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文檔簡介
1、目的:探討HBV及其抗原成份對α干擾素(IFN-α)抗病毒活性可能存在的拮抗機制。
方法:逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測IFN-α處理的HepG2.2.15細胞在不同處理時間點的STAT1、STAT2、IRF-9 mRNA表達水平,并比較分析干擾素抗病毒蛋白MxA mRNA在HepG2和HepG2.2.15細胞中的表達;以表達抗病毒蛋白MxA的重組質(zhì)粒pcDNA3.1-Flag-MxA (wild-type) 轉(zhuǎn)染
2、肝胚瘤細胞株HepG2.2.15細胞,采用ELISA和Real-time PCR法分別檢測轉(zhuǎn)染的HepG2.2.15細胞上清HBV抗原和細胞外HBV DNA;將HBV核心蛋白表達質(zhì)粒(pHBc-EGFP)轉(zhuǎn)染HepG2細胞,通過RT-PCR法分析IFN-α抗病毒蛋白MxA、PKR和2'-5'OAS mRNA表達水平。
結(jié)果:研究發(fā)現(xiàn)IFN-α處理后HepG2.2.15細胞STAT1、STAT2、IRF-9 mRNA表達水平
3、明顯升高,抗病毒蛋白MxA mRNA在HepG2.2.15細胞中未被檢測到,而在HepG2細胞中卻能表達;轉(zhuǎn)染 MxA重組質(zhì)粒的HepG2.2.15細胞能夠表達MxA,并顯示MxA具有一定的抗HBV活性;進一步研究發(fā)現(xiàn)在轉(zhuǎn)染HBV核心蛋白(HBc)表達質(zhì)粒的HepG2細胞中,抗病毒蛋白PKR和2'-5'OAS mRNA表達水平未見明顯改變,而MxA mRNA表達水平顯著降低。
結(jié)論:HBV及其抗原成份(HBc)并不影響α干
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