高效液相色譜測定米糠中水溶性維生素

1、1高效液相色譜法測定米糠中的水溶性維生素高效液相色譜法測定米糠中的水溶性維生素（江南大學化工與材料工程學院，江蘇無錫214122）摘要摘要：高效液相色譜法同時測定米糠中四種水溶性維生素VB1，VB6，煙酸，煙酰胺的含量。在HypersilC18（250cm4.6mmi.d.5.0μm）上，以體積比為88:12的0.1％磷酸水溶液甲醇為流動相，以0.6mLmin流速等度洗脫，在266nm波長下檢測。各組分在8min能基線分離。四種維生素在

2、0.6106gmL～8.5105gmL范圍內呈線性關系，VB1、VB6、煙酸和煙酰胺的檢出下限分別為0.43106gmL、0.34106gmL、0.32106gmL、0.30106gmL。經簡單預處理，可以對米糠和淘米水中的這四種維生素的含量進行測定，平均回收率在96.0％～99.9％之間。該法簡便、快速、準確、靈敏，對復雜體系水溶性維生素的測定具有重要的參考價值。關鍵詞關鍵詞：水溶性維生素；米糠；高效液相色譜Determination

3、offourwatersolublevitaminsinricebranbyreversephasehighperfmanceliquidchromatographyCAORuiCAOYuhuaLINanGONGWenjunKONGLingyaoWANGYunSchoolofChemicalMaterialEngineeringSouthernYangtzeUniversityWuxi214122Abstract:Highperfman

4、celiquidchromatography(HPLC)hasbeenappliedfthesimultaneousdeterminationoffourkindsofwatersolublevitaminsincludingvitaminB1vitaminB6nicotinicacidnicotinaeinricebran.TheseparationwasperfmedonaHypersilC18column(250cm4.6mmi.

5、d.5.0μm)withamobilephaseof0.1%H3PO4methanol(88:12VV)atflowrateof0.6mLmindetectionwavelengthwas266nm.Fourvitaminshadgoodlinearityintherangeof6.0107gmL8.5105gmLwithdetectionlimitof4.3107gmL3.4106gmL3.2107gmL3.0107mgLfvitam

6、inB1vitaminB6nicotinicacidnicotinaerespectively.Baselineseparationoffourvitaminscanbeachievedwithin8minutes.Withoutcomplicatedpretreatmentfouranalytesinricebransamplesaswellasextractsfromricewithwaterweresuccessfullydete

7、rminedwith3糯米樣品產地：云南西雙版納自治州。1.2色譜條件色譜條件色譜柱：HypersilC18柱（250cm4.6mmi.d.5.0μm）流動相：A:0.1%磷酸水溶液B:甲醇，以體積比A:B=88:12等度洗脫；流速為0.6mLmin。檢測波長：266nm；進樣量20μL。1.3試液的制備試液的制備1.3.1標準溶液的制備標準溶液的制備精確稱取約0.05g的四種維生素標準品，用0.01molL鹽酸溶解并稀釋到50mL，搖

8、勻，分別得到1.36103gmL，1.18103gmL，1.04103gmL和1.00103.gmL的VB1，VB6，煙酸和煙酰胺的標準儲備液，于4℃冰箱中保存。儲備液用流動相稀釋得所需濃度的標準溶液。1.3.2米糠供試品溶液的制備米糠供試品溶液的制備取10.00g米糠于100mL錐形瓶中，加入20mL混合溶劑（體積比為80:20的甲醇－0.01molL鹽酸溶液）超聲提取30min，過濾，濾渣用相同的條件重復提取兩次，合并提取液。用旋轉

9、蒸發(fā)儀蒸發(fā)濃縮，濃縮液用無水乙醚萃取兩次脫脂，水相經0.45μm濾膜過濾，再過固相萃取柱，定容至10mL容量瓶中，即得米糠供試品溶液。1.3.3淘米水供試品溶液的制備淘米水供試品溶液的制備取100g云南產糯米加100mL自來水攪拌20min，瀝出洗米水，然后定容至100mL。過濾，將濾液在12000rmin下離心15min，取上清液，經0.45μm濾膜過濾，再過固相萃取柱，即得淘米水供試品溶液。2.結果與討論結果與討論2.1樣品預處理樣

10、品預處理[8]方法優(yōu)化方法優(yōu)化米糠的主要成分有蛋白質、脂肪酸、膽甾醇、多糖等。雖然VB1、VB6、煙酸和煙酰胺都是水溶性物質，但采用水為提取劑，蛋白質、碳水化合物也會隨之被提取出來，干擾測定并污染色譜柱。嘗試了純甲醇以及90％甲醇和10％的0.01molL鹽酸水溶液提取維生素，發(fā)現不能將水溶性維生素提取完全；70％的甲醇和30％的0.01molL鹽酸水溶液雖能將水溶性維生素提取完全，但米糠中的蛋白質也會隨之被提取出來；用80％甲醇和20