玉米中維生素和植物激素的毛細(xì)管液相色譜分離檢測.pdf

1、高效液相色譜(HPLC)作為一種高效、快速的分離分析技術(shù),在生物工程、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域獲得廣泛的應(yīng)用。隨著分析儀器向小型化發(fā)展的趨勢,毛細(xì)管液相色譜(CLC)越來越多地被人們使用。由于用毛細(xì)管柱代替了常規(guī)液相柱,CLC節(jié)省了樣品,減少了有機(jī)溶劑的消耗和對環(huán)境的污染。與常規(guī)液相色譜相比,CLC由于進(jìn)樣量的減小和柱上檢測池檢測光程的減小導(dǎo)致檢測靈敏度的降低,本論文通過擴(kuò)展檢測池的檢測光程和溶劑梯度效應(yīng)以及管內(nèi)固相微萃取技術(shù)(in-tube S

2、PME)提高檢測的靈敏度。主要研究內(nèi)容有:
　　1.建立了用CLC分離水溶性維生素的方法。采用硅膠基質(zhì)ODS整體柱(27 cm×100μm I. D.)作為分離柱,以帶有光程為3毫米的光纖檢測池的紫外檢測器作為檢測手段,研究了甲醇濃度、緩沖液pH值對分離結(jié)果的影響。該方法測定5種水溶性維生素的檢測限在14.6-53.5 ng/mL(S/N=3)范圍內(nèi),根據(jù)遷移時(shí)間和峰面積計(jì)算得到的遷移時(shí)間和峰面積的RSD均小于4.4％,回歸方程的

3、線性相關(guān)系數(shù)在0.9963-0.9994之間。用所建立的方法分析玉米樣品,在玉米中未能檢測到水溶性維生素,這是由于玉米中水溶性維生素的含量較低,我們所建立方法的靈敏度不夠。
　　2.建立了植物內(nèi)源激素的CLC測定方法,通過擴(kuò)展檢測池的檢測光程和溶劑梯度效應(yīng)提高檢測靈敏度。研究了甲醇濃度、緩沖液pH值、不同樣品介質(zhì)對分離結(jié)果的影響。該方法測定4種植物激素的檢測限在27.7-196.1 ng/mL(S/N=3)范圍內(nèi),根據(jù)遷移時(shí)間和峰

4、面積計(jì)算得到的遷移時(shí)間和峰面積的RSD均小于2.8%,回歸方程的線性相關(guān)系數(shù)在0.9984-0.9989之間。用所建立的方法分析玉米樣品,在玉米中檢測到玉米素(ZT)、赤霉素(GA3)和吲哚-3-乙酸(IAA),并對GA3和IAA進(jìn)行了定量分析。
　　3.建立了一種in-tube SPME與CLC在線聯(lián)用的方法。以毛細(xì)管整體柱作為固相萃取柱,對脂溶性維生素及β-胡蘿卜素進(jìn)行萃取富集并在CLC上分離。通過擴(kuò)展檢測池的檢測光程和在線i