2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:構(gòu)建轉(zhuǎn)基因細(xì)胞模型HL7702-HBx,觀察HBx基因?qū)L7702細(xì)胞增殖、周期和凋亡的影響,應(yīng)用藥物15d-PGJ2作用HL7702-HBx細(xì)胞及轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒組HL7702-NC細(xì)胞,觀察細(xì)胞增殖、周期和凋亡的改變,探討15d-PGJ2在誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制和意義。
  方法:應(yīng)用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染和G418篩選構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)HBx的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞HL7702-HBx細(xì)胞,RT-PCR和Western blot鑒定HBx mRNA與蛋

2、白的表達(dá)。分別以四唑藍(lán)(MTT)比色法、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HL7702-HBx細(xì)胞及對(duì)照組HL7702-NC細(xì)胞及應(yīng)用藥物15d-PGJ2作用后的HL7702-HBx細(xì)胞、HL7702-NC細(xì)胞的增殖、周期和凋亡。Western blot檢測(cè)各組細(xì)胞中凋亡信號(hào)通路Akt、NF-κB、Caspase-3、Bax、Bcl2等蛋白的表達(dá)。
  結(jié)果:HL7702-HBx細(xì)胞中有HBx mRNA和蛋白的表達(dá),細(xì)胞增殖快與對(duì)照組HL7702-N

3、C細(xì)胞有顯著差別(P<0.05);流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)HL7702-HBx細(xì)胞凋亡率顯著降低,細(xì)胞周期分布顯示其G0/G1期細(xì)胞比例減少,S期細(xì)胞比例明顯增加。應(yīng)用藥物15d-PGJ2作用后,兩株細(xì)胞的增長(zhǎng)均受到抑制,抑制率隨藥物濃度增大而升高;進(jìn)行流式檢測(cè)后發(fā)現(xiàn),兩株細(xì)胞的凋亡率均顯著增加,周期分布均表現(xiàn)為G0/G1期細(xì)胞比例顯著增加,S期細(xì)胞比例顯著降低。這些變化均以HL7702-HBx細(xì)胞改變的更顯著。細(xì)胞中凋亡信號(hào)通路Akt、NF

4、-κB、Caspase-3、Bax、Bcl2等蛋白的表達(dá)存在顯著變化。
  結(jié)論:HBx基因通過(guò)可促進(jìn)細(xì)胞膜受體凋亡相關(guān)蛋白Akt、NF-κB的表達(dá),從而抑制細(xì)胞凋亡。在線(xiàn)粒體凋亡通路中,HBx基因促進(jìn)Bax表達(dá)而抑制Bcl2表達(dá),可促進(jìn)細(xì)胞凋亡。這表現(xiàn)了HBx基因?qū)Φ蛲龅碾p向調(diào)節(jié)作用。應(yīng)用藥物15d-PGJ2作用后,HL7702-HBx細(xì)胞和HL7702細(xì)胞均表現(xiàn)出了促凋亡蛋白的表達(dá)增加,抑制凋亡蛋白的表達(dá)減少,這種改變,在HL

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