咪唑啉藥物對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的皮層星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥細(xì)胞因子的影響.pdf

1、背景：20世紀(jì)70年代以來，國(guó)內(nèi)外陸續(xù)報(bào)道多例“原因未明脫髓鞘白質(zhì)腦病”，藥物流行病學(xué)研究證實(shí)驅(qū)蟲藥如四咪唑(tetramisole，TMs)和左旋咪唑(levamisole，LMS)與此存在因果關(guān)系。本實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)LMS對(duì)中樞炎性脫髓鞘腦病的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(experimentalautoimmuneencephalomyelitis，EAE)有明顯的加重作用，體外放射性配體實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)LMS能和咪哮啉2受體(imid

2、azoline2receptor，I2R)結(jié)合，而小裁量的咪唑克生(idazaxon，IDA)則對(duì)病程的進(jìn)展有保護(hù)作用，IDA同樣能和12R結(jié)合。近年來，星形膠質(zhì)細(xì)胞已成為研究的熱點(diǎn)，它在EAE中扮演了什么兔色?星形膠質(zhì)細(xì)胞上分布有12R，它是不是能直接作為L(zhǎng)MS作用的靶細(xì)胞?咪唑啉藥物發(fā)揮的對(duì)疾病的干預(yù)作用是否與12R有關(guān)? 目的：觀察LMS、IBA、胍丁胺(agmatine，AGM))等藥物對(duì)脂多糖(lipopolysacc

3、haride，LPS)誘導(dǎo)的SD大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞炎癥細(xì)胞因子、膠質(zhì)纖維酸性蛋自(glialfibrillaryacidicprotein，GFAP)和核轉(zhuǎn)錄因子κB(nuclearfactorκB，NFκB)的影響，了解炎癥狀態(tài)下藥物的調(diào)節(jié)作用，探討上述藥物在EAE中的可能作用和機(jī)制。 方法：取SD大鼠皮層組織純化，純度＞95％星形膠質(zhì)細(xì)胞隨機(jī)分成六組，分別設(shè)空白對(duì)照、單純LMS處理組、單純LPS處理組和LMS、IDA和AGM干

4、預(yù)組。LPS終濃度為10vg/mL,LMS、IDA和AGM濃度為10vmol/L。LMS和IDA預(yù)處理6小時(shí)，12S和藥物共處理12小時(shí)，分別于藥物處理12小時(shí)及24小時(shí)收集細(xì)胞上清液，ELISA法測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子。用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reversetranscriptasepolymerasechainreaction，RT-PCR)檢測(cè)星形膠質(zhì)細(xì)胞的GFAP和NFκB。 結(jié)果： (1)100uMLMS處

5、理的星形膠質(zhì)細(xì)胞LDH釋出量與對(duì)照組相比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 (2)ELISA結(jié)果：IDA可減少星形膠質(zhì)細(xì)胞12S處理12小時(shí)時(shí)TNFα分泌(P＜0.01)，LMS、IDA、AGM可減少星形膠質(zhì)細(xì)胞LPS處理24小時(shí)時(shí)IL-1β分泌P＜0.01)，LMS、IDA可減少星形膠質(zhì)細(xì)胞LPS處理24小時(shí)時(shí)TGFβ1分泌P＜0.01)。 (3)RT-PCR結(jié)采；各組之間GFAP表達(dá)來見區(qū)別，IDA干預(yù)組NFκB表達(dá)較單純LPS處理組