登革Ⅱ型病毒EDⅢ與登革病毒受體蛋白的鑒定及功能評價.pdf

1、南方醫(yī)科大學2011級博士學位論文登革II型病毒EDIII與登革病毒受體蛋白的鑒定及功能評價IdentificationandevaluationofDENV2一EDIIIandpotentialreceptormoleculesOIant卜dengUeVlrUSl1●●J■1●課題來源：國家自然基金項目(NO：30872l98；30972566)學位申請人導師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學院楊永紅鄭學禮病原生物學科研型博士研究生公

2、共衛(wèi)生與熱帶醫(yī)學學院答辯委員會主席余新炳教授答辯委員會委員余新炳教授朱家勇教授吳忠道教授閆桂云教授倫照榮教授黃曦教授2014年6月8日廣州摘要進行深入研究，并從中發(fā)掘有效的靶分子是媒介傳播病毒學研究的當務之急。病毒通過與易感的宿主細胞表面受體分子結合后經(jīng)介導的內吞作用侵染細胞，在胞內內質網(wǎng)完成一系列的復制、翻譯、組裝、增殖及釋放的過程。而病毒與宿主細胞表面受體分子的結合是發(fā)生病毒侵染細胞的先行條件，病毒在受體的介導下最終進入宿主細胞，從

3、而出現(xiàn)一系列反應。鑒于此，我們的研究方向從病原學方面，以及易感宿主細胞膜受體來探索潛在的靶分子。對登革病毒結構的認識，目前認為DENV是單股正鏈RNA病毒，基因組RNA約含有l(wèi)lkb核苷酸?；蚪M存在一個開放讀碼框，其5’端編碼三種結構蛋白(C、M／prM和E)，3’端編碼七個非結構蛋白(NSl、NS2A、NS2BNS3、NS4A、NS4B、NS5)。E蛋白是結構蛋白中主要的包膜糖蛋白，是由兩個單聚體組成的分子量約5560kDa的同源二

4、聚體，這種表面結構蛋白是登革病毒進入宿主細胞的一個重要靶點。結晶學對登革病毒的深入研究結果進一步發(fā)現(xiàn)，登革病毒包膜糖蛋白E有3個結構域(IIII)：第一結構域位于中心的13桶狀結構、第二結構域則包含內融合肽，決定二聚體的形成。第三結構域折疊為免疫球蛋白樣，是結構相對獨立的受體結合區(qū)，垂直伸出病毒表面形成突起，包含能誘導產(chǎn)生特異性中和抗體的型和亞型抗原表位，是病毒與受體結合的主要部位。因此對第三結構域的研究成為登革病毒疫苗、病毒與宿主細胞

5、受體相互作用的重要靶點。通過對登革II型病毒E蛋白第三結構域的生物信息學分析顯示，其相對分子量為107905，屬于穩(wěn)定蛋白。從登革病毒的RNA病毒全長，到主要表面結構蛋白E蛋白，再到E蛋白的第三結構域，一是使得我們的研究范圍能不斷聚焦至目標靶分子，二是利用截短的病毒受體功能區(qū)有助于提高病毒受體篩選的成功率和準確性。對于登革病毒受體的研究一直廣受重視。這種典型的蚊媒病毒能夠感染，不同組織來源的多種細胞。由于病毒與受體結合步驟多且過程復雜，