體外誘導(dǎo)BMSc在金屬腔隙內(nèi)成骨的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：本課題利用中空多孔金屬支架為骨組織再生工程構(gòu)架，觀察體外骨髓基質(zhì)干細(xì)胞(bone narrow mosonchymal stem cells，BMsc)在支架內(nèi)、外的分化生長(zhǎng)情況以及成骨的可能性，并探討體外應(yīng)用骨誘導(dǎo)因子-骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(recombined human bono morphogenetic protein-2，rhBMP-2)提高成骨活性，促進(jìn)金屬假體與骨質(zhì)相對(duì)一體化結(jié)合的可行性，為研制中空多孔人工關(guān)節(jié)假體或

2、其他骨組織再生骨植入物提供基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)依據(jù)．希望實(shí)驗(yàn)結(jié)果能夠?yàn)樯锕潭ǖ娜斯りP(guān)節(jié)設(shè)計(jì)方法的改進(jìn)提供一些理論及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：自行設(shè)計(jì)中空金屬試件，采用中空金屬試件(A組)、中空金屬試件假體+脫鈣骨基質(zhì)(detalcified bone matrix DBM)(B組)、中空金屬試件+DBM+成骨誘導(dǎo)液(C組)、中空金屬假體+DBM +rhBMP-2培養(yǎng)液(D組)，金屬試件均為HA涂層，于BMSc混懸液中加10％胎牛血清DMEM培養(yǎng)液

3、培養(yǎng)，在2、4周觀察點(diǎn)取材，通過倒置相差顯微鏡、掃描電鏡、成骨細(xì)胞表型檢測(cè)等方法對(duì)中空金屬試件表面、脫鈣骨基質(zhì)BMSc生長(zhǎng)以及成骨分化進(jìn)行觀察、鑒定。 使用SPSS15.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組問同一時(shí)間各指標(biāo)比較采用組問方差分析。 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：倒置相差顯微鏡、掃描電鏡等方法顯示中空金屬試件表面及試件內(nèi)三維細(xì)胞支架上BMSc細(xì)胞黏附正常，經(jīng)成骨誘導(dǎo)后轉(zhuǎn)為成骨細(xì)胞，并形成工程化組織。在實(shí)驗(yàn)設(shè)

4、計(jì)的兩種骨誘導(dǎo)方式中，成骨細(xì)胞的表達(dá)以成骨誘導(dǎo)液為明顯，在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上其他對(duì)照組有明顯差異。 結(jié)論： 一、體外BMSc經(jīng)誘導(dǎo)向成骨細(xì)胞分化，并可在中空金屬試件的空間結(jié)構(gòu)中形成組織塊。 二、中空金屬假體的設(shè)計(jì)思路是可行的，在體外可以觀察到BMSc在金屬腔壁與腔內(nèi)細(xì)胞支架之間緊密結(jié)合，并且在無細(xì)胞支架的情況下，1 mm孔洞可以形成細(xì)胞間的直接連接。 因此中空結(jié)構(gòu)的假體是一個(gè)值得探索的方向，希望對(duì)生物復(fù)合型假體