酒精性肝病創(chuàng)傷弧菌膿毒癥大鼠血清MMP-9的變化及意義.pdf

1、目的： 探討酒精性肝病創(chuàng)傷弧菌膿毒癥大鼠血清基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)的水平及聯(lián)合應(yīng)用頭孢哌酮鈉和左氧氟沙星的干預(yù)作用，并觀察MMP-9變化與創(chuàng)傷弧菌膿毒癥進(jìn)展的關(guān)系。 方法： l、酒精性肝病大鼠模型的構(gòu)建100只SD雄性大鼠，隨機(jī)分為酒精灌胃組(90只)及生理鹽水灌胃組(10只)。酒精灌胃組大鼠以56％的酒精溶液5g/kg·d連續(xù)灌胃10w，10w末從該組大鼠任取兩只，活殺后取肝組織送檢病理。生理鹽水灌胃

2、組大鼠以等體積的生理鹽水灌胃。 2、正式實(shí)驗(yàn)分組及處理取酒精灌胃組大鼠60只，按隨機(jī)數(shù)字表分為10組，每組6只。1～4組設(shè)為肝病膿毒癥組(AV組)，5～8組設(shè)為抗菌藥物干預(yù)組(AVA組)，9組設(shè)為抗菌藥物對(duì)照組(AA組)，10組設(shè)為肝病對(duì)照組(A組)。并從生理鹽水灌胃組隨機(jī)取6只大鼠設(shè)為正常對(duì)照組(N組)。創(chuàng)傷弧菌經(jīng)后肢皮下注射感染AV及AVA組大鼠(細(xì)菌濃度為6.0×109cfu/ml，劑量為0.5ml/100g)；抗菌藥物經(jīng)

3、兩側(cè)腹腔注射(ip)AVA及AA組大鼠，左側(cè)頭孢哌酮鈉(180mg/kg，每日2次)，右側(cè)乳酸左氧氟沙星(18mg/kg，每日2次)。AV組于染菌后2h，6h，12h，24h處死；AVA組于染菌后4h進(jìn)行抗菌藥物干預(yù)，并于染菌后6h，12h，24h，10d處死。AA組注射1次抗菌藥物后6h即麻醉處死。A組及N組大鼠直接麻醉后處死。留取各組大鼠標(biāo)本。 3、觀察并詳細(xì)記錄感染創(chuàng)傷弧菌后各組大鼠毒血癥狀，包括活動(dòng)度、呼吸頻率、有無(wú)寒戰(zhàn)

4、豎毛、有無(wú)發(fā)紺、飲食情況、下肢腫脹程度等。 4、常規(guī)留取血清標(biāo)本，以全自動(dòng)生化儀檢測(cè)各組大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)及谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)水平，并以ELISA法測(cè)定各組大鼠血清MMP-9水平。 5、留取各組大鼠肝、肺組織，以10％福爾馬林液固定，脫水、透明、石蠟包埋、切片、HE染色，光學(xué)顯微鏡觀察。 6、實(shí)驗(yàn)所得計(jì)量資料采用均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，應(yīng)用SPSS10.0進(jìn)行t檢驗(yàn)、方差分析等處理，對(duì)等級(jí)資料的進(jìn)

5、行秩和檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1、AV組大鼠染菌后6h開(kāi)始出現(xiàn)較明顯的毒血癥狀，并隨時(shí)間的延長(zhǎng)加劇，24h達(dá)高峰，瀕臨死亡；AVA組大鼠毒血癥狀明顯輕于AV組，36h后癥狀基本消失，10d末大鼠均存活。 2、A組大鼠血清ALT、AST均明顯高于N組(P＜0.05)；AV組大鼠血清ALT、AST在染菌后2h即開(kāi)始明顯升高，并隨時(shí)間的延長(zhǎng)進(jìn)行性升高，24h達(dá)高峰，以AST為主(與A組比，P＜

6、0.01)：AVA組大鼠血清ALT與AST變化曲線與AV組一致，但其水平明顯低于各相同時(shí)間點(diǎn)AV組(P＜0.01)。 3、A組大鼠血清MMP-9水平較N組高(P＜0.05)：AV組大鼠血清MMP-9水平在染菌后6h，12h，24h均明顯高于A組(P＜0.05)，12h是高峰，24h已明顯回降(與12h比，P＜0.001)；AVA組大鼠血清MMP-9變化曲線與AV組一致，各時(shí)間點(diǎn)MMP-9水平低于AV組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)，但僅6h點(diǎn)有統(tǒng)計(jì)

7、學(xué)意義。 4、AV組大鼠染菌后6h見(jiàn)肺泡充血水腫，少許炎細(xì)胞浸潤(rùn)，12h損傷加重，到24h可見(jiàn)大量的炎細(xì)胞浸潤(rùn)，淋巴濾泡形成，肺泡結(jié)構(gòu)模糊，伴肺泡腔出血。AVA組多數(shù)大鼠肺病理改變相對(duì)輕于同一時(shí)間點(diǎn)的AV組。對(duì)各組大鼠肺臟炎癥分度進(jìn)行秩和檢驗(yàn)，AV組大鼠染菌后6h，12h，24h肺臟炎癥均明顯重于N組(P均＜0.05)，且染菌后24h肺臟炎癥明顯重于染菌后6h及A組(P均＜0.05)。AVA組大鼠染菌后24h肺臟炎癥輕于同時(shí)間點(diǎn)

8、AV組(P=0.051). 5、A組大鼠肝臟可見(jiàn)輕度脂肪變性。AV組大鼠6h見(jiàn)少許炎細(xì)胞浸潤(rùn)，12h炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)增多伴肝細(xì)胞水腫，24h見(jiàn)肝細(xì)胞水腫明顯，匯管區(qū)見(jiàn)大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)。對(duì)各組大鼠肝臟炎癥分度進(jìn)行秩和檢驗(yàn)，AV組24h肝臟炎癥明顯重于A組及N組(P均＜0.05)。 結(jié)論： l、酒精性肝病創(chuàng)傷弧菌膿毒癥大鼠血清MMP-9水平明顯高于對(duì)照組，在膿毒癥早期即可升高，中期達(dá)高峰，而膿毒癥后期卻明顯下降?？咕幬锏?/p>