HBX蛋白調(diào)控Gankyrin致肝細(xì)胞癌的機(jī)制研究.pdf

1、目的:研究HBX基因?qū)ankyrin表達(dá)水平的影響以及Wnt/β-catenin信號(hào)通路在HBX基因調(diào)控Gankyrin表達(dá)中的作用，試圖闡明乙肝相關(guān)性HCC的發(fā)病過(guò)程中可能的分子機(jī)制。
　　方法:
　　1.運(yùn)用RT-PCR與Western-blot技術(shù)分別從mRNA水平和蛋白質(zhì)水平檢測(cè)Gankyrin在HepG2與HepG2.2.15細(xì)胞中的表達(dá)水平;
　　2.Ad—HBX感染HepG2與SMMC-7721細(xì)胞，運(yùn)

2、用RT-PCR與Western-blot技術(shù)分別從mRNA水平和蛋白質(zhì)水平檢測(cè)Gankyrin的表達(dá)情況;
　　3.用脂質(zhì)體將siRNA-HBX分子轉(zhuǎn)染HpeG2.2.15細(xì)胞，運(yùn)用RT-PCR與Western-Blot技術(shù)分別從mRNA水平和蛋白質(zhì)水平檢測(cè)Gankyrin的表達(dá)情況;
　　4.Ad—β-catenin轉(zhuǎn)染HepG2、SMMC-7721細(xì)胞，Western-blot法檢測(cè)β-catenin與Gankyrin的

3、表達(dá)情況;
　　5.在沉默β-catenin的HepG2、SMMC-7721細(xì)胞中過(guò)表達(dá)HBX基因，Western-blot法檢測(cè)β-catenin與Gankyrin的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1.HepG2.2.15細(xì)胞Gankyrin表達(dá)水平比HepG2細(xì)胞Gankyrin表達(dá)水平高;
　　2.HepG2與SMMC-7721細(xì)胞系中Ad—HBX-GFP組較Ad—GFP組，Gankyrin表達(dá)水平明顯升高;<

4、br>　　3.HepG2.2.15細(xì)胞中Si-HBX組較Si-NC組，Gankyrin表達(dá)水平明顯下降;
　　4.在HepG2與SMMC-7721細(xì)胞系中過(guò)表達(dá)β-catenin后，Ad—β-catenin-GFP組較Ad-GFP組Gankyrin的表達(dá)水平較對(duì)照組明顯上調(diào);
　　5.在HepG2與SMMC-7721細(xì)胞系中沉默β-catenin后，過(guò)表達(dá)HBX基因，Gankyrin的表達(dá)水平未見(jiàn)升高.
　　結(jié)論:通過(guò)