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1、天津商學(xué)院碩士學(xué)位論文富含酪氨酸新型抗菌肽(Trpi)抗菌機(jī)理的研究姓名:王軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):發(fā)酵工程指導(dǎo)教師:龐廣昌20060501StudyofMechanismofTyrosine—richpeptideofImmunostimulatingAbstract即osinerichPeptideofImmunostimulating(哪i)wasseparatedfrom血eproductsofenzymolysisofcas
2、eincatalysedbytrypsininourlaboratoryTIpicoukipossessantimicrobialactivityagainstGr鋤一negativeandGr鋤positivebacteria,suchaSE∞,f,S口“旭淞,anderlhancecellmediatedimmunitymarkedly111thjspaper,t11epreparatiVetechllicsofTrpiwasopt
3、曲izedbya雞ustingt11eparaⅡleterofeflzymolysisofcasein,mepuriflcationof哪iwithresinwasstudied,血epIof唧iwasdeteHnined,ThespatialstructureofT印iwasconjectured,andthemechatlismof卻i啪salsostudiedbydetenniningthechangesofionsbeforca
4、ndaftert11eactionofp印tidewithEcD,fintheliquidculturemedimTheresultsofthestudyshowedthattheoptimumenzymehydrolysisconditionsofenzymolysisofcaseincatalysedbytrypsinwerethatdissolvingcaseinin、Ⅶterat80℃todenaturalizethecasei
5、nmoderatelyflrst,ment聊siIlizedat45℃,substrate10%(w~),enzyme:substrateratio【E/S】1:100(W/W)for90minutesNKA一9,whichhasbetteradsorptionanddesorptionnmction,wastlemost印pmpriateresinfortlepllrmcationof聊Thcconcentrationof06m∥mL
6、,pH72andtheelutionwith4BV50%ethaIloIiIl1BVmspeedweretheoptimalconditions111epIof哪iwas861,whichwasdeterminedbyIEF—PAGEThespatialstmctureof哪i,determinedaccordingastheparameterof鋤inoacidresidues,formedTrpi,computedbyTheSwis
7、s—PdbViewer(v37),suchasbonds,nonbonded,electrostaticconstraint,torSionandsoon,waslikelytohavefbllrpuckers,centralizedcha唱e對(duì)ea,aIldthetendencyofdistributingsymmetricallyofpolar跏inoacida11dnonp01araminoacidThechangesoft11e
8、Kandc一、vcrcinducedby哪iaRer15min,andmatoftheM∥wasaRerlominThee&ctof哪iwasin血cedrapidly_Basedonthese,themech姐ismof7r印iwascoI巧ecturedasfollows:哪i、vaslikelytodispIacethemagnesiumionsonthesurf砬eoftheoutermembrane,thenbindtight
9、lytothenegativelychargedmembrane1ipopolysaccharide(LPS)orneutralizemechargeovera11areaoftheoutermembralle,subsequentlydistoningtheoutermembrallestmctureOncethisisaccomplished,Trpicandrillthroughtheoutermembrane,combineth
10、ec”oplasmicmembranebythepolarsidechains,thenreorientperpendiculart0themembranea11daligninamannerinwhichmehydrophobicsidechainsfaceoutwardsthelipidenViromemwh訂ethepoIarsidecbainsali髓inwardtofbrmtransmembranepores,leadingt
11、oleakageofionsa11dmetabolites,ensuingdepoIarization,lossofmembrane—coupledrespimtionandbiop01ymersynmesis,a工1dultimatelyceUdeamTheelucidationofthemechanismsofmeactionof哪iwasabletoprovideabasisforresearchanddeVelopmentof劬
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