擴(kuò)增MDA后，反向點雜交RDB結(jié)合短串聯(lián)重復(fù)序列STR單體型連鎖分析，經(jīng)驗證有效、準(zhǔn)確，可以在廣西地區(qū)Β地貧PGD臨床中推廣應(yīng)用。我們期待著更大樣本量的研究證實。

簡介：LNNLNIILLLLLLLLLLLLLLLLLLLLL刪L鬯3268894分類號81塹2密級坌玨中文題目英文題目單位代碼學(xué)號翁中固蟹紳太零10159201421088碩士學(xué)位論文臨床醫(yī)學(xué)碩士學(xué)術(shù)學(xué)位MIR27B在胃癌中的生物學(xué)功能及袁遺傳學(xué)調(diào)控機(jī)制研究TLLEBIOLOGICALFUNCTIONOFMIR一27BINGASTRICCANCERANDTHEEPIGENETICALLYREGULATEANDCONTROLMECHANISM論文作者塹量指導(dǎo)教師戴圣叢墼撞學(xué)科專業(yè)盟疊主完成時間Q】Z生2旦ILLLLLLLLLLLLTLLLLLLLLLLLLLLLLLLLLLLLLLLRLY3268894中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明本論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨立進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，論文中除加以標(biāo)注的內(nèi)容外，不包含其他人或機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含本人為獲得其他學(xué)位而使用過的成果。對本研究提供貢獻(xiàn)的其他個人和集體均已在文中進(jìn)行了明確的說明并表示謝意。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。論文作者簽名芻尹釤日期少L帝七月，日中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的原件、復(fù)印件和電子版，允許學(xué)位論文被查閱和借閱。本人授權(quán)中國醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文。保密，在年后解密適用本授權(quán)書。保密請在括號內(nèi)劃“√’，論文日期指導(dǎo)教師簽名墨呈陟∥＼一一日期2稗F月廠目