阿司匹林誘生型脂氧素對白細胞介素-6誘導的星形膠質(zhì)細胞炎癥反應的影響.pdf

1、目的：探討阿司匹林誘生型脂氧素（aspirin-triggered lipoxin，ATL）對白細胞介素6（interleukin-6，IL-6）誘導的星形膠質(zhì)細胞炎癥反應的影響以及作用機制。
　　 方法：(1)觀察ATL 對IL-6 誘導的原代培養(yǎng)的新生大鼠星形膠質(zhì)細胞分泌前列腺素E2（prostaglandin E2，PGE2)的時效，量效關(guān)系，分別用不同濃度的ATL（10-8M，10-7M）干預IL-6 誘導的星形膠質(zhì)細胞

2、，使用酶聯(lián)免疫法(enzyme-linkedimmunosorbent assay，ELISA)檢測各個時間點（4h、8h、12h、16h、24h）培養(yǎng)液上清中PGE2 含量。（2）觀察ATL 干預對IL-6 誘導的星形膠質(zhì)細胞產(chǎn)生的環(huán)氧合酶2（cyclooxygenase 2，COX-2）mRNA以及COX-2 蛋白含量的影響，分別用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應（reverse transcription polymerase chain re

3、action，RT-PCR）法和免疫蛋白印跡法（western-blot assay，WB）檢測。（3）觀察ATL 干預對IL-6 誘導的星形膠質(zhì)細胞產(chǎn)生磷酸化蛋白酪氨酸激酶2（phosphorlated Janus Kinase 2，p-JAK2）和磷酸化信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄激活子3（phosphorylated signal transducer and activator of transcription，p-STAT3）表達的影響，W

4、B 方法檢測。（4）RT-PCR方法檢測ATL 干預后星形膠質(zhì)細胞產(chǎn)生的細胞因子傳送抑制蛋白3（suppressor of cytokine signaling 3，SOCS3）mRNA 變化，WB方法檢測SOCS3 蛋白含量的變化。
　　 結(jié)果：（1）與對照組相比，IL-6 可以時間以及劑量依賴性使得星形膠質(zhì)細胞分泌的PGE2 顯著增多（p<0.05）；預先使用ATL 干預后，與IL-6 誘導組相比，星形膠質(zhì)細胞分泌的PGE2

5、 顯著減少（p<0.05）。(2)與對照組相比，IL-6 使得星形膠質(zhì)細胞產(chǎn)生的COX-2 mRNA表達上調(diào)，COX-2 蛋白含量增加（p<0.05）；而預先使用ATL 干預后，與IL-6 誘導組相比，星形膠質(zhì)細胞產(chǎn)生的COX-2 mRNA下降，蛋白含量下降（p<0.05）。(3)與對照組相比，IL-6 可以使得星形膠質(zhì)細胞產(chǎn)生的p-JAK2和p-STAT3蛋白含量上升（p<0.05），在使用ATL 干預后，與IL-6 誘導組相比，星形

6、膠質(zhì)細胞產(chǎn)生的p-JAK2和p-STAT3 蛋白含量下降（p<0.05）。(4)與對照組相比，IL-6 誘導后，星形膠質(zhì)細胞產(chǎn)生SOCS3 mRNA和蛋白表達略微上升，但無統(tǒng)計學差異；而使用ATL干預后，與誘導組相比，SOCS3 mRNA 明顯上調(diào)（p<0.05），SOCS3 蛋白含量也顯著增加（p<0.05）。
　　 結(jié)論：ATL 可以抑制IL-6 誘導的星形膠質(zhì)細胞產(chǎn)生炎癥介質(zhì)COX-2、PGE2含量的增加，其機制與提升SO