脊髓水平KIF17-NR2B轉(zhuǎn)運系統(tǒng)在小鼠骨癌痛形成中的作用及中醫(yī)藥干預(yù)的研究.pdf

1、目的:探討脊髓水平KIF17-NR2B轉(zhuǎn)運系統(tǒng)在骨癌痛形成中的作用以及云南白藥對骨癌痛的治療作用及其機制的探討。
　　方法:C3H/HeNCrlVr雄性小鼠股骨骨髓腔注射NCTC2472纖維肉瘤細胞制作骨癌痛模型;以等體積的最小必須培養(yǎng)基(α-MEM)代替NCTC2472纖維肉瘤細胞骨髓腔內(nèi)注射制作假手術(shù)模型。用自發(fā)性抬足次數(shù)/2min、機械刺激縮足反射閾值(PWMT)和熱痛覺縮足潛伏期(PWTL)評估骨癌痛小鼠痛行為學表現(xiàn);同時

2、檢測骨癌痛小鼠脊髓背角淺層Kif17與NR2B蛋白與細胞水平的基礎(chǔ)表達規(guī)律。鞘內(nèi)給予NR2B特異性拮抗劑艾芬地爾(ifenprodil)和云南白藥給藥灌胃進行干預(yù)。在不同時間點觀察小鼠痛行為學變化，取脊髓腰膨大部位(L3-L5)，分別應(yīng)用免疫組織化學和westernblot方法檢測脊髓背角淺層Kif17-NR2B轉(zhuǎn)運系統(tǒng)蛋白與細胞的表達變化。
　　結(jié)果:(1)小鼠左股骨骨髓腔注射NCTC2472纖維肉瘤細胞，可以誘發(fā)骨癌痛小鼠進行

3、性的痛行為學變化，表現(xiàn)為與假手術(shù)組比，腫瘤組術(shù)后10 d（0.85±0.30），14 d（0.85±0.16）機械刺激縮足反射閾(g)值降低(P＜0.05);腫瘤組術(shù)后10 d（12.01±4.08），14d（14.99±4.25）熱痛覺縮足潛伏期縮短(s)(P＜0.05);(2)小鼠左股骨骨髓腔注射NCTC2472纖維肉瘤細胞可導(dǎo)致腫瘤組術(shù)后14d脊髓背角淺層NR2B陽性神經(jīng)元細胞數(shù)（43.5±14.15）與蛋白表達（1.99±0.4

4、4）增高(P＜0.01);同時Kif17陽性神經(jīng)元細胞（2.6±0.7）與蛋白表達（2.6±0.7）增高(P＜0.01);(3)艾芬地爾鞘內(nèi)注射可以改善骨癌痛小鼠的痛行為學表現(xiàn)，可以明顯抑制脊髓水平NR2B與Kif17陽性神經(jīng)元細胞數(shù)與蛋白的表達，給藥后2h，NR2B陽性神經(jīng)元細胞數(shù)（2.30±0.70）與蛋白表達（0.52±0.13）明顯下降(P＜0.01);同時Kif17陽性神經(jīng)元細胞（2.41±0.60）與蛋白表達增高（0.49±

5、0.09）明顯下降(P＜0.01);(4)灌胃給予云南白藥可以劑量依賴性地改善骨癌痛小鼠的痛行為學，術(shù)后14 d，與腫瘤組比，可以抑制脊髓水平NR2B陽性神經(jīng)元細胞數(shù)（31.31±7.66）與蛋白表達（0.93±0.23）的表達(P＜0.05)。
　　結(jié)論:脊髓水平Kif17-NR2B轉(zhuǎn)運系統(tǒng)在骨癌痛中發(fā)揮重要作用;ifenprodil可以抑制脊髓水平NR2B、Kif17蛋白與細胞的表達;云南白藥可以抑制脊髓水平NR2B、Kif1