PPARγ配體15-d-PGJ2對JEG-3細(xì)胞系浸潤能力的影響.pdf

1、目的： 胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞的浸潤是細(xì)胞-細(xì)胞、細(xì)胞-基質(zhì)間相互作用的機(jī)能變化，這一過程發(fā)生細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)成分的變化，受到細(xì)胞因子、生長因子、粘附分子、蛋白酶類和激素等多種因素的調(diào)控。過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisomeproliferation-activated receptot-γ，PPAR γ)是近年發(fā)現(xiàn)的一類核激素受體超家族成員，處于多種信號轉(zhuǎn)錄途徑的交叉點(diǎn)，在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)控多種細(xì)胞的增殖、侵襲、分化和凋亡

2、[1]。研究發(fā)現(xiàn)，在神經(jīng)母細(xì)胞瘤、惡性膠質(zhì)瘤、前列腺癌、子宮內(nèi)膜癌、肺癌細(xì)胞中PPAR γ配體可以抑制腫瘤細(xì)胞增生，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的分化，誘導(dǎo)凋亡，具有強(qiáng)大的抗細(xì)胞增殖作用[2-5]。本實(shí)驗(yàn)在培養(yǎng)絨癌細(xì)胞系(JEG-3細(xì)胞系)表達(dá)PPAR γ蛋白基礎(chǔ)上，應(yīng)用被覆基質(zhì)膠matrigel的侵襲模型研究PPAR γ及其配體對JEG-3細(xì)胞系浸潤能力的影響，這為進(jìn)一步研究其在滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤異常的妊娠并發(fā)癥中的作用提供了依據(jù)。 材料與方法：

3、 通過細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)JEG-3細(xì)胞系、利用免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)鑒定PPARγ蛋白在JEG-3細(xì)胞中的表達(dá)。應(yīng)用被覆matrigel的體外侵襲模型transwell觀測PPAR γ激動劑15-d-PGJ2對JEG-3細(xì)胞系浸潤能力影響。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 免疫熒光細(xì)胞化學(xué)結(jié)果顯示在JEG-3細(xì)胞系中有PPAR γ蛋白的表達(dá)，綠色熒光陽性信號主要定位在細(xì)胞核。Transwell浸潤實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，JEG-3細(xì)胞經(jīng)15-d-P

4、GJ2處理后，浸潤能力明顯減弱，當(dāng)15-d-PGJ2濃度為0.1μmol/L、1μmol/L和10μmol/L時(shí)，細(xì)胞浸潤指數(shù)分別為0.81±0.03、0.64±0.01和0.55±0.04，與對照(1.00±0.00)相比，有顯著性差異(P<0.01)，且隨著藥物濃度的升高，JEG-3細(xì)胞浸潤指數(shù)亦逐漸下降，具有劑量依賴關(guān)系。 結(jié)論：本研究通過免疫熒光細(xì)胞化學(xué)方法鑒定了PPAR γ在JEG-3細(xì)胞中的表達(dá)和定位，應(yīng)用Trans

5、well小室侵襲模型檢測了PPAR γ及配體15-d-PGJ2對其浸潤能力的影響。結(jié)果說明PPAR γ被配體激活后可負(fù)向調(diào)控滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤，由于15-d-PGJ2是PPAR γ的天然配體，天然存在組織細(xì)胞中，我們可以假設(shè)，在人類早孕期由于某種原因?qū)е履柑ソ缑娲祟惻潴w增多，必將抑制滋養(yǎng)細(xì)胞的浸潤，如此類配體減少，則促進(jìn)浸潤。因此，通過本研究進(jìn)一步明確PPAR γ及配體與滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤的關(guān)系，完善滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤機(jī)制，為今后PPAR γ及配體在滋養(yǎng)