乳腺癌分子診斷產(chǎn)品介紹

1、中國(guó)乳腺癌現(xiàn)狀,2010年新發(fā)乳腺癌病例為208192例死亡55500例新發(fā)病例每年以3%的比例上升,預(yù)計(jì)2015年新發(fā)乳腺癌病例為24萬(wàn)例2021年現(xiàn)患病例約250萬(wàn)例,2010年新發(fā)乳腺癌病例為208192例死亡55500例新發(fā)病例每年以3%的比例上升,預(yù)計(jì)2015年新發(fā)乳腺癌病例為24萬(wàn)例2021年現(xiàn)患病例約250萬(wàn)例,當(dāng)前乳腺癌臨床診治存在的問(wèn)題,乳腺癌是具有高度異質(zhì)性的腫瘤。組織學(xué)形態(tài)相同的腫瘤，其分子生

2、物學(xué)改變不盡相同。 目前常規(guī)臨床上常用分期、分級(jí)結(jié)合激素受體狀態(tài)來(lái)顯示這些差異。這些參數(shù)對(duì)疾病結(jié)果的預(yù)測(cè)能力有限，所以乳腺癌病人常常面臨如何選擇系統(tǒng)的治療方案的難題。不同的分子分型具有不同的生物學(xué)行為以及治療的敏感性，傳統(tǒng)的病理分型已經(jīng)不能滿足乳腺癌個(gè)體化治療的需求。基于基因表達(dá)譜和分子生物學(xué)特征為基礎(chǔ)的乳腺癌分子生物學(xué)分型。能較好地反映腫瘤的生物學(xué)行為，具有重要的臨床治療指導(dǎo)意義。,,當(dāng)前國(guó)際上乳腺癌分子診斷的臨床應(yīng)用--

3、Oncotype/21 Gene,,RS ≥ 31,RS < 18,RS 18 – 30,通過(guò)分子診斷改變治療策略,4,* Based on meta-analysis of seven studies with 912 patients,1 grey,2,3 halo,4,XXX 通過(guò)檢測(cè)乳腺癌組織中的基因表達(dá)來(lái)對(duì)乳腺癌進(jìn)行分子分型，并通過(guò)評(píng)分來(lái)預(yù)測(cè)乳腺癌的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。,BB Biotype,XXX 是一種目前最為先進(jìn)的針對(duì)乳腺癌

4、的分子 診斷方法,結(jié)合其他臨床信息，可以幫助決定是否需要病情較輕的病人進(jìn)行化療，以及對(duì)三陰性乳腺癌應(yīng)采取何種正確的治療方案。,幫助醫(yī)生判斷腫瘤未來(lái)復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。,幫助病人和醫(yī)生更多地了解所患腫瘤的分子特性，從而更有針對(duì)性地制定治療方案。,所有乳腺癌患者，包括：雌激素受體（ER）陽(yáng)性或陰性孕激素受體（PR）陽(yáng)性或陰性人類表皮生長(zhǎng)因子2（HER2）陽(yáng)性或陰性三陰性乳腺癌有或無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,適用人群,對(duì)乳腺癌樣本進(jìn)行亞型分型,B

5、B Biotype 的臨床意義,計(jì)算10年內(nèi)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)，將患者劃分為低、中和高危險(xiǎn)組,XXX 的臨床意義,結(jié)合腫瘤亞型、免疫指數(shù)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)，提出臨床治療方案。ER陽(yáng)性的低危險(xiǎn)組病例，建議進(jìn)行內(nèi)分泌治療，不建議化療。對(duì)于ER陰性的高危險(xiǎn)組病例，免疫指數(shù)高的病例可進(jìn)行有效化療或目前最先進(jìn)的PD1/CTL4抑制劑治療，而對(duì)于免疫指數(shù)低的病例則需進(jìn)行結(jié)合細(xì)胞免疫治療的化療。,XXX 的臨床意義,產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)對(duì)比,Oncotype (21

6、基因），Genomic Health公司，美國(guó)無(wú)亞型分型、僅限于ER陽(yáng)性且無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者檢測(cè)費(fèi)用4175美元/例，年銷售額2.75億美元PAM50(55基因），Prosigna公司，美國(guó)亞型分型不精確、無(wú)免疫指數(shù)檢測(cè)2700美元/例試劑費(fèi)用MammaPrint(70基因），Agendia公司，荷蘭無(wú)亞型分型、僅限于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者、必須新鮮腫瘤組織檢測(cè)費(fèi)用4200美元/例,基于美國(guó)14項(xiàng)乳腺癌的隊(duì)列研究中2034個(gè)Af

