根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的甜櫻桃莖尖遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立.pdf

1、西南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的甜櫻桃莖尖遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立姓名：沈燁申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：李名揚(yáng);裴炎2002.6.1根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的甜櫻桃莖尖遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立用馴化培養(yǎng)的甜櫻桃莖尖作受體，優(yōu)化了農(nóng)卡下菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化體系的多項(xiàng)參數(shù)：以O(shè) D ∞0 0 ．2 ～0 ．5 的農(nóng)桿菌菌液感染3 0 r a i n 后共培養(yǎng)3 d ，能獲得0 ．7 8 ％的抗性綠芽象。4 、通過(guò)比較立即篩選、延遲篩選和梯度篩選三種篩選

2、方式對(duì)抗性綠苗率的影響，得到梯度篩選的轉(zhuǎn)化率為O ．8 5 ％，是該轉(zhuǎn)化體系的較好篩選方式。5 、實(shí)驗(yàn)研究丁A S 、T w e e n 2 0 和負(fù)壓等因素對(duì)轉(zhuǎn)化效率的影響，表明A S 可明顯提高轉(zhuǎn)化效率，其最適濃度為1 2 0 m m o 兒：T w e e n 2 0 和負(fù)壓處理也能提高轉(zhuǎn)化頻率，T w e e I l 2 0 的適宜濃度足0 ．1 ％，負(fù)壓的適宜處理是1 m 曲×1 0 次。6 、通過(guò)P C R 擴(kuò)增，