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1、本論文開展了乳蛋白源抗菌肽的生物學(xué)研究:采用胰蛋白酶和胃蛋白酶作為工具酶,分別確立了乳蛋白經(jīng)兩種蛋白酶酶解產(chǎn)生抗菌肽的條件;酶解產(chǎn)物通過(guò)凝膠層析和離子交換層析進(jìn)行分離,獲得了兩個(gè)具有抗菌活性組分;并對(duì)兩個(gè)抗菌肽制劑的抑菌作用和熱穩(wěn)定性進(jìn)行具體的研究。 通過(guò)正交試驗(yàn)和抗菌試驗(yàn),綜合水解效果和抑菌效果兩方面考慮,確立了兩種蛋白酶酶解乳蛋白產(chǎn)生抗菌肽的最佳水解條件為:胰蛋白酶水解乳蛋白條件為底物濃度10%,[E]/[S]為2.5%,反
2、應(yīng)溫度50℃,pH值8.0,反應(yīng)時(shí)間3h;胃蛋白酶水解乳蛋白條件為底物濃度10%,[E]/[S]為14%,反應(yīng)溫度37℃,pH值1.5,反應(yīng)時(shí)間3h。 選用Sephadex G—75和Sephadex G—15凝膠色譜,SP—Sepharose Fast Flow離子交換色譜來(lái)進(jìn)行分離純化乳蛋白的兩種酶解產(chǎn)物,分別分離得到了較純的具有抗菌活性的組分。 對(duì)獲得的兩個(gè)抗菌組分進(jìn)行微量稀釋法抗菌試驗(yàn),體外抑菌實(shí)驗(yàn)顯示兩個(gè)抗菌組
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