煙粉虱B和Q隱種細(xì)胞色素P450 CYP6亞家族比較分析.pdf

1、煙粉虱Bemisia tabaci(Gennadius)是世界性重大外來入侵害蟲之一，每年因煙粉虱的危害給我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，在我國危害最為嚴(yán)重的為B型和Q型煙粉虱。由于殺蟲劑的廣泛使用，煙粉虱對很多殺蟲劑產(chǎn)生了抗藥性。研究證明Q型煙粉虱對殺蟲劑的抗藥性顯著強(qiáng)于B型煙粉虱，導(dǎo)致近年來Q型煙粉虱逐漸取代了B型煙粉虱成為優(yōu)勢種群。本研究選用新煙堿類殺蟲劑噻蟲啉藥劑誘導(dǎo)，利用實時熒光定量PCR分析，找出與抗噻蟲啉藥劑相關(guān)的抗性基

2、因，最后應(yīng)用RNAi技術(shù)驗證抗性基因的功能，為煙粉虱的抗藥性防治和治理提供了重要的理論基礎(chǔ)。
　　根據(jù)轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)信息選取細(xì)胞色素P450 CYP6 CX和DW兩個亞家族基因成員作為候選基因，篩選出12對CX、DW家族基因的定量引物。
　　選擇對煙粉虱高效的新煙堿類殺蟲劑噻蟲啉對B、Q型煙粉虱進(jìn)行毒力測定。B、Q型煙粉虱在各個藥劑濃度梯度條件下的死亡率結(jié)果表明，Q型煙粉虱的抗藥性顯著強(qiáng)于B型煙粉虱，實驗結(jié)果與現(xiàn)有研究結(jié)果一致。

3、
　　利用實時熒光定量PCR分析未經(jīng)藥劑處理的B、Q型煙粉虱候選基因表達(dá)量差異，發(fā)現(xiàn)大部分基因在Q型煙粉虱的表達(dá)量高于B型煙粉虱。然后用噻蟲啉藥劑處理，定量分析處理后候選基因的表達(dá)量變化，結(jié)果表明CX5、CX6、CX7以及DW2基因在藥劑處理后都不同程度上調(diào)表達(dá)。其中CX5、CX7基因的表達(dá)量與藥劑濃度呈現(xiàn)出一定程度的正相關(guān)，說明其在煙粉虱的抗藥性中發(fā)揮了重要作用。
　　根據(jù)前期實驗結(jié)果選擇表達(dá)量差異顯著的CX5基因作為RN