PPARγ配體15d-PGJ-,2-在近交系大鼠肝移植中對(duì)T淋巴細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、目的：在建立近交系大鼠原位肝移植急性排斥反應(yīng)模型的基礎(chǔ)上，體內(nèi)使用PPARγ配體15d-PGJ<,2>，了解其能否抑制受體大鼠IL-2的分泌、抑制T淋巴細(xì)胞增殖活性并誘導(dǎo)T細(xì)胞凋亡，進(jìn)而觀察PPARγ配體在大鼠肝移植術(shù)后抗排斥及誘導(dǎo)免疫耐受中的作用。 方法：采用“Kamada”二袖套管法，利用封閉群大鼠SD和Wistar進(jìn)行建模技能訓(xùn)練。繼而選用近交系大鼠DA為供體、Lewis為受體，建立穩(wěn)定、強(qiáng)烈的大鼠原位肝移植急排模型。然后

2、將大鼠分為耐受組(Lewis→Lewis，A組，n=8)無(wú)任何干預(yù)措施、對(duì)照組(DA→Lewis，B組，n=10)腹腔注射生理鹽水1ml和實(shí)驗(yàn)組(DA→Lewis，C組，n=10)腹腔注射PPARγ配體15d-PGJ<,2>200ug·kg<'-1>·d<'-1>(均在術(shù)前1d至術(shù)后14d)，觀察三組術(shù)后5d、7d癥狀體征；生存時(shí)間；肝功能指標(biāo)；移植肝病理特征；實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)移植肝中PPARγmRNA的表達(dá)；ELISA法檢

3、測(cè)血漿IL-2的變化；體外培養(yǎng)受體大鼠脾臟中T淋巴細(xì)胞，MTT法檢測(cè)T細(xì)胞增殖活性；TUNEL法檢測(cè)肝組織中淋巴細(xì)胞的凋亡情況。 結(jié)果：①三組大鼠肝移植主要手術(shù)步驟所需時(shí)間無(wú)明顯差異。A組大鼠無(wú)明確排斥表現(xiàn)，肝功能損害較輕，1周后恢復(fù)正常。受鼠可較長(zhǎng)時(shí)間存活，表現(xiàn)為耐受狀態(tài)；B組大鼠手術(shù)1周后出現(xiàn)典型的重度排斥反應(yīng)，肝功能損害較重，血漿TBIL、ALT、AST、ALP等明顯升高，ALB下降，大鼠中位生存時(shí)間lld；C組大鼠術(shù)后出

4、現(xiàn)輕到中度排斥反應(yīng)，肝功損害較B組輕，中位生存時(shí)間58d，明顯高于B組(P

5、于B組，差異有顯著意義(P<0.05)；⑤B組術(shù)后7天匯管區(qū)可見(jiàn)部分淋巴細(xì)胞凋亡，凋亡指數(shù)AI為10.3±2.5％。C組見(jiàn)大量淋巴細(xì)胞凋亡，凋亡指數(shù)AI為35.6±4.6％，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說(shuō)明15d-PGJ<,2>，誘導(dǎo)凋亡有效；⑥與耐受組(A組)相比，實(shí)驗(yàn)組(C組)肝功中的TBIL、ALT、ALB，IL-2的濃度，T細(xì)胞活化指數(shù)之間差異有顯著意義(P<0.05)。且C組中位生存時(shí)間也低于A組，差異有顯著意義(