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文檔簡介
1、目的:探討大鼠創(chuàng)傷弧菌(VV)膿毒癥血中膜性脂多糖受體mCD14和細(xì)胞因子(TNF-α/IL-10)的動念改變情況及頭孢哌酮鈉與乳酸左氧氟沙星聯(lián)用對其的影響。 方法: 1.雄性SD大鼠110只,隨機分11組,每組10只。第1組:正常對照組(NC組);第2~6組:創(chuàng)傷弧菌膿毒癥組(VV組),予雙后肢皮下注射創(chuàng)傷弧菌(濃度為9×108cfu/ml,劑量為1ml/100g),構(gòu)建創(chuàng)傷弧菌膿毒癥模型。該組大鼠分別在注射VV后2h
2、、6h、9h、12h、16h時活殺。第7~11組:創(chuàng)傷弧菌膿毒癥聯(lián)用抗菌藥物干預(yù)組(AA組),予雙后肢皮下注射創(chuàng)傷弧菌(濃度、劑量同上),從注射VV后6h起,予腹腔注射(ip)頭孢哌酮鈉(180mg/kg)和乳酸左氧氟沙星(18mg/kg),每日2次,分別在注射VV后9h、12h、16h、36h、2周時活殺。取大鼠下腔靜脈血5~7ml,其中1ml采用肝素抗凝,其余分離出血清。 2.用兔抗鼠CD14抗體和異硫氫酸熒光素(FITC)
3、標(biāo)記的羊抗兔抗體對外周血細(xì)胞進(jìn)行免疫染色,流式細(xì)胞儀(FCM)測定各組FITC-CD14陽性細(xì)胞數(shù)及其熒光強度(FI)。 3.使用ELISA法測定各組大鼠血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)和白細(xì)胞介素-10(IL-10)的含量。 4.討量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,應(yīng)用SPSS12.0進(jìn)行t檢驗、方差分析等處理。P<0.05為差異有顯著性意義。 結(jié)果: 1.VV組FITC-CD14陽性細(xì)胞數(shù)在染菌
4、6h后明顯升高(P<0.01),熒光強度增強;AA組染菌6h時,F(xiàn)ITC-CD14陽性細(xì)胞數(shù)明顯升高(P<0.01),抗菌藥物干預(yù)后FITC-CD14陽性細(xì)胞數(shù)開始減低,AA組至染菌后12hFITC-CD14陽性細(xì)胞數(shù)與NC組相比,無明顯差異(P>0.05);與相同時間點VV組相比,AA組在染菌后12h和16h的FITC-CD14陽性細(xì)胞數(shù)明顯減低(P<0.01)。 2.VV組在染菌后2h血清TNF-α含量明顯升高(P<0.05
5、),之后其含量持續(xù)上升;AA組在染菌后9h、12h血清TNF-α含量仍高于NC組(P<0.05),但16h后明顯減低(P>0.05);VV組在染菌后9h血清IL-10含量明顯升高(P<0.05),后持續(xù)上升;AA組在染菌后9h、12h、16h的血清IL-10含量仍高于NC組(P<0.05),但在36h后明顯減低(P>0.05)。與相同時間點VV組相比,AA組在染菌后16h的血清TNF-α、IL-10含量明顯減低(P<0.05)。
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