7、fmetrix基因芯片及相應(yīng)臨床和病理數(shù)據(jù)，并在不同的雙色基因芯片及二代測(cè)序基因表達(dá)數(shù)據(jù)中加以驗(yàn)證。包括66個(gè)基因用于亞型分型、增至指數(shù)和免疫指數(shù)計(jì)算。XXX 的應(yīng)用首次發(fā)現(xiàn)了新一類乳腺癌亞型：免疫增強(qiáng)型。新類型的發(fā)現(xiàn)對(duì)臨床治療有重要指導(dǎo)意義。,產(chǎn)品的研發(fā)過(guò)程： 發(fā)現(xiàn)了新一類乳腺癌亞型：免疫增強(qiáng)型,六種乳腺癌亞型顯示出不同的轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn),結(jié)合亞型分型、增殖指數(shù)、腫瘤體積及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)，來(lái)計(jì)算遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移危險(xiǎn)指數(shù)（RD

8、M），并以此將病例劃分為低、中和高危人群，并觀察10內(nèi)無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)（圖三）,RDM評(píng)分將乳腺癌轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)分為低、中、高三組,以RDM分?jǐn)?shù)將乳腺癌病例分為低（ 0-33 ，n=555)、中（33-61 ，n=636)和高（61-100 ，n=544) 遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)人群。其中10年內(nèi)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)分別為低風(fēng)險(xiǎn)組8%、中風(fēng)險(xiǎn)組30%和高風(fēng)險(xiǎn)組53%。,RDM Score = a*Basal +

9、 b*Her2 + c*Immuno + d*LumA + e*LumB + f*Normal + g*Proliferation+

10、 h*Node+ i*Size,當(dāng)對(duì)低、中和高風(fēng)險(xiǎn)組的免疫狀況進(jìn)行進(jìn)一步分析時(shí)發(fā)現(xiàn)，免疫指數(shù)對(duì)低和中風(fēng)險(xiǎn)組的預(yù)后沒(méi)有影響，但對(duì)高風(fēng)險(xiǎn)組的預(yù)后有顯著影響（圖四）。,免疫指數(shù)對(duì)高風(fēng)險(xiǎn)組病例復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)有重要影響,圖四、免疫指數(shù)對(duì)高風(fēng)險(xiǎn)組的預(yù)后有顯著影響。免疫指數(shù)高的一組，10年內(nèi)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)只有30%，而免疫指數(shù)低的一組則高達(dá)55%。,高度吻合的回顧性結(jié)果驗(yàn)證：

11、 1. 不同平臺(tái)驗(yàn)證,,404個(gè)Affymetrix訓(xùn)練集芯片 1140個(gè)二代測(cè)序表達(dá) 337個(gè)NKI雙色芯片,2. 漢族人群驗(yàn)證,,129Affy漢人乳腺癌327 Affy漢人乳腺癌,,,高度吻合的回顧性結(jié)果驗(yàn)證：,報(bào)告一： 評(píng)分個(gè)體化檢測(cè)報(bào)告,檢測(cè)報(bào)告,報(bào)告二：不同風(fēng)險(xiǎn)組的的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)。,檢測(cè)報(bào)告,3年及10年的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)，分別為低風(fēng)險(xiǎn)組2%和8%，中風(fēng)險(xiǎn)組15%

12、和30%，高風(fēng)險(xiǎn)組29%和53%。,臨床和病理資料的收集病理分級(jí)腫瘤體積淋巴轉(zhuǎn)移免疫組化治療方案,檢測(cè)樣本的準(zhǔn)備,,FFPE腫瘤切片提取RNA,RASL-Seq法測(cè)定基因表MiSeq測(cè)序儀,獲取病人基因表達(dá)譜,計(jì)算復(fù)發(fā)危險(xiǎn)指數(shù)（ROR）,SSP病人基因表達(dá)譜,管腔A型,管腔B型,基底細(xì)胞型,HER2富集型,通過(guò)相關(guān)分析確定分子分型,檢測(cè)技術(shù)—二代測(cè)序,臨床和病理資料的收集病理分級(jí)腫瘤體積淋巴轉(zhuǎn)移免疫組化治療方案,

13、檢測(cè)樣本的準(zhǔn)備,,樣本準(zhǔn)備測(cè)試需要1片5 μm H&E 染色的切片，1到10片10 μm FFPE未染的組織切片,數(shù)量取決于切片上腫瘤組織含量。用于測(cè)試的未染色石蠟組 織切片必須是H&E染色切片接下來(lái)的連續(xù)切片，以確保和染色的切片確認(rèn)的癌 細(xì)胞區(qū)域一致。H&E染色切片上惡性癌細(xì)胞的百分比必須大于10%，且癌細(xì)胞的面積必須大于4 mm2，以保證有足夠癌細(xì)胞用于提取 RNA。切片上含有的正常組織在RNA提取前