農(nóng)桿菌介導(dǎo)大豆遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化研究.pdf

1、大豆（Glycine max L.Merrill）起源于我國，栽培歷史悠久，品種資源豐富，是世界上主要的糧食和油料作物。由于大豆的品質(zhì)和產(chǎn)量易受各種病、蟲、草害的影響，因此人們?cè)噲D利用轉(zhuǎn)基因方法對(duì)大豆進(jìn)行有目的定向改變的遺傳改良，以此來改善大豆的產(chǎn)量、品質(zhì)和抗逆能力。但大豆與其他作物相比，轉(zhuǎn)基因研究的主要問題是轉(zhuǎn)化率低，重復(fù)性差。
　　 農(nóng)桿菌介導(dǎo)法是目前大豆轉(zhuǎn)基因中發(fā)展較為成熟的方法，但尚不能滿足大豆育種和功能基因研究的需要，

2、對(duì)轉(zhuǎn)化過程中影響大豆子葉節(jié)再生的因素做進(jìn)一步優(yōu)化研究具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
　　 本研究利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的子葉節(jié)轉(zhuǎn)化系統(tǒng)，將大豆光合作用相關(guān)基因GmDeg2轉(zhuǎn)入大豆，以不定芽誘導(dǎo)率和不定芽伸長獲得率為指標(biāo)，采用四因素三水平的正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，分別對(duì)科豐6號(hào)、徐豆10號(hào)、菜豆5號(hào)的遺傳轉(zhuǎn)化條件（侵染時(shí)間、共培養(yǎng)PH值、共培養(yǎng)時(shí)間、誘導(dǎo)不定芽的6-BA濃度）進(jìn)行優(yōu)化分析，初步篩選出三個(gè)大豆品種的最優(yōu)遺傳轉(zhuǎn)化體系。直觀分析、Duncan多重比

3、較分析結(jié)果表明，科豐6號(hào)的最佳轉(zhuǎn)化條件是侵染時(shí)間為30 min、共培養(yǎng)pH值為5.6、共培養(yǎng)時(shí)間為3d、誘導(dǎo)不定芽6-BA的濃度為1.6 mg/L，其不定芽誘導(dǎo)率為87.7％、不定芽伸長獲得率為33％;徐豆10號(hào)的最佳轉(zhuǎn)化條件是侵染時(shí)間為20 min、共培養(yǎng)pH值為5.4、共培養(yǎng)時(shí)間為4d、誘導(dǎo)不定芽6-BA的濃度為1.6 mg/L，其不定芽誘導(dǎo)率為55.7％、不定芽伸長獲得率為24.3％;菜豆5號(hào)最佳轉(zhuǎn)化條件是侵染時(shí)間為30 min、

4、共培養(yǎng)pH值為5.6、共培養(yǎng)時(shí)間為3d、誘導(dǎo)不定芽6-BA的濃度為1.6 mg/L，其不定芽誘導(dǎo)率為36.7％、不定芽伸長獲得率為11.7％。
　　 對(duì)三種基因型大豆的最佳不定芽誘導(dǎo)率和不定芽伸長獲得率進(jìn)行單因素分差分析，得出不同大豆基因型之間的不定芽誘導(dǎo)率和不定芽伸長獲得率存在顯著差異，其中科豐6號(hào)最適于作大豆再生植株的供體材料，其次為徐豆10號(hào)、菜豆5號(hào)?？梢姴煌蛐痛蠖顾璧倪z傳轉(zhuǎn)化條件不一樣，在遺傳轉(zhuǎn)化中應(yīng)根據(jù)不同的大