免疫及分子診斷技術(shù)介紹

1、,1,分子生物學(xué)技術(shù),,,2,,3,,4,,5,Kary Banks Mullis,1993年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng),,6,,,,,7,,8,,9,,10,,,11,,12,2n,,13,,,,14,,,,,15,,16,,17,,18,,19,,20,,21,,22,,23,,24,,25,,26,,27,,28,引物,,29,,30,,31,,32,,33,,34,,35,,36,,37,,38,,39,,40,熔解曲線(Dissociati

2、on curve)是指隨溫度升高DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)降解程度的曲線。熔解曲線分析可以用來(lái)確定不同的反應(yīng)產(chǎn)物，包括非特異性產(chǎn)物,總的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)降解一半的溫度稱為熔解溫度（Tm），不同序列的DNA，Tm值不同。DNA中G－C含量越高，Tm值越高，成正比關(guān)系。,擴(kuò)增反應(yīng)完成后進(jìn)行,,41,退火溫度（AnnealingTemperature）是指引物和模板結(jié)合時(shí)候的溫度參數(shù)，當(dāng)50%的引物和互補(bǔ)序列表現(xiàn)為雙鏈DNA分子時(shí)的溫度。它是影響PC

3、R特異性的較重要因素。在理想狀態(tài)下，退火溫度足夠低，以保證引物同目的序列有效退火，同時(shí)還要足夠高，以減少非特異性結(jié)合。合理的退火溫度從55℃到70℃。退火溫度一般設(shè)定比引物的Tm低5℃。,,,42,,43,,44,,45,,46,,47,,48,,49,,50,,51,,52,,53,,54,,55,,56,,57,,,58,,59,艾滋病毒進(jìn)入人體后，需要經(jīng)過(guò)一段時(shí)間血液才會(huì)產(chǎn)生艾滋病毒抗體，在此期間抗體檢測(cè)呈陰性，這段時(shí)間即為窗口期

4、。感染者體內(nèi)的HIV數(shù)量會(huì)在這時(shí)達(dá)到一個(gè)峰值，傳染性極強(qiáng)。急性感染期也出現(xiàn)在這段時(shí)間。多數(shù)人在感染艾滋病毒后有3至12周“窗口期”，在此期間，人體仍在產(chǎn)生艾滋病毒抗體，但這些抗體尚無(wú)法測(cè)出。,,60,,61,,62,bDNA的檢測(cè)原理,,63,,64,,65,,66,,67,,68,,69,,70,,71,,72,,73,免疫學(xué)方法技術(shù),,74,,75,,76,,77,,78,,79,,80,,81,,82,,83,,84,,85,,8

5、6,,87,,88,,89,,90,,91,,92,,93,,94,,95,,96,,97,,98,,99,,100,,101,,102,,103,,104,,,105,,106,,107,,108,,109,,110,,111,,112,,113,,114,,115,,116,,117,,118,,119,,120,,121,,122,,123,,124,,125,,126,,127,,128,,129,,130,,131,,132